神香草組織培養與快速繁殖技術

陳春伶+徐美隆+喬改霞+劉玉娟

摘要：以神香草幼嫩莖段為外植體，建立神香草的組織培養快速繁殖技術體系，結果表明：最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L。

關鍵詞：神香草；組織培養；快速繁殖；腋芽誘導培養基；合成根培養基

中圖分類號：Q943.1 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0060-02

神香草（Hyssop）為唇形科多年生半灌木，穗狀花序細長，小花密集，唇形花冠呈管狀，花紫色，有白色、玫紅等品種。由于蜜汁豐富，極易招蜂引蝶，因此可作為園林綠化植物，種植在巖石園、草藥園中，也可組合盆觀賞。同時，神香草也是難得的蜜源、芳香油、藥用植物。神香草具有抗衰老的作用，其所含的揮發油成分可解除支氣管痙攣，神香草的葉、花均可入藥，具有鎮咳祛痰的功效^[1-3]。神香草既有觀賞價值，又可作芳香蔬菜或辛香調料，經濟價值很高。目前，神香草主要以播種、分株、扦插等方式進行繁殖，繁殖速度慢，繁殖效率低^[4]。筆者開展了神香草的組織培養與快速繁殖技術研究，旨在為加快神香草推廣與應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

神香草當年生幼嫩莖段，2012年6月采自寧夏回族自治區銀川金鳳區銀川植物園。

1.2 方法

1.2.1 外植體的準備

剪取生長健壯的幼嫩莖段，去掉基部的葉片，先在加有洗衣粉的洗滌液中用軟毛刷將莖段輕輕刷洗干凈，再用自來水沖洗1～2 h。在超凈工作臺上，將莖段剪成長2～3 cm的小段，先用70%乙醇消毒10 s，無菌水沖洗后，再用0.1% HgCl2溶液消毒2～5 min，用無菌水沖洗5～6次，用無菌濾紙吸干多余水分，將其接種在腋芽誘導培養基中。

1.2.2 腋芽的誘導

將滅菌后的外植體放到含有6-BA（0、0.5、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基中光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計腋芽誘導率。

1.2.3 不定芽的誘導

當外植體誘導出的腋芽長到0.5～1 cm 時，將其剪下，接種到不定芽誘導培養基中，培養基為含有6-BA（0、0.5、0.8、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基，光照培養，光照度為 2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度為23～27 ℃。30 d 后統計不定芽的誘導系數。

1.2.4 生根誘導

將長至2.5～3 cm高的不定芽剪下，接種到含有IBA（0、0.2、0.5、0.8 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的1/2MS培養基中，前1周弱光培養（不放燈下），1周后光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計不定芽的生根率。

1.2.5 生根苗的移栽

試管苗生根培養17～20 d，當生根苗根長達到0.5 cm時可出瓶移栽。先將培養瓶移至溫室進行煉苗，自然條件下煉苗7 d，然后松開瓶蓋煉苗1 d，最后打開瓶蓋煉苗1 d。煉苗期間前期需適當遮光，確保光照強度為自然光的50%～60%。煉苗完成后取出小苗，洗凈根部附著的培養基，將其移栽到消毒過的混合基質中（草炭 ∶蛭石 ∶珍珠巖=1 ∶1 ∶1），溫度控制在20～30 ℃，前10 d用小拱棚覆蓋，相對濕度控制在85%以上，之后逐漸揭開小拱棚，降低濕度，移栽21 d后完全揭開小拱棚。移栽30 d時統計移栽成活率。

2 結果與分析

2.1 不同激素處理對神香草腋芽誘導的影響

從表1可以看出，不同激素組合對神香草的腋芽誘導效果不同，最適合的組合為6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，在這個激素組合下，神香草腋芽平均誘導率達到90.2%，除去污染率20%，實際誘導率為72.1%。

2.2 不同激素處理對神香草不定芽誘導的影響

從表2可以看出，6-BA、NAA、IAA組合對神香草的不定芽分化有很好的促進作用。當培養基中只有6-BA與NAA組合時，分化系數最多只能達到3.0左右；當培養基中添加了IAA時，分化系數明顯增加；在6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IAA 1.5 mg/L處理下，神香草不定芽的分化系數最高，達5.5，且不定芽生長情況很好，沒有玻璃化現象出現。當6-BA濃度達1.0 mg/L，不定芽玻璃化現象較為嚴重；當6-BA濃度達2.0 mg/L時，玻璃化現象很嚴重，直接影響了不定芽分化（圖1）。

養的植物激素包括生長素類、細胞分裂素類兩大類。生長素類的主要作用是重新啟動有絲分裂，使已停止分裂的植物細胞恢復分裂能力；細胞分裂素的主要作用是促進細胞的分裂、擴大，誘導芽分化，促進側芽萌發生長。雖然添加植物激素對植物的組織培養具有關鍵作用，但是植物激素濃度的把握是難點，通常不同的植物所需的植物激素的種類或濃度不完全相同。本研究表明，最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.01 mg/L。

參考文獻：

[1]裘惠霞，姚 雷. 神香草及提取物的抗衰老作用[J]. 上海交通大學學報，2005，23（1）：1-4.

[2]劉勇民，沙吾提·伊克木.維吾爾藥志（上）[M]. 烏魯木齊：新疆人民出版社，1986：423-429.

[3]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準：維吾爾藥分冊[M]. 烏魯木齊：新疆科技衛生出版社，1999：78.

[4]樊 璐. 神香草的引種栽培研究[J]. 中國野生植物資源，2005，24（3）：61-65.

摘要：以神香草幼嫩莖段為外植體，建立神香草的組織培養快速繁殖技術體系，結果表明：最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L。

關鍵詞：神香草；組織培養；快速繁殖；腋芽誘導培養基；合成根培養基

中圖分類號：Q943.1 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0060-02

神香草（Hyssop）為唇形科多年生半灌木，穗狀花序細長，小花密集，唇形花冠呈管狀，花紫色，有白色、玫紅等品種。由于蜜汁豐富，極易招蜂引蝶，因此可作為園林綠化植物，種植在巖石園、草藥園中，也可組合盆觀賞。同時，神香草也是難得的蜜源、芳香油、藥用植物。神香草具有抗衰老的作用，其所含的揮發油成分可解除支氣管痙攣，神香草的葉、花均可入藥，具有鎮咳祛痰的功效^[1-3]。神香草既有觀賞價值，又可作芳香蔬菜或辛香調料，經濟價值很高。目前，神香草主要以播種、分株、扦插等方式進行繁殖，繁殖速度慢，繁殖效率低^[4]。筆者開展了神香草的組織培養與快速繁殖技術研究，旨在為加快神香草推廣與應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

神香草當年生幼嫩莖段，2012年6月采自寧夏回族自治區銀川金鳳區銀川植物園。

1.2 方法

1.2.1 外植體的準備

剪取生長健壯的幼嫩莖段，去掉基部的葉片，先在加有洗衣粉的洗滌液中用軟毛刷將莖段輕輕刷洗干凈，再用自來水沖洗1～2 h。在超凈工作臺上，將莖段剪成長2～3 cm的小段，先用70%乙醇消毒10 s，無菌水沖洗后，再用0.1% HgCl2溶液消毒2～5 min，用無菌水沖洗5～6次，用無菌濾紙吸干多余水分，將其接種在腋芽誘導培養基中。

1.2.2 腋芽的誘導

將滅菌后的外植體放到含有6-BA（0、0.5、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基中光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計腋芽誘導率。

1.2.3 不定芽的誘導

當外植體誘導出的腋芽長到0.5～1 cm 時，將其剪下，接種到不定芽誘導培養基中，培養基為含有6-BA（0、0.5、0.8、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基，光照培養，光照度為 2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度為23～27 ℃。30 d 后統計不定芽的誘導系數。

1.2.4 生根誘導

將長至2.5～3 cm高的不定芽剪下，接種到含有IBA（0、0.2、0.5、0.8 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的1/2MS培養基中，前1周弱光培養（不放燈下），1周后光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計不定芽的生根率。

1.2.5 生根苗的移栽

試管苗生根培養17～20 d，當生根苗根長達到0.5 cm時可出瓶移栽。先將培養瓶移至溫室進行煉苗，自然條件下煉苗7 d，然后松開瓶蓋煉苗1 d，最后打開瓶蓋煉苗1 d。煉苗期間前期需適當遮光，確保光照強度為自然光的50%～60%。煉苗完成后取出小苗，洗凈根部附著的培養基，將其移栽到消毒過的混合基質中（草炭 ∶蛭石 ∶珍珠巖=1 ∶1 ∶1），溫度控制在20～30 ℃，前10 d用小拱棚覆蓋，相對濕度控制在85%以上，之后逐漸揭開小拱棚，降低濕度，移栽21 d后完全揭開小拱棚。移栽30 d時統計移栽成活率。

2 結果與分析

2.1 不同激素處理對神香草腋芽誘導的影響

從表1可以看出，不同激素組合對神香草的腋芽誘導效果不同，最適合的組合為6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，在這個激素組合下，神香草腋芽平均誘導率達到90.2%，除去污染率20%，實際誘導率為72.1%。

2.2 不同激素處理對神香草不定芽誘導的影響

從表2可以看出，6-BA、NAA、IAA組合對神香草的不定芽分化有很好的促進作用。當培養基中只有6-BA與NAA組合時，分化系數最多只能達到3.0左右；當培養基中添加了IAA時，分化系數明顯增加；在6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IAA 1.5 mg/L處理下，神香草不定芽的分化系數最高，達5.5，且不定芽生長情況很好，沒有玻璃化現象出現。當6-BA濃度達1.0 mg/L，不定芽玻璃化現象較為嚴重；當6-BA濃度達2.0 mg/L時，玻璃化現象很嚴重，直接影響了不定芽分化（圖1）。

養的植物激素包括生長素類、細胞分裂素類兩大類。生長素類的主要作用是重新啟動有絲分裂，使已停止分裂的植物細胞恢復分裂能力；細胞分裂素的主要作用是促進細胞的分裂、擴大，誘導芽分化，促進側芽萌發生長。雖然添加植物激素對植物的組織培養具有關鍵作用，但是植物激素濃度的把握是難點，通常不同的植物所需的植物激素的種類或濃度不完全相同。本研究表明，最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.01 mg/L。

參考文獻：

[1]裘惠霞，姚 雷. 神香草及提取物的抗衰老作用[J]. 上海交通大學學報，2005，23（1）：1-4.

[2]劉勇民，沙吾提·伊克木.維吾爾藥志（上）[M]. 烏魯木齊：新疆人民出版社，1986：423-429.

[3]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準：維吾爾藥分冊[M]. 烏魯木齊：新疆科技衛生出版社，1999：78.

[4]樊 璐. 神香草的引種栽培研究[J]. 中國野生植物資源，2005，24（3）：61-65.

摘要：以神香草幼嫩莖段為外植體，建立神香草的組織培養快速繁殖技術體系，結果表明：最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L。

關鍵詞：神香草；組織培養；快速繁殖；腋芽誘導培養基；合成根培養基

中圖分類號：Q943.1 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0060-02

神香草（Hyssop）為唇形科多年生半灌木，穗狀花序細長，小花密集，唇形花冠呈管狀，花紫色，有白色、玫紅等品種。由于蜜汁豐富，極易招蜂引蝶，因此可作為園林綠化植物，種植在巖石園、草藥園中，也可組合盆觀賞。同時，神香草也是難得的蜜源、芳香油、藥用植物。神香草具有抗衰老的作用，其所含的揮發油成分可解除支氣管痙攣，神香草的葉、花均可入藥，具有鎮咳祛痰的功效^[1-3]。神香草既有觀賞價值，又可作芳香蔬菜或辛香調料，經濟價值很高。目前，神香草主要以播種、分株、扦插等方式進行繁殖，繁殖速度慢，繁殖效率低^[4]。筆者開展了神香草的組織培養與快速繁殖技術研究，旨在為加快神香草推廣與應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

神香草當年生幼嫩莖段，2012年6月采自寧夏回族自治區銀川金鳳區銀川植物園。

1.2 方法

1.2.1 外植體的準備

剪取生長健壯的幼嫩莖段，去掉基部的葉片，先在加有洗衣粉的洗滌液中用軟毛刷將莖段輕輕刷洗干凈，再用自來水沖洗1～2 h。在超凈工作臺上，將莖段剪成長2～3 cm的小段，先用70%乙醇消毒10 s，無菌水沖洗后，再用0.1% HgCl2溶液消毒2～5 min，用無菌水沖洗5～6次，用無菌濾紙吸干多余水分，將其接種在腋芽誘導培養基中。

1.2.2 腋芽的誘導

將滅菌后的外植體放到含有6-BA（0、0.5、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基中光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計腋芽誘導率。

1.2.3 不定芽的誘導

當外植體誘導出的腋芽長到0.5～1 cm 時，將其剪下，接種到不定芽誘導培養基中，培養基為含有6-BA（0、0.5、0.8、1.0、2.0 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的MS培養基，光照培養，光照度為 2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度為23～27 ℃。30 d 后統計不定芽的誘導系數。

1.2.4 生根誘導

將長至2.5～3 cm高的不定芽剪下，接種到含有IBA（0、0.2、0.5、0.8 mg/L）與NAA（0、0.01、0.05、0.1 mg/L）兩兩組合的1/2MS培養基中，前1周弱光培養（不放燈下），1周后光照培養，光照度為2 000～2 500 lx，光照時間為16 h/d，培養溫度23～27 ℃。30 d后統計不定芽的生根率。

1.2.5 生根苗的移栽

試管苗生根培養17～20 d，當生根苗根長達到0.5 cm時可出瓶移栽。先將培養瓶移至溫室進行煉苗，自然條件下煉苗7 d，然后松開瓶蓋煉苗1 d，最后打開瓶蓋煉苗1 d。煉苗期間前期需適當遮光，確保光照強度為自然光的50%～60%。煉苗完成后取出小苗，洗凈根部附著的培養基，將其移栽到消毒過的混合基質中（草炭 ∶蛭石 ∶珍珠巖=1 ∶1 ∶1），溫度控制在20～30 ℃，前10 d用小拱棚覆蓋，相對濕度控制在85%以上，之后逐漸揭開小拱棚，降低濕度，移栽21 d后完全揭開小拱棚。移栽30 d時統計移栽成活率。

2 結果與分析

2.1 不同激素處理對神香草腋芽誘導的影響

從表1可以看出，不同激素組合對神香草的腋芽誘導效果不同，最適合的組合為6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，在這個激素組合下，神香草腋芽平均誘導率達到90.2%，除去污染率20%，實際誘導率為72.1%。

2.2 不同激素處理對神香草不定芽誘導的影響

從表2可以看出，6-BA、NAA、IAA組合對神香草的不定芽分化有很好的促進作用。當培養基中只有6-BA與NAA組合時，分化系數最多只能達到3.0左右；當培養基中添加了IAA時，分化系數明顯增加；在6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IAA 1.5 mg/L處理下，神香草不定芽的分化系數最高，達5.5，且不定芽生長情況很好，沒有玻璃化現象出現。當6-BA濃度達1.0 mg/L，不定芽玻璃化現象較為嚴重；當6-BA濃度達2.0 mg/L時，玻璃化現象很嚴重，直接影響了不定芽分化（圖1）。

養的植物激素包括生長素類、細胞分裂素類兩大類。生長素類的主要作用是重新啟動有絲分裂，使已停止分裂的植物細胞恢復分裂能力；細胞分裂素的主要作用是促進細胞的分裂、擴大，誘導芽分化，促進側芽萌發生長。雖然添加植物激素對植物的組織培養具有關鍵作用，但是植物激素濃度的把握是難點，通常不同的植物所需的植物激素的種類或濃度不完全相同。本研究表明，最適合神香草腋芽誘導的培養基為MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合分化的培養基為MS+6-BA 0.8 mg/L+IAA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L，最適合生根的培養基為1/2MS+IBA 0.2mg/L+NAA 0.01 mg/L。

參考文獻：

[1]裘惠霞，姚 雷. 神香草及提取物的抗衰老作用[J]. 上海交通大學學報，2005，23（1）：1-4.

[2]劉勇民，沙吾提·伊克木.維吾爾藥志（上）[M]. 烏魯木齊：新疆人民出版社，1986：423-429.

[3]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準：維吾爾藥分冊[M]. 烏魯木齊：新疆科技衛生出版社，1999：78.

[4]樊 璐. 神香草的引種栽培研究[J]. 中國野生植物資源，2005，24（3）：61-65.