脂質飲食對Beagle犬體內左氧氟沙星藥動學的影響

張成志，劉富春，宋 航

（1.重慶醫科大學附屬第一醫院藥學部，重慶 400016；2.中國人民解放軍第三二四醫院藥劑科，重慶 400020；3.中國人民解放軍第三二四醫院，重慶 400020）

左氧氟沙星（levofloxacin，Lfox）是目前臨床上抗菌活性較高的一種廣譜抗菌藥物，在治療各種敏感菌引起的感染中是更為有效、更安全、治療時間較短、費用相對較低、適宜廣泛使用的藥物。目前，在眼科、婦科、消化科、肺科等臨床科室用于治療常見病和多發病［1－8］。隨著人們生活水平的提高，食物中脂質比例的增加是否影響Lfox的吸收呢？有文獻報道，脂質可影響莫西沙星的體內藥代動力學，但也有文獻認為進食不影響Lfox的體內藥動學［9－11］。因此，作者選用Beagle犬作為研究對象，探討了進食脂質對Lfox藥動學的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試藥 Lfox標準對照品（純度：97.3%，批號：130455－200604，中國藥品生物制品檢定出品）。試驗藥乳酸Lfox片劑（規格：100mg／片，10片×1板、盒，包裝：鋁塑包裝，由浙江醫藥股份有限公司提供；批號：091004）。環丙沙星（CF）（內標；純度：98.16%，批號：060402，重慶藥友制藥有限公司提供）。其余試劑均為分析純，水為雙蒸水；進食脂質為半肥瘦豬肉末。

1.1.2 動物 健康合格Beagle犬6只，雌雄各半，體質量9～10kg，由四川養麝研究所提供。實驗動物合格證號：川實動管質第63號；環境設施合格證號：川實動管第64號。

1.1.3 儀器 1100系列高效液相色譜（HPLC）儀，包括1100泵系統、1100可調波長紫外檢測器和1100工作站（美國Agilent公司）。

1.2 方法 Beagle犬6只，分為空腹組和進食脂質組，每組3只，交叉進行試驗。Beagle犬于實驗前禁食12h，實驗時脂質組給予脂質（半肥瘦豬肉末），每只150g，同時給予Lfox 10 mg／kg（根據人體臨床常用劑量與動物劑量換算）［12］。空腹組給予Lfox 10mg／kg和自來水每只100mL，服藥后送回籠中。8h后統一進食。各組犬于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24、48h經大隱靜脈采血3mL，肝素抗凝，分離血漿，－20℃保存，待測。2周后兩組犬只交叉實驗，取血量及取血時間均同前。

1.3 統計學處理 采用中國藥理數理學會編制的3p97計算機軟件，計算各個體的藥動學參數。計量資料以表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 血藥濃度測定

2.1.1 色譜條件 Phenomenex Gemini C18色譜柱（250mm×4.6nm，5μm），柱溫為35℃，流動相為甲醇∶0.008mol／L磷酸鹽緩沖液∶0.5mol／L四丁基溴化銨＝25∶75∶4，流速1.2 mL／min，檢測波長為290nm，固定進樣環100μL。內標（IS）：CF。

2.1.2 樣品處理 參照文獻［13］，取0.5mL犬血漿＋IS 50 μL（CF：33.6μg／mL）＋4mL CH2Cl2，旋搖1min，3 000r／min離心2min，取CH2Cl2層于5mL離心管內，置于40℃水浴中，氮氣吹干。加入0.1mL流動相復融，進樣40μL。

2.1.3 色譜行為 取對照品溶液（含Lfox／CF為0.305／1.68 μg／mL甲醇溶液）直接進樣；分別取空白血漿、空白血漿＋Lfox＋CF（含Lfox／CF為0.488／1.68μg／mL）和犬灌藥后1h血漿＋CF，按樣品處理方法操作，記錄色譜圖。在本實驗所采用的色譜條件下，血漿中Lfox的tR為7min左右，CF的tR為10min左右，二者峰形良好，且不受血漿內源性物質的干擾，色譜詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.1.4 標準曲線、線性關系與最低定量濃度 在空白血漿中分別添加Lfox使血藥濃度相當于9.760、4.880、2.440、1.220、0.610、0.305、0.0976μg／mL，按樣品處理方法操作，將所得Lfox峰面積／CF峰面積比（Y）與Lfox濃度（X）數據進行回歸，得標準曲線方程Y＝2.083 3 X－0.142 1；在9.760%～0.097 6μg／mL范圍內線性關系良好，r＝0.999 96（n＝5）；最低定量濃度為0.097 6μg／mL（RSD＝9.50%，n＝5）。

2.1.5 精密度和重復性 取高、中、低3種質控樣本（4.880、1.220、0.305μg／mL），每個濃度5份，考察批內和批間變異。批內誤差（每個濃度同日內測定5次）、日內變異性結果及批間誤差（每個濃度2周內測定5次）日間變異性結果見表1。

表1 精密度及重復性試驗結果

2.1.6 回收率 取高、中、低3種濃度的血漿質控樣本（4.880、1.220、0.305μg／mL），每個濃度5份，按規定方法評價本法的回收率。結果，高、中、低濃度的回收率分別為（98.25±2.86）%、（100.16±4.28）%、（102.85±5.70）%。

表2 血漿中Lfox的穩定性試驗測定結果（n＝5）

2.1.7 穩定性考察 取高、中、低3種血漿質控樣本（4.880、1.220、0.305μg／mL），每個濃度3份，按樣品處理方法操作并測定。室溫25℃左右，放置24h測定5次；冷藏（4℃冰箱），10d內測定5次；低溫（－20℃冰箱），反復冷凍、融化，3周內測定5次。結果表明，在室溫、冷藏、反復凍融條件下，血漿中Lfox的穩定性均良好，見表2。

2.2 血藥濃度－時間曲線 空腹組與進食脂質組Lfox的平均血藥濃度－時間曲線見圖2。藥時數據經3p97軟件自動擬合，二組均數均符合二室模型。

圖2 兩組犬只平均血藥濃度－時間曲線（n＝6）

表3 兩組犬只藥動學參數比較±s，n＝6）

表3 兩組犬只藥動學參數比較±s，n＝6）

＊：P＜0.05；△：P＜0.01，與空腹組比較。

參數 空腹組 進食脂質組Ka（h） 0.410±0.074 0.730±0.071△β（h） 0.990±0.072 0.033±0.006 lag time（h） 0.430±0.059 0.360±0.067 t1／2Ka（h） 1.730±0.340 0.960±0.087△t1／2β（h） 11.070±8.460 21.790±4.590 V／F（c）（L） 1.930±0.560 1.990±0.290 Cl／F（s）（L／h） 0.310±0.039 0.240±0.055＊tmax（h） 3.420±0.410 2.000±0.320△Cmax（μg·mL－1） 2.710±0.600 2.520±0.380 AUC0→t（μg·h－1·mL－1）36.510±8.660 37.190±8.210

2.3 藥動學參數 每例受試犬血藥濃度－時間數據采用計算機3p97程序自動擬合，結果表明空腹和進食脂質狀態下Lfox的藥－時數據均符合二室藥動學模型。求得有關藥動學參數見表3。由圖1、表2可見，tmax加快，但對t1／2β、Cmax和 AUC0→t均無影響。

3 討 論

國內外早期對Lfox血藥濃度測定采用微生物法，由于專屬性不強，誤差大。采用L／MS／MS價高，一般醫院難于承受；采用HPLC測定較為準確，但HPLC法在配制流動相中，配方各有不同。本文參照文獻［14］，采用甲醇、磷酸鹽緩沖液和離子極化劑四丁基溴化銨，其比例為25∶75∶4，結果Lfox和CF分離良好，準確性高，其檢測范圍為9.760 0～0.097 6μg／mL，結果較為滿意，符合實驗要求。

文獻報道，空腹或進食對口服Lfox藥動學無影響［11］。而本研究結果顯示，進食脂質較空腹 Ka、t1／2Ka、tmax、t1／2β和 Cl／F（s）明顯改變，且（P＜0.05或P＜0.01）。脂質使藥物吸收速度加快，達峰時間提前，消除延長，其原因可能是藥物在脂質的作用下，吸收迅速，達峰時間加快，更易達到組織，使藥物更快地到達血和周圍組織，如文獻報道［15－16］。Lfox相對分子質量相對較小，脂溶性高，血漿蛋白結合率低，在結構上具有促進水溶性的惡嗪環與具有適度脂溶性的N－甲基哌嗪，使其穿透性增高，吸收不易受到食物的干擾，脂質反而促進了Lfox的吸收。就其t1／2β參數而言，與空腹組間雖無顯著差異，但明顯延長，也符合Lfox廣泛分布于組織中，被動轉移消除延緩。

總之，脂質飲食同Lfox同時服用，可加快Lfox的吸收，而消除減慢。提示脂質飲食對Lfox的吸收和消除有一定的幫助，有益于Lfox在體內的儲留，與文獻［11］有不同的見解。

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