利用高效液相色譜法同時測定土曲霉發酵液中衣康酸及殘糖

劉 蘭，黃筱萍，熊大維，黃國昌，張 婷

(江西省科學院微生物研究所，330096，南昌)

利用高效液相色譜法同時測定土曲霉發酵液中衣康酸及殘糖

劉 蘭，黃筱萍，熊大維，黃國昌，張 婷

(江西省科學院微生物研究所，330096，南昌)

建立了高效液相色譜(HPLC)快速測定土曲霉發酵液中衣康酸及殘糖的分析方法。使用TOSOH Tskgel oApak-A色譜柱，以0.75 mmol/L H2SO4為流動相，在柱溫45 ℃，流速1.0 mL/min的條件下，采用示差折光檢測器進行檢測。結果表明，該方法在20 min內可實現發酵液中衣康酸和葡萄糖的完全分離與定量。衣康酸在0～10.056 g/L范圍內的線性關系良好，相關系數為0.999 9，相對標準偏差(n=6)為0.33%，加標回收率100.88%～102.74%。葡萄糖在0～6.016 g/L范圍內的線性關系良好，相關系數為0.999 9，相對標準偏差(n=6)為0.12%，加標回收率101.26%～103.12%。該法適用于土黃霉發酵液中衣康酸和葡萄糖的快速、高效分離和定量測定。

高效液相色譜；衣康酸；葡萄糖；土曲霉；發酵液

0 引言

衣康酸(Itaconic acid)學名亞甲基丁二酸、甲叉丁二酸、亞甲基琥珀酸[1]，是世界上5大有機酸之一。由于其含不飽和雙鍵，具有活潑的化學性質，能進行各種加成反應，酯化反應和聚合反應，是化學合成和化工生產的重要工業原料，在化纖、合成樹脂、塑料、橡膠、醫藥、表面活性劑以及食品領域具有廣泛的應用，隨著衣康酸具有的獨特性能被認識及應用范圍的迅速擴大，衣康酸的生產技術也在不斷進步[2]。

發酵法生產衣康酸由于原料易得，工藝技術成熟，是目前國內外工業生產一致采用的方法[4]。測定衣康酸發酵液中殘糖及衣康酸的變化，對揭示代謝途徑以及控制發酵過程，從而優化發酵工藝條件意義重大。……