定喘止哮顆粒對支氣管哮喘動物模型血清IFN-γ、IL-4、IL-5的影響

仕 麗 李曉紅 王 檀 于秀華 張麗秀

(長春中醫藥大學附屬醫院，吉林 長春 130021)

支氣管哮喘(簡稱哮喘)的發病機制較復雜，細胞因子與免疫反應和炎性細胞浸潤等在哮喘的發生和進展中發揮著重要的調節作用。目前已發現多種可能的途徑抑制這些特殊的細胞因子,如抗白細胞介素(IL)-4、抗IL-13、抗IL-5等〔1〕。新近的臨床研究表明,對嚴重哮喘,非肽類的IL-5受體拮抗劑將成為治療哮喘的一個新的策略〔2〕。本研究觀察定喘止哮顆粒對哮喘大鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-5含量的影響，研究其對氣道炎癥的作用。

1 材料

1.1主要試劑 卵清蛋白，批號：A5503-25G，Sigma公司產品。IL-4 ELISA試劑盒,規格：96T/盒，批號：201003026；IL-5 ELISA試劑盒,規格：96T/盒，批號：201002055；γ-干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,規格：96T/盒，批號：201003058，均為美國RB公司產品。

1.2動物 科研試驗用豚鼠，雌雄各半，體重250～350 g。動物合格證號：SCXK(吉)-2012-0002，購于長春市億斯實驗動物技術有限責任公司。

1.3藥品 定喘止哮顆粒，批號：20121008，長春中醫藥大學提供；氨茶堿片，規格：0.1 g/片，批號：B120703，山西云鵬制藥有限公司產品；甲醛溶液，規格：分析純，500 ml/瓶，批號：20090419，沈陽經濟技術開發區試劑廠產品。

1.4儀器 生理信號采集系統，型號：Powerlab/8sp，澳大利亞埃德公司產品；賀利氏(Heraeus)臺式離心機Stratos，型號：Biofuge Stratos，德國賀利氏公司產品；電子天平，型號：BSA224S，北京賽多利斯公司產品；酶標儀，型號：BIO680，美國伯樂公司產品；醫用超聲霧化吸入器，上海醫療器械廠。

1.5方法 豚鼠60只，雌雄兼用，隨機分為6組，每組10只。除對照組動物外，其他組動物用10%卵蛋白肌肉注射致敏，4 w后，將豚鼠置于密閉有機玻璃箱中，用1%卵蛋白超聲霧化吸入2 min進行攻擊。陽性對照藥組予氨茶堿0.025 g/kg；定喘止哮顆粒組：4、2、1 g/kg三個劑量。均于致敏同時灌胃給藥，空白對照組給予同體積的蒸餾水。各組分別于給藥4 w，哮喘激發后，股動脈取血，處死，檢測血清IFN-γ、IL-4、IL-5含量。

2 結 果

哮喘模型組豚鼠血清中IL-4、IL-5濃度明顯增高，而IFN-γ濃度明顯降低。定喘止哮顆粒4、2 g/kg兩個劑量組均能明顯抑制豚鼠血清中增高的IL-4、IL-5含量；定喘止哮顆粒4 g/kg劑量組能明顯升高豚鼠血清中減低的INF-γ含量。見表1。

表1 定喘止哮顆粒對豚鼠血清IFN-γ、IL-4和IL-5含量的影響±s，n=10，pg/ml)

3 討 論

支氣管哮喘屬于中醫學“哮證”、“喘證”范疇。哮喘發病率增高，患者中老年居多。中、老年患者其哮病發作時外源性誘因已淡化，但肝陽偏亢、內風上逆沖肺貫穿哮病發作期的始終〔3〕。發作時常見癥狀：喘息，喉中哮鳴有聲，伴咳嗽，咯痰，胸膈滿悶，情緒不寧，心煩易怒，腰膝酸軟，面色潮紅，舌紅苔黃膩，脈弦〔4〕。故認為本病中老年患者發病基礎為：腎精不足，水不涵木，肝陽偏亢。針對此類患者急性發作期治療以熄風定喘止哮為法，制定喘止哮顆粒臨床應用效果較好，且不易復發。

哮喘的發病基礎是Th1/Th2失衡,Th2細胞活化亢進〔5,6〕。Th1細胞主要分泌白細胞IL-2、IFN-γ，致腹腔巨噬細胞活化和遲發超敏反應。Th2細胞主要分泌IL-4、IL-5等，誘發肥大細胞和嗜酸性粒細胞(EOS)生長分化以及包括IgE在內的免疫球蛋白生成。其中IFN-γ、IL-4分別是Th1和Th2細胞的特征性細胞因子，Th1和Th2細胞因子可促進本亞群和抑制另一亞群的生長分化。哮喘患者體內IL-4過度產生，IFN-γ產生不足，使IFN-γ/IL-4失衡，是哮喘發病的關鍵因素之一。IFN-γ、IL-4在體內對哮喘的發病發揮調節作用。

本試驗結果表明，定喘止哮顆粒可以使INF-γ水平明顯升高，IL-4、IL-5水平明顯降低。定喘止哮顆粒可能通過調節Th1/Th2細胞之間功能平衡，減輕EOS對氣道的浸潤，降低氣道炎癥，從而達到治療哮喘的作用。

4 參考文獻

1Donohue JF.Safety and efficacy of Beta agonists〔J〕.Respir Care,2008；53(5):618-62.

2Humbert M,Garcia G,Chanez P.Targeted immunologic therapies for severe asthma〔J〕.Press Med,2008；37(1 Pt2): 173.

3章曉初，姚婉貞，何其華.哮喘豚鼠氣道重塑與氣道反應性的圖像分析〔J〕.中華結核與呼吸雜志，2001；24(2)：87-9.

4柳 春，李 智，呂國軍，等.濱篙內醋對哮喘豚鼠IL-4和IFN-γ含量的影響〔J〕.中國藥理學通報，2003；19(6)：653-5.

5Wild JS,Sigounas A,Sur N.IFN-gamma-inducing factor(IL-8)increases allergic sensitization,serum IgE,Th2 cytokines,and airwayeosinophilia in a mouse model of allergic asthma〔J〕.J Immunol,2000；164(5)：2701-10.

6Cohn L,Homer RJ,Niu N,etal.T Helper I cells and interferon gamma regulate allergic airway inflammation and mucus production〔J〕.J Exp Med,1999；190(9)：1309-18.