膠質瘤相關癌基因1(Gli1)表達與乳腺癌分子亞型的關系研究

陳 海 戚曉東 邱 萍

膠質瘤相關癌基因1作為Hedgehog通路重要的轉錄調控因子，可以在Sonic Hedgehog作用下與細胞核中的靶基因的啟動子相結合，從而調控目的基因的轉錄[1]。為此，本研究就圍繞膠質瘤相關癌基因1(Gli1)的表達與乳腺癌各分子亞型的關系展開分析。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月-2013年12月我院收治的、經確診的80例乳腺癌患者，均為女性，年齡40～60歲，均未接受過針對乳腺癌的治療。其中，ER陽性50例，陰性30例；Her-2陽性24例，陰性56例。乳腺癌亞型：Luminal A型38例；Luminal B型12例；Her-2過表達型10例；Basal-like型20例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學法 用甲醛固定組織標本，石蠟包埋，連續切片為4 μm的蠟塊，安置于防脫載玻片上，選取中性磷酸鹽緩沖溶液(PBS)作為陰性對照，已知乳腺癌陽性組織為陽性對照。用二甲苯脫蠟，過氧化氫滅活內源性酶，檸檬酸鈉緩沖溶液修復抗原，滴加Gli1抗體，4℃孵育16 h，加入羊抗兔二抗，PBS沖洗3次，DAB顯色，復染，脫水，封片。

1.2.2 判定標準[2]①按視野中陽性細胞數占細胞總數的比例計分：無陽性細胞計0分，陽性細胞數<25%計1分，陽性細胞數25%～50%計2分，陽性細胞數>50%計3分。②按切片中細胞顯色強度計分：無顯色計0分，淺黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。上述兩項所得分數相加，最后結果>3分即為陽性，否則為陰性。

1.3 統計學分析

應用SPSS 17.0統計學軟件對所得數據進行統計學分析。計數資料采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ER、Her-2與Gli1表達的關系

50例ER陽性者中Gli1表達陽性21例，陽性率為42.0%；ER陰性者中Gli1陽性表達18例，陽性率為60.0%，Gli1表達與ER表達呈負相關性。Her-2陽性者中Gli1的陽性表達25例，陽性率為48.0%；Her-2陰性者中Gli1陽性表達27例，陽性率為49.1%。Gli1表達與Her-2無明顯相關性，見表1。

表1 ER、Her-2表達與Gli1表達的相關性/例

注：與相對應陰性相比，*為P<0.05，#為P>0.05。

2.2 乳腺癌各亞型中Gli1表達情況

在乳腺癌各分子亞型中，Luminal A型、Luminal B型、Her-2過表達型和Basal-like型中Gli1陽性表達分別有9、8、7和15例，陽性率分別為23.7%、66.7%、70.0%和75.0%；Luminal A型Gli1陽性率顯著低于Basal-like型，兩者相比較差異具有統計學意義(P<0.05)；Luminal B型和Her-2過表達型Gli1陽性率與Basal-like型Gli1陽性率相比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 乳腺癌各亞型中Gli1的表達情況(例,%)

注：*為與Basal-like型相比，P<0.05。

3 討論

目前，乳腺癌的發病因素尚未明確闡明，雌激素的長期作用、家族遺傳性、環境因素等都與乳腺癌的發病息息相關[3]。有相關研究表明Hedgehog通路的激活也會導致乳腺癌的發病[4]。Gli1作為Hedgehog通路重要的調控因子也起著十分重要的作用。

本研究中，Gli1表達與雌二醇受體(ER)呈負相關，Gli1表達對乳腺癌細胞ER的表達有著抑制作用，因而降低細胞對雌激素的敏感度。同時，有相關報道表明，ER表達也能促進Gli1表達，并且不受雌二醇濃度的影響[5-6]。并由此得知，Gli1表達與ER陰性的乳腺癌的進展關系更為密切。在乳腺癌各種亞型中，結果證明了Luminal A型乳腺癌中Gli1的表達較低，無重大意義。但在其他三型中表達較高，尤其是Basal-like型乳腺癌，Gli1的高表達使得Gli與乳腺癌的關系更加進一步[7]。

綜上所述，Gli1表達與非雌激素依賴性乳腺癌分子亞型關系更加緊密，雌二醇受體陰性乳腺癌的治療提供了新方案的可能；Gli1在乳腺癌各亞型中的表達率不同，尤其是在Basasl-like型乳腺癌中影響較大，使Gli1成為其治療的潛在性目標，為臨床上乳腺癌的治療開發了新策略。

[1] Li Y，Yang W，Yang Q，et al.Nuclear localization of GLI1 and elevated expression of FOXC2 in breast cancer is associated with the basal-like phenotype〔J〕.Histol Histopathol，2012，27(4)：475-484.

[2] Jiao X，Wood LD，Lindman M，et al.Somatic mutations in the notch，NF-KB，PIK3CA，and hedgehog pathways in human breast cancers〔J〕.Genes Chromosomes Cancer，2012，51(5)：480-489.

[3] Wormald PJ.The agger nasi cell:the key to understanding the anatomy of the frontal recess〔J〕.Otolaryngol Head Neck Surg，2011,129(5):497-507.

[4] Choi BI,Lee HJ,Han JK,et al.Detection of hypervascular nodular hepatocellur carcinomas:value of triphasic helical CT compared with iodized oil CT〔J〕.AJR Am J Roentgenol，1997,168(1):219-224.

[5] Khan MA,Com BS CS,Brunt EM,et al.Positron emission tomography scanning in the evaluation of hepatocellular carcinoma〔J〕.Ann Nucl Med,2009,14(2):121-126.

[6] Tabit CE，Chung WB，Hamburg NM，et al.Endothelial dysfunction in diabetes mellitus：molecular mechanisms and clinical implications〔J〕.Rev Endocr Metab Disord，2010，11(1)：61-74.

[7] Endemann DH，Schiffrin EL.Endothelial dysfunction〔J〕.JA m Soc Nephrol，2010，15(8)：1983-1992.