妊娠湖羊補充L-Arg和Se對初乳及羔羊初生重的影響

楊 潔， 王連群 *， 侯 芳， 馬 林， 張俊瑜， 柳柏年

（1.塔里木大學動物科學學院，新疆阿拉爾 843300；2.新疆生產建設兵團塔里木畜牧科技重點實驗室，新疆阿拉爾 843300；3.瑪納斯縣樂土驛鎮獸醫站，新疆瑪納斯 832207；4.新疆畜牧科學院飼料研究所，新疆烏魯木齊 830000；5.瑪納斯縣涼州戶鎮獸醫站，新疆瑪納斯 832219）

幼畜機體新陳代謝活動旺盛，體內的氧化還原反應相對較快，如果沒有充足的抗氧化物質，氧化還原反應生成的自由基就會蓄積，導致機體產生氧化應激，造成機體損傷。Se能夠提高家畜的抗氧化能力，減少機體性氧化應激反應（袁施彬，2007）。初乳是新生羔羊最佳日糧，初乳組成及IgG水平直接影響新生羔羊的健康和成活率。已有研究表明，日糧Se能夠提高母羊初乳的IgG水平，并通過初乳增加了羔羊血清IgG的水平（Stewart等，2013）。本試驗擬通過妊娠湖羊補充L-Arg和Se來研究外源性的L-Arg和Se對初乳的組成、抗氧化性、IgG水平及羔羊初生重的影響，并對二者進行比較。旨在為生產中提高初乳的各營養成分含量、抗氧化性、IgG水平及羔羊的初生重提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗選用20只體況良好、平均體重為（41.38±2.13）kg的同期發情處理的已孕湖羊母羊。

1.2 試驗設計 試驗采用多因素完全隨機區組試驗設計，將體重相近的20只同期發情處理的已孕湖羊母羊隨機分為4組，每組5個重復，每個重復1只湖羊。將添加Se日糧和靜脈注射L-Arg及二者互作的因素隨機分配給4組湖羊，即Se組（于妊娠期的50 d至分娩飼喂Se含量為0.3 mg/kg的日糧）、Arg組（于妊娠期的130 d至分娩每天靜脈注射70 mg/kg體重的 L-Arg）、AS組 （于妊娠期50 d至分娩每天飼喂Se含量為0.3 mg/kg的日糧結合妊娠期130 d至分娩靜脈注射70 mg/kg體重的L-Arg）、對照組，各組羊只的基礎日糧相同。基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平（風干基礎）

1.3 飼養管理 各組母羊分欄飼喂，自由采食，自由飲水。粗飼料（玉米秸稈）經飼料粉碎機粉碎后與精料（Se組和AS組在精料中添加亞硒酸鈉）混合均勻，添加水使整個混合日糧的水分達到40%左右，每天飼喂兩次（11∶30 和 18∶30），每天要求剩料量在10%左右。Arg組和AS組分別于妊娠期的130 d至分娩的每天早上10∶30靜脈注射鹽酸精氨酸[鹽酸精氨酸注射液（L-型）上海信誼金朱藥業有限公司]，注射劑量為每天每只70 mg/kg體重。

1.4 樣品采集與指標測定

1.4.1 飼料樣品 試驗開始前收集飼料樣品，測定常規養分。干物質采用GB 6435-86方法測定；粗蛋白質采用GB/T 6432-94方法測定；中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維依據范氏洗滌纖維分析法測定；鈣和磷采用原子吸收法測定，Se采用2，3-二氨基萘熒光法（GB/T 13883-92）測定（王加啟，2004）。

1.4.2 初乳樣品 試驗羊只在分娩后羔羊未吃初乳前立即采集初乳樣品，于-20℃冷凍保存，待測定乳常規成分、IgG和抗氧化性指標。

初乳在室溫下解凍后，乳常規成分通過乳成分分析儀（FOSS，FT 120）測定，初乳中的 IgG 采用瓊脂糖單向免疫擴散法測定。初乳中的抗氧化性指標采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒進行分析，初乳中的丙二醛（MDA）含量測定采用硫代巴比妥酸法，超氧化物歧化酶（SOD）活力測定采用黃嘌呤氧化法，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力測定采用DTNB顯色法，總抗氧化能力（T-AOC）測定采用比色法。

1.5 數據處理 試驗數據利用Excel 2003進行初步整理，統計分析利用SAS軟件包（The SAS System for Windows 9.0）中的ANOVA過程進行多因素方差分析和F檢驗。差異顯著性采用Duncan’s法進行多重比較，所有數據均以“平均值±標準差”表示，以ALPHA=0.05為顯著性檢驗和判斷標準。

2 結果與分析

2.1 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響 由表2可知，雖然各組羔羊的初生重和初乳組成無顯著變化（P＞0.05），但是，Arg組和AS組羔羊的初生重和初乳蛋白質含量比對照組分別提高了16.2%、11.3%和15.8%、13.3%，乳糖含量略有降低。

表2 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響

2.2 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響 由表3可知，Se組、AS組的SOD活性較對照組和Arg組分別提高30.2%、23.3%和 39.0%、31.6%（P＜0.05）。 Se組、Arg組和 AS組的 GSHPx活性較對照組分別提高24.5%、20.7%和30.1%（P ＜ 0.05），但三組間差異均不顯著（P ＞ 0.05）。各組間的T-AOC、MDA和IgG水平差異均不顯著（P＞0.05），但與對照組比較，試驗組的T-AOC和IgG水平有上升的趨勢。

表3 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響

3 討論

3.1 L-Arg和Se對初乳組成及羔羊初生重的影響 通常，母羊分娩后1周內分泌的乳汁稱為初乳，在這1周內，隨著泌乳時間和擠奶次數增加，初乳中的干物質、乳蛋白、乳脂肪含量均呈現遞減的態勢，而乳糖含量呈現遞增的趨勢（娜日娜等，2005），不僅如此，初乳的組成還會隨著妊娠期或泌乳期的營養而改變 （O’Doherty和 Crosby，1997）。本研究表明，雖然各處理組的各乳成分含量均未達到顯著水平（P＞0.05），但是，與對照組比較，單獨進行靜脈注射L-Arg或與日糧補充Se聯用分別使初乳蛋白質含量增加了15.8%和13.3%，乳糖含量略有下降。Vicini等（1988）研究報道，給泌乳期為73～87 d的奶牛靜脈注射LArg沒有影響乳成分。江雪梅（2011）在妊娠母豬日糧中添加L-Arg增加了初乳中大部分氨基酸的濃度，顯著提高了初乳中纈氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸和Arg的濃度（P＜0.05）。初乳中這些氨基酸濃度的提高有利于乳蛋白的合成。Arg還可通過鳥氨酸循環和三羧酸循環轉變為其他氨基酸，這將為乳蛋白的合成提供更為豐富的氨基酸原料。本研究通過日糧補充Se未對湖羊初乳組成產生顯著影響（P＞0.05），這與Swanson等（2008）的研究結果一致。

本研究表明，雖然各組羔羊初生重均未達到顯著差異（P＞0.05），但是，與對照組比較，靜脈注射L-Arg或與日糧補充Se聯用使羔羊初生重分別提高了16.2%和11.3%。Lassala等（2011）通過靜脈注射L-Arg提高了羔羊的初生重，這與Arg在體內的代謝有關。多胺能夠調節DNA的表達和蛋白質的合成，從而對細胞的增殖和分化進行調節（Flynn等，2002）。本研究通過日糧給妊娠湖羊補充Se并未影響羔羊的初生重，這與Swanson等（2008）給妊娠母羊補充富硒酵母對羔羊初生重的影響結果一致，然而，曹貴東和武曉英（2012）卻通過納米硒顯著提高了110 d妊娠母羊的胎兒體重 （P＜0.05），這一差異可能是日糧硒源不同的結果。

3.2 L-Arg和Se對初乳抗氧化性及IgG含量的影響 本研究通過日糧補充Se或與靜脈注射LArg合用顯著提高了湖羊初乳中SOD和GSH-Px的活性（P＜0.05），初乳中T-AOC的水平有上升的趨勢（P=0.08），單獨進行靜脈注射L-Arg僅提高了GSH-Px的活性（P＜0.05），由此表明，妊娠湖羊補充Se和L-Arg提高了初乳的抗氧化性。鄭萍等（2010）研究表明，外源性的Arg具有提高機體抗氧化性的作用。妊娠母羊補充L-Arg后血清中半胱氨酸的水平顯著增加 （P＜0.01）（Lassala等，2011），半胱氨酸是GSH合成所需的主要限制性氨基酸（Wu等，2004）。在本研究中，初乳GSHPx活性的提高可能源于血液為乳腺提供了更為充足的半胱氨酸所致。Se是GSH-Px活性中心的必需元素，因而，在機體的抗氧化物酶系統中具有很重要的作用。王連群（2008）在泌乳奶牛日糧中添加亞硒酸鈉提高了常乳中SOD的活性 （P=0.08）。李星（2009）研究表明，與亞硒酸鈉比較，硒代蛋氨酸使母豬初乳具有更高的SOD、GSH-Px、T-AOC水平和更低的MDA水平（P＜0.05）。

初乳中足夠的免疫球蛋白能夠使新生羔羊獲得較為理想的被動免疫，從而提高新生羔羊的抗病力和成活率。Stewart等（2013）給妊娠母羊提供Se，提高了初乳中IgG的水平。彭易柱（2013）給妊娠獺兔補充不同水平的L-Arg，結果各組初乳中的IgG水平均高于未補充L-Arg的對照組，其中，最高量的L-Arg補充組顯著高于對照組（P＜0.05），由此說明初乳中IgG的濃度與補充LArg的水平有關。在本研究中，妊娠母羊補充Se和L-Arg在一定程度上提高了初乳中的lgG水平。其中未顯著提高初乳中IgG的濃度 （P＞0.05），其原因可能與L-Arg的補充量有關，這需要進一步研究。

4 結論

妊娠湖羊補充Se和L-Arg均能夠提高初乳的抗氧化性，單獨補充L-Arg或與Se聯用，在一定程度上提高了初乳中乳蛋白、IgG含量和羔羊的初生重，單獨補充Se在一定程度上能夠提高初乳中IgG的水平。

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