25%粉銹寧WP防治雞蛋花黃銹病及其毒力研究

杜小姣，楊秉建，葉光明，李博，黃慧青，文沛玲

(深圳市日昇園林綠化有限公司，深圳 518000)

雞蛋花(Plumeriarubra)是夾竹桃科(Apoynaceae)植物，原產(chǎn)墨西哥，現(xiàn)已引種于熱帶及亞熱帶的許多地區(qū)[1-3]。樹種樹形獨特，頗具觀賞性，屬我國南方園林常用樹種[4]。雞蛋花的花色素雅，花氣清香，可提取香精供高級化工及食品之用，其花、樹皮、枝葉均有藥用價值[5-9]。

目前，在華南各地雞蛋花的種植已初具規(guī)模[10-15]。2013年6～7月，在深圳市日昇園林綠化有限公司的雞蛋花苗圃，2年生雞蛋花苗木感染了嚴重的黃銹病。

雞蛋花黃銹病是由真菌中的雞蛋花花鞘銹菌(Coleosporiumplumeria)寄生引起的一種病害[16，17 ]。發(fā)病初期葉背面產(chǎn)生橘黃色膿包或不規(guī)則點狀粉末的夏孢子堆，并經(jīng)氣流傳播，重復侵染，隨著時間延長粉末點越來越密，然后，葉正面相應(yīng)位置有小的淺黃色病斑，后期葉背多出現(xiàn)枯斑，造成葉片光合作用受阻，甚至導致葉片脫落。有關(guān)雞蛋花黃銹病防治報道以25%粉銹寧WP 1 500～2 000倍液進行防治[18-20]。本試驗借鑒已有資料探討了粉銹寧對雞蛋花黃銹病的防治效應(yīng)及其毒力問題，為今后熱帶及亞熱帶地區(qū)如何防治黃銹病奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 病情調(diào)查

分別于2013年6 月下旬發(fā)病高峰期(噴藥前) 和7 月下旬病情停止發(fā)展時調(diào)查病情。隨機選擇120 株雞蛋花樹，每樹調(diào)查20個葉片。病情以常用反應(yīng)型為主要依據(jù)參照文獻[21]進行，未染病的為0 級，病株從輕到重依次為1、2、3、4 級[22]。

0 級為葉片無病變，枝條無癥狀或健枝，無病；

1 級為葉片病斑少(<5 個) 而小(<1 cm2)枝條有輕度癥狀，輕度阻礙生長；株發(fā)病率≤25%；

2 級為葉片病斑小而多(>5 個) ，枝條有中度而易于識別的癥狀；株發(fā)病率25.1%～50%；

3 級為葉片病斑大而少，枝條失綠；株發(fā)病率50.1%～75%；

4 級為葉片病斑大而多，枝條有非常嚴重癥狀或枯萎，株發(fā)病率≥75.1%。

病情指數(shù)DI=Σ(各級病葉數(shù)×發(fā)病級別)/總?cè)~數(shù)×最高發(fā)病級數(shù)×100。

(1)

1.2 試驗材料

(1)殺菌劑 25%粉銹寧WP，由成都邦農(nóng)化學有限公司提供，化學名為1-(4-氯苯氧基)-3，3-二甲基-1-(1H-1，2，4-三唑-l-基)-2-丁醇，推薦濃度1 500～2 000倍液。殺菌劑屬高效、低毒、低殘留、持效期長、內(nèi)吸性強的三唑類殺菌劑，被植物各部分吸收后，能在植物體內(nèi)傳導。

(2)靶標 雞蛋花黃銹病。

1.3 試驗設(shè)計

1.3.1 同一劑量對不同感病級的防治 測試不同病級對粉銹寧藥效的差異性。首先，噴液量按75 kg/666.6 m2、2 000 倍稀釋倍數(shù)(推薦平均數(shù))計算，則商品藥量為37.5 mL，折合有效成份9.375 g；按4個病級設(shè)置處理，并設(shè)1 個對照處理，每處理含15個病株(占地約10 m2)、1.125 kg 噴液量、0.562 5 mL商品量、0.140 6 g/(10 m2) 有效成分；用手動噴霧器進行葉面噴霧[23]。

1.3.2 等比系列用藥量對雞蛋花黃銹病的防治試驗 等比系列有效用藥量換算按1∶2比例(農(nóng)藥試驗常用比例之一)[22]將25%粉銹寧WP配成5個使用濃度，以推薦使用濃度下限值的有效成分作為組中值，然后向上、向下各插2組，則10 m2有效用藥量依次為0.750 0 g、0.375 0 g、0.187 5 g、0.093 8 g、0.046 9 g。

1.3.3 試驗方法 每個劑量為1個試驗處理，另設(shè)1個對照組，每個處理面積10 m2(約含15個病株)、1.125 kg 噴液量，商品用藥量和稀釋倍數(shù)隨有效用藥量按比例增減；用手動噴霧器進行葉面噴霧。

1.3.4 藥效鑒定 采用系統(tǒng)調(diào)查方法在防治前、后調(diào)查并計算病情指數(shù)與防效[21]。

1.4 用幾率值法求ED50及毒立回歸方程

(1) 校正死亡率=(處理組死亡率-對照組死亡率)/100 -對照組死亡率 ；

(2) 把校正死亡率轉(zhuǎn)換成死亡幾率值；把劑量轉(zhuǎn)換成對數(shù)；用最小二乘法求出臨時獨立回歸直線方程，并計算出期望幾率值；根據(jù)期望幾率值通過查 計算工作幾率值表 求出工作幾率值、權(quán)重系數(shù)和權(quán)重值；

(3) 計算ED50及95%可信限。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用機率值法計算25%粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病的毒力方程及適宜用藥量[23]。調(diào)查和試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0 分析軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞蛋花樹病情分析

病情調(diào)查結(jié)果顯示(表1)，(1)雞蛋花幼苗群體中4 個病級共存，且除2、4 兩個病級之間的發(fā)病率差異不明顯外，其余各病級之間的發(fā)病率和病情指數(shù)都存在著明顯的差異性；(2)總體發(fā)病率高達93.33%，其中，病情重或較重的3、4兩個病級發(fā)病率占60.83%；(3)總體病情指數(shù)高達70.01，其中，3、4 病級的病情指數(shù)分別為31.97 和24.88；(4)發(fā)病率和病情指數(shù)均呈升級態(tài)勢，預(yù)示著如果不采取有效防控措施，病情將會更趨嚴重。

表1 雞蛋花樹黃銹病的病情分析

2.2 同一劑量的粉銹寧對不同病情雞蛋花防治效果

0.140 6 g/(10 m2)有效用藥量對不同病級雞蛋花防治結(jié)果表明(表2)，用0.140 6 g/(10 m2) 粉銹寧WP用藥量：(1) 防治不同病級雞蛋花黃銹病差異極顯著(P<0.01)；(2) 低病情指數(shù)對殺菌劑比較敏感，因而防治輕病級效果比防治重病級效果要好；防治效果與病情指數(shù)呈負相關(guān)關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)r= -96.93， 回歸方程為y=69.335 7-1.628 2x，即隨著病情指數(shù)增加，防治效果呈下降趨勢，表明病情指數(shù)越高，防治難度越大；(3)0.140 6 g/(10 m2)有效用藥量未能達到有效控制雞蛋花黃銹病，其中，除病情較輕的1級病害病情指數(shù)下降了2/3以外，其余各病級病情指數(shù)均未控制過半，甚至病情嚴重的4 級最終病情指數(shù)還高達試驗前的80%，表明使用劑量偏低，或還應(yīng)連續(xù)施藥；(4)從對照組看，試驗前后病情還在發(fā)展，它標志當時的溫、濕度等環(huán)境條件有利于雞蛋花黃銹病病情蔓延，這可能是造成防治效果不佳的因素之一。

表2 0.140 6 g粉銹寧WP防治雞蛋花黃銹病效果

注：同列不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

2.3 25%粉銹寧WP等比系列劑量的防治效應(yīng)及其ED50

用等比系列的5個劑量對黃銹病病情指數(shù)為86.84的雞蛋花群體進行防治試驗，并用機率值法求ED50及其毒力回歸方程的各種參數(shù)[23](表3)。

2.3.1 等比系列劑量對雞蛋花黃銹病的防治效應(yīng) 對表3中濃度對數(shù)與防效機率值作相關(guān)性分析，得r=0.969 4，說明雞蛋花黃銹病的防治效果與25%粉銹寧WP的使用劑量密切相關(guān)。在試驗設(shè)計的5個劑量中，最低劑量的防效只有29.75%，最高劑量的防效為96.51%，兩個極端劑量相差16倍，而防治效果相差66.76%。同時，在設(shè)計范圍內(nèi)高劑量的防效優(yōu)于低劑量的防效。平均劑量增加1倍，防效就可增加4個百分點。

試驗所用劑量換算成與上一試驗相同的劑量0.140 6g/(10 m2)時，結(jié)果表明上一試驗的仿效為68.42%，而本項試驗的防效還不到50%，這主要是上一試驗中的病情指數(shù)低，而本試驗中的病情指數(shù)高所致，進一步證明25% 粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病的效應(yīng)與病情指數(shù)密切相關(guān)。

使用推薦劑量防治雞蛋花黃銹病(表3)，一次性防效約為50%，本試驗使用的25%粉銹寧WP劑量為0.75 g/10 m2，最佳防效為96.51%，折合推薦使用劑量為49.99 g/(666.6 m2)，相當于最大推薦使用劑量12.5 g/(666.6 m2)的4倍。推薦使用劑量主要用于農(nóng)作物和蔬菜等草本植物銹病的防治，雞蛋花是革質(zhì)葉的木本植物，說明植物質(zhì)地是造成用藥量差異性的主要原因之一。

表3 等比系列劑量對黃銹病的防治效應(yīng)及測定毒力的各項參數(shù)

注：DI為病情指數(shù)；用藥量比例為1∶2

2.3.2 25% 粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病的毒力測定 根據(jù)表3參數(shù)計算求得25%粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病的毒力回歸方程為(圖1)。

y=5.512 9+1.757 9x

由于x=ED50時，其相應(yīng)的死亡幾率值y=5

查反對數(shù)表得：ED50=0.511(g)

圖1 25%粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病的毒力回歸直線

求算ED50的95%可信限。

2.4 雞蛋花不同病情和不同防效的適宜用藥量模擬

適宜用藥量的模擬，就是根據(jù)不同病情指數(shù)以及需要把病情指數(shù)控制到的某種程度，計算應(yīng)有的防治效果和適宜的用藥劑量。假設(shè)用藥劑把病情指數(shù)壓低到5%，先計算出所需防效，再把防效轉(zhuǎn)換成機率值，根據(jù)毒力回歸方程(y=5.512 9+1.757 9x)計算出用藥量的對數(shù)值，最后轉(zhuǎn)換成(查反對數(shù)表)所需的用藥量(表4)。

從表4可看出，防治不同染病程度的雞蛋花黃銹病，其適宜用藥量有明顯差異。這表明控制雞蛋花黃銹病應(yīng)根據(jù)具體病情和防治要求，采用相應(yīng)的劑量有利達到預(yù)期目標。

表4 不同病情指數(shù)及防治效果的適宜用藥劑量模擬示意

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

研究在防治雞蛋花黃銹病的過程中發(fā)現(xiàn)，用25%粉銹寧WP推薦劑量防治效果不甚理想，據(jù)此推測推薦劑量只能對農(nóng)作物和蔬菜等草本植物更有效果，而雞蛋花是木本植物，尤其葉片革質(zhì)化程度大于草本植物，因此，對諸如粉銹寧三唑類殺菌劑的內(nèi)吸性不如草本植物敏感，這是造成防效不理想的原因之一，有待進一步探討。

在防治雞蛋花黃銹病中發(fā)現(xiàn)，用推薦使用劑量進行一次性防治，結(jié)果防治效果與病情指數(shù)呈較高的負相關(guān)關(guān)系(r=-96.93)，防治雞蛋花黃銹病必須選擇適宜用藥量，如果用藥量不足，就會形成亞致死量造成耐藥性的負面影響，增加防治難度和防治成本。

在雞蛋花黃銹病發(fā)病初期，或病情嚴重度級別較低時，雞蛋花花鞘銹菌(Coleosporiumplumeria)對25%粉銹寧WP比較敏感，用較少藥量就可比較容易地控制病情；在病情嚴重度級別較高時，或者病情還在持續(xù)發(fā)展過程中，再進行防治，已錯失防治良機，不僅需要較多農(nóng)藥，而且既不經(jīng)濟，又會造成損失。據(jù)此，建議對雞蛋花黃銹病應(yīng)加強監(jiān)測，以便及早采取防治措施。

雞蛋花黃銹病的病情嚴重度，除取決于本身的感病性外，還同侵染時間、流行期限長短和環(huán)境條件有關(guān)。因此，在運用上述方法模擬各防治目標和防效適宜用藥量的同時，還應(yīng)充分依據(jù)當?shù)鼐唧w條件適當調(diào)整。

3.2 結(jié)論

(1)2013年6～7月，惠州雞蛋花苗圃的雞蛋花黃銹病總體發(fā)病率為93.33%，平均病情指數(shù)70.01，溫、濕度等環(huán)境條件預(yù)示著如不采取有效防控措施，病情將會更趨嚴重。

(2)用0.140 6 g/(10 m2)粉銹寧WP對雞蛋花黃銹病不同梯度病情指數(shù)進行防治結(jié)果顯示：防治效果與病情指數(shù)呈負相關(guān)關(guān)系(r= -96.93%)；病情嚴重度級別低時對殺菌劑比較敏感，防治效果好，反之防治難度大，成本高。

(3)用等比系列用藥量進行防治試驗，用幾率值法的計算步驟求得：ED50=0.511(g)；ED50的95%可信限為0.240～0.627 g；毒力回歸方程：y=5.512 9+1.757 9x。

(4)依據(jù)毒力回歸方程對雞蛋花黃銹病不同病情和不同防效的適宜用藥量模擬結(jié)果顯示：防治不同染病程度的雞蛋花黃銹病，其適宜用藥量有明顯差異。

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