尼羅羅非魚基礎群體與選育一代幼魚鹽堿度耐受性比較

梁從飛+趙麗慧+筴金華+張艷紅+任炳琛+王飛+吳俊偉+趙金良

摘要：以上海品系、河北品系、山東品系尼羅羅非魚基礎群體（F0代）和經鹽堿馴化選育一代（F1代）幼魚為試驗材料，比較其半致死鹽度、半致死堿度、半致死鹽堿度。結果表明，3個品系尼羅羅非魚F1代幼魚的4 d半致死鹽度為21.625～21.820 g/L；半致死堿度為7.903～8.407 g/L；在半致死鹽堿度方面，10 g/L鹽度下堿度為5.577～6.096 g/L，15 g/L鹽度下堿度為3.940～4.794 g/L；F1代幼魚4 d半致死鹽堿度均顯著高于F0代幼魚；選育一代中，河北品系幼魚鹽堿耐受能力顯著大于上海品系和山東品系。

關鍵詞：尼羅羅非魚；基礎群體；選育一代；半致死濃度；鹽堿處理

中圖分類號：S965.125.2 文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2014）08-0227-04

近年來，我國內陸淡水養殖水域面臨短缺，淡水養殖業發展受到嚴重制約。同時，我國尚存在大量未被利用的鹽堿水域，主要集中在華北、東北、西北地區。但由于鹽堿水域具有高鹽、高堿、高pH值和復雜離子組成等特點，不利于常規魚類品種養殖，大大限制了這部分水域的開發利用^[1]，因此，培育耐鹽堿養殖新品種，對促進我國鹽堿水域利用，保證漁業持續發展具有重要意義。羅非魚是我國淡水養殖主要魚類之一^[2]。尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）因具有食性雜、生長速度快等優勢，成為羅非魚中的最大養殖種類。尼羅羅非魚對不利環境具有一定的耐受性，是開展耐鹽堿養殖品種的重要候選對象之一。2012年筆者分別選取河北省、山東省、上海市保種的尼羅羅非魚品系作為基礎群體，開展鹽堿耐受性測試、鹽堿慢性馴化及養殖試驗；2013年選擇耐性強、生長快的個體進行繁殖，獲得了選育一代。本研究對3個品系尼羅羅非魚基礎群體及其選育一代幼魚的鹽堿耐受性能進行比較，探索尼羅羅非魚適宜鹽堿養殖范圍及耐鹽堿選育技術。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

尼羅羅非魚基礎群體分別取自上海海洋大學魚類種質資源試驗站的新吉富羅非魚選育后代F16，山東省淡水水產研究所于1988 年從埃及引進的尼羅羅非魚原種后代和河北中捷國家級羅非魚良種場于1996年引進的吉富品系后代F14，以下分別將其簡稱為上海品系、山東品系、河北品系。2012年6月將當年繁育魚苗（基礎群體）運至河北中捷國家級羅非魚良種場，在淡水網箱中適應、培育1～2周后，取相同規格幼魚（0.6～0.7 g）用于鹽堿耐受性試驗。剩余幼魚經慢性馴化適應，在養殖車間水泥池內鹽堿水體中培育3個月，后轉入越冬池；2013年5月從鹽堿馴化養殖群體中，再分別挑選性腺成熟、個體規格大的成魚進行配組，繁殖獲得了選育一代。選育一代魚苗培育、鹽堿耐受性試驗同基礎群體。

1.2 試驗用水

試驗用鹽度組由河北中捷國家級羅非魚良種場鹽洼子內的鹽鹵水與地下深井水配制而成。單堿組是由NaHCO3分析純和地下深井水配制而成。鹽堿混合組是先用鹽鹵水和地下深井水勾兌成不同鹽度，再按照一定比例加入一定量 NaHCO3 分析純，配制成各鹽堿梯度，沉淀2 d后取出上層清水用于試驗。試驗水鹽度用WYY-I型光學折射鹽度計測量，堿度值用HI 83200型多參數水質檢測儀測量。

1.3 試驗方法

試驗在室內玻璃水族缸（0.3 m×0.7 m×0.5 m）中進行。根據預試驗中幼魚死亡情況，單鹽組F0代幼魚設4個濃度梯度（10、15、20、25 g/L），F1代幼魚設5個濃度梯度（10、15、20、22.5、25 g/L）；單堿組設6個濃度梯度（2、4、6、8、10、12 g/L）；鹽堿混合組：F0代設6個濃度梯度（鹽度10、15 g/L，堿度2、4、6 g/L組合），F1代幼魚設9個濃度梯度（鹽度10、15、20 g/L，堿度2、4、6 g/L組合）。放魚前1 d停止喂食，挑選體質健康、規格相近幼魚，每缸中隨機放置50尾，設3個重復。采用微充氧方式保證水體溶氧充足，試驗期間不換水，及時撈出死魚。試驗前8 h內連續觀察，此后在1、2、3、4 d定期觀察記錄幼魚死亡時間與尾數。

1.4 數據統計分析

用SPSS 22.0軟件進行數據分析，計算基礎群體、選育一代幼魚在不同鹽度、不同堿度以及不同鹽堿混合濃度梯度中特定時間（1、2、3、4 d）的半致死濃度。不同處理間差異性用單因素方差分析和Duncans多重比較進行分析。

2 結果與分析

2.1 單鹽組

由表1可見，3品系尼羅羅非魚基礎群體F0代幼魚在 10 g/L 鹽度下4 d內全部存活；在15、20 g/L鹽度下，死亡時間集中在1 d內，之后死亡情況趨于平緩；在25 g/L鹽度下，幼魚無法適應，8 h內全部死亡。選育一代F1代幼魚在10、15 g/L 鹽度下4 d內全部存活；在20 g/L鹽度下，河北品系、山東品系4 d內均全部存活，上海品系出現死亡；在25 g/L鹽度下，8 h內全部死亡。

2.3 鹽堿混合組

2.3.1 10 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

由表5可見，在10 g/L 鹽度條件下，3品系尼羅羅非魚F0代幼魚在堿度 2 g/L 時開始死亡；堿度4 g/L時死亡集中在1 d內，之后死亡趨于平緩；堿度6 g/L時，上海品系1 d內全部死亡，河北品系、山東品系死亡集中在1 d內，4 d后全部死亡。F1代幼魚在堿度2、4 g/L條件下4 d內全部存活；堿度6 g/L條件下，死亡數量隨著時間延長而增加。

由表6可見，F0代幼魚4 d半致死鹽堿度從大到小為河北品系>山東品系>上海品系，河北品系4 d半致死鹽堿度顯著大于山東品系、上海品系（P<0.05）。F1代幼魚4 d半致死鹽堿度大小為河北品系>山東品系>上海品系，河北品系4 d半致死鹽堿度顯著大于山東品系、上海品系（P<0.05）。3品系F1代幼魚1、2、3、4 d的半致死堿度均顯著大于F0代幼魚（P<0.05）。endprint

2.3.2 15 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

由表5可見，15 g/L鹽度條件下，3品系尼羅羅非魚F0代幼魚在堿度2、4 g/L條件下死亡數隨時間延長而增加；堿度6 g/L條件下，死亡集中在0.5 d內，上海品系1 d內全部死亡，山東品系2 d內全部死亡，河北品系3 d內全部死亡。F1代幼魚在堿度2 g/L條件下上海品系和山東品系4 d內全部存活，河北品系2 d后出現死亡；在堿度4 g/L條件下，上海品系、河北品系1 d后開始死亡，山東品系在0.5 d后開始死亡；在堿度6 g/L條件下，上海品系、河北品系0.5 d內未出現死亡，3個品系死亡數均隨時間延長而增加。

2.3.3 20 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

根據預試驗，F0代幼魚在鹽度20 g/L條件下死亡數過多，因此未設置鹽度的 20 g/L 鹽堿混合組。在20 g/L鹽度條件下，3品系F1代幼魚在堿度2 g/L條件下死亡集中在2 d內，之后趨于平緩；堿度4 g/L條件下，死亡集中在1 d內；在堿度6 g/L條件下山東品系0.5 d全部死亡，上海品系、河北品系幼魚1 d內全部死亡。

4 d半致死鹽堿度從大到小為河北品系>上海品系>山東品系，河北品系4 d半致死鹽堿度顯著大于山東品系（P<0.05）。

3 結論與討論

3.1 尼羅羅非魚幼魚的鹽度、堿度耐受性

羅非魚為廣鹽性魚類，對環境有較強的適應能力。有研究表明，未經馴化的尼羅羅非魚幼魚直接投放的鹽度上限為1.8%^[3]；經過慢性馴化后，尼羅羅非魚幼魚4 d半致死鹽度可提升至3.848%^[4]，少數馴化后的尼羅羅非魚成魚也可在鹽度2.4%的水體中產卵繁殖^[5]。尼羅羅非魚對堿性也有較強的耐受性，雷衍之等研究發現，尼羅羅非魚幼魚在pH值9.44、41.6 mmol/L NaHCO3的水體中4 d內全部存活，耐堿能力強于草魚、鰱、鳊等常規淡水養殖種類^[6]。本研究中上海品系、河北品系、山東品系尼羅羅非魚基礎群體一直在淡水環境中養殖、繁殖，未經鹽堿馴化處理；選育一代為基礎群體幼魚經鹽堿馴化、養殖后，選擇部分親魚個體（選擇率3%）繁殖的后代，3個品系F1代幼魚1、2、3、4 d半致死鹽度、半致死堿度均大于F0代幼魚，表明經過鹽堿馴化與選育，尼羅羅非魚后代幼魚的耐鹽、耐堿能力均得到了明顯提高。

3.2 選育一代尼羅羅非魚的鹽堿耐受性

有研究認為，鹽、堿對魚類致毒并非單一因子的作用，而是pH值、鹽度、堿度綜合作用的結果^[7-10]。在鹽堿耐受試驗中，隨著鹽堿濃度增大，尼羅羅非魚幼魚的致死時間均相應縮短；當鹽度由10 g/L提升至15、20 g/L時，尼羅羅非魚基礎群體與選育一代幼魚的堿度耐受值均下降，說明鹽、堿間存在著一定的交互作用，且為協同作用。

在鹽度10、15 g/L條件下的鹽堿混合組中，3個品系尼羅羅非魚F1代幼魚的1、2、3、4 d半致死堿度均顯著大于F0代幼魚（P<0.05），表明經鹽堿馴化選育后代的鹽堿耐受能力得到提高，選育效果明顯。研究表明，慢性馴化后的尼羅羅非魚在20 g/L鹽度、3 g/L堿度的鹽堿混合組中仍保持一定生長率^[11]。由于耐鹽堿性狀選育中既要鹽堿耐受強，又要有一定的養殖生長優勢，因此本研究采用先馴化、養殖，再選擇的綜合育種技術，該技術適用于尼羅羅非魚鹽堿耐受性狀選育。

不同鹽堿混合梯度條件下，3個品系尼羅羅非魚基礎群體幼魚的4 d半致死鹽堿度有一定差異，不同品系尼羅羅非魚幼魚的耐鹽堿性間存在一定變異。這主要是由于供試的3個品系尼羅羅非魚具有不同的遺傳背景，山東品系來源為自埃及引進的尼羅羅非魚原種后代，上海品系來源為新吉富羅非魚選育后代F16，河北品系來源為1994年引進的吉富品系繁育后代F13，經過多代繁育與選育，不同品系對鹽堿環境具有不同的適應力^[11]。經馴化、養殖、選育后，各鹽堿混合組中，河北品系F1代幼魚的4 d半致死鹽堿度均顯著大于上海品系、山東品系（P<0.05），初步認為河北品系可能更適宜作為耐鹽堿選育的候選材料。

參考文獻：

[1]王 慧，耿隆坤，房文紅，等. 中國對蝦往西北內陸咸水水域移植的生產性試養研究[J]. 海洋漁業，1997，19（1）：9-12.

[2]農業部漁業局. 中國漁業統計年鑒[M]. 北京：中國農業出版社，2012：31.

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[4]Payne A I，Collinson R I. A comparison of the biological characteristics of Sarotherodon niloticus（L.）with those of Sarotherodon nureus（Steindachner）and other tilapia of the delta and lower Nile River[J]. Aquaculture，1983，30（1）：335-351.

[5]臧維玲，王 武，葉 林，等. 鹽度對淡水魚類的毒性效應[J]. 海洋與湖沼，1989，20（5）：445-452.

[6]雷衍之，董雙林，沈成鋼. 碳酸鹽堿度對魚類毒性作用的研究[J]. 水產學報，1985，9（2）：171-183.

[7]鄭偉剛，張兆琪，張美昭，等. 鹽度與堿度對花鱸幼魚的毒性研究[J]. 中國生態農業學報，2005，13（3）：116-118.

[8]Lee C L，Fielder D R. The effect of salinity and temperature on the larval development of the freshwater prawn，Macrobrachum australiense Holthus，1950 from Southeastern Queensland，Australia[J]. Aquaculture，1981，26（1/2）：167-172.

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[10]尤 琦，尤 洋，胡庚東.運用正交設計法檢驗鹽度和堿度對大銀魚的聯合毒性[J]. 西南民族大學學報：自然科學版，2000，26（2）：192-194.

[11]趙麗慧，筴金華，張艷紅，等. 不同鹽、堿度下3品系尼羅羅非魚幼魚網箱養殖的生長比較[J]. 南方水產科學，2013，9（4）：1-7.endprint

2.3.2 15 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

由表5可見，15 g/L鹽度條件下，3品系尼羅羅非魚F0代幼魚在堿度2、4 g/L條件下死亡數隨時間延長而增加；堿度6 g/L條件下，死亡集中在0.5 d內，上海品系1 d內全部死亡，山東品系2 d內全部死亡，河北品系3 d內全部死亡。F1代幼魚在堿度2 g/L條件下上海品系和山東品系4 d內全部存活，河北品系2 d后出現死亡；在堿度4 g/L條件下，上海品系、河北品系1 d后開始死亡，山東品系在0.5 d后開始死亡；在堿度6 g/L條件下，上海品系、河北品系0.5 d內未出現死亡，3個品系死亡數均隨時間延長而增加。

2.3.3 20 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

根據預試驗，F0代幼魚在鹽度20 g/L條件下死亡數過多，因此未設置鹽度的 20 g/L 鹽堿混合組。在20 g/L鹽度條件下，3品系F1代幼魚在堿度2 g/L條件下死亡集中在2 d內，之后趨于平緩；堿度4 g/L條件下，死亡集中在1 d內；在堿度6 g/L條件下山東品系0.5 d全部死亡，上海品系、河北品系幼魚1 d內全部死亡。

4 d半致死鹽堿度從大到小為河北品系>上海品系>山東品系，河北品系4 d半致死鹽堿度顯著大于山東品系（P<0.05）。

3 結論與討論

3.1 尼羅羅非魚幼魚的鹽度、堿度耐受性

羅非魚為廣鹽性魚類，對環境有較強的適應能力。有研究表明，未經馴化的尼羅羅非魚幼魚直接投放的鹽度上限為1.8%^[3]；經過慢性馴化后，尼羅羅非魚幼魚4 d半致死鹽度可提升至3.848%^[4]，少數馴化后的尼羅羅非魚成魚也可在鹽度2.4%的水體中產卵繁殖^[5]。尼羅羅非魚對堿性也有較強的耐受性，雷衍之等研究發現，尼羅羅非魚幼魚在pH值9.44、41.6 mmol/L NaHCO3的水體中4 d內全部存活，耐堿能力強于草魚、鰱、鳊等常規淡水養殖種類^[6]。本研究中上海品系、河北品系、山東品系尼羅羅非魚基礎群體一直在淡水環境中養殖、繁殖，未經鹽堿馴化處理；選育一代為基礎群體幼魚經鹽堿馴化、養殖后，選擇部分親魚個體（選擇率3%）繁殖的后代，3個品系F1代幼魚1、2、3、4 d半致死鹽度、半致死堿度均大于F0代幼魚，表明經過鹽堿馴化與選育，尼羅羅非魚后代幼魚的耐鹽、耐堿能力均得到了明顯提高。

3.2 選育一代尼羅羅非魚的鹽堿耐受性

有研究認為，鹽、堿對魚類致毒并非單一因子的作用，而是pH值、鹽度、堿度綜合作用的結果^[7-10]。在鹽堿耐受試驗中，隨著鹽堿濃度增大，尼羅羅非魚幼魚的致死時間均相應縮短；當鹽度由10 g/L提升至15、20 g/L時，尼羅羅非魚基礎群體與選育一代幼魚的堿度耐受值均下降，說明鹽、堿間存在著一定的交互作用，且為協同作用。

在鹽度10、15 g/L條件下的鹽堿混合組中，3個品系尼羅羅非魚F1代幼魚的1、2、3、4 d半致死堿度均顯著大于F0代幼魚（P<0.05），表明經鹽堿馴化選育后代的鹽堿耐受能力得到提高，選育效果明顯。研究表明，慢性馴化后的尼羅羅非魚在20 g/L鹽度、3 g/L堿度的鹽堿混合組中仍保持一定生長率^[11]。由于耐鹽堿性狀選育中既要鹽堿耐受強，又要有一定的養殖生長優勢，因此本研究采用先馴化、養殖，再選擇的綜合育種技術，該技術適用于尼羅羅非魚鹽堿耐受性狀選育。

不同鹽堿混合梯度條件下，3個品系尼羅羅非魚基礎群體幼魚的4 d半致死鹽堿度有一定差異，不同品系尼羅羅非魚幼魚的耐鹽堿性間存在一定變異。這主要是由于供試的3個品系尼羅羅非魚具有不同的遺傳背景，山東品系來源為自埃及引進的尼羅羅非魚原種后代，上海品系來源為新吉富羅非魚選育后代F16，河北品系來源為1994年引進的吉富品系繁育后代F13，經過多代繁育與選育，不同品系對鹽堿環境具有不同的適應力^[11]。經馴化、養殖、選育后，各鹽堿混合組中，河北品系F1代幼魚的4 d半致死鹽堿度均顯著大于上海品系、山東品系（P<0.05），初步認為河北品系可能更適宜作為耐鹽堿選育的候選材料。

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[7]鄭偉剛，張兆琪，張美昭，等. 鹽度與堿度對花鱸幼魚的毒性研究[J]. 中國生態農業學報，2005，13（3）：116-118.

[8]Lee C L，Fielder D R. The effect of salinity and temperature on the larval development of the freshwater prawn，Macrobrachum australiense Holthus，1950 from Southeastern Queensland，Australia[J]. Aquaculture，1981，26（1/2）：167-172.

[9]De Silva C D. Premawansa S，Keembiyahetty C N. Oxygen consumption in Oreochromis niloticus（L.）in relation to development，salinity，temperature and time of day[J]. Journal of Fish Biology，1986，29（2）：267-277.

[10]尤 琦，尤 洋，胡庚東.運用正交設計法檢驗鹽度和堿度對大銀魚的聯合毒性[J]. 西南民族大學學報：自然科學版，2000，26（2）：192-194.

[11]趙麗慧，筴金華，張艷紅，等. 不同鹽、堿度下3品系尼羅羅非魚幼魚網箱養殖的生長比較[J]. 南方水產科學，2013，9（4）：1-7.endprint

2.3.2 15 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

由表5可見，15 g/L鹽度條件下，3品系尼羅羅非魚F0代幼魚在堿度2、4 g/L條件下死亡數隨時間延長而增加；堿度6 g/L條件下，死亡集中在0.5 d內，上海品系1 d內全部死亡，山東品系2 d內全部死亡，河北品系3 d內全部死亡。F1代幼魚在堿度2 g/L條件下上海品系和山東品系4 d內全部存活，河北品系2 d后出現死亡；在堿度4 g/L條件下，上海品系、河北品系1 d后開始死亡，山東品系在0.5 d后開始死亡；在堿度6 g/L條件下，上海品系、河北品系0.5 d內未出現死亡，3個品系死亡數均隨時間延長而增加。

2.3.3 20 g/L鹽度條件下鹽堿混合組

根據預試驗，F0代幼魚在鹽度20 g/L條件下死亡數過多，因此未設置鹽度的 20 g/L 鹽堿混合組。在20 g/L鹽度條件下，3品系F1代幼魚在堿度2 g/L條件下死亡集中在2 d內，之后趨于平緩；堿度4 g/L條件下，死亡集中在1 d內；在堿度6 g/L條件下山東品系0.5 d全部死亡，上海品系、河北品系幼魚1 d內全部死亡。

4 d半致死鹽堿度從大到小為河北品系>上海品系>山東品系，河北品系4 d半致死鹽堿度顯著大于山東品系（P<0.05）。

3 結論與討論

3.1 尼羅羅非魚幼魚的鹽度、堿度耐受性

羅非魚為廣鹽性魚類，對環境有較強的適應能力。有研究表明，未經馴化的尼羅羅非魚幼魚直接投放的鹽度上限為1.8%^[3]；經過慢性馴化后，尼羅羅非魚幼魚4 d半致死鹽度可提升至3.848%^[4]，少數馴化后的尼羅羅非魚成魚也可在鹽度2.4%的水體中產卵繁殖^[5]。尼羅羅非魚對堿性也有較強的耐受性，雷衍之等研究發現，尼羅羅非魚幼魚在pH值9.44、41.6 mmol/L NaHCO3的水體中4 d內全部存活，耐堿能力強于草魚、鰱、鳊等常規淡水養殖種類^[6]。本研究中上海品系、河北品系、山東品系尼羅羅非魚基礎群體一直在淡水環境中養殖、繁殖，未經鹽堿馴化處理；選育一代為基礎群體幼魚經鹽堿馴化、養殖后，選擇部分親魚個體（選擇率3%）繁殖的后代，3個品系F1代幼魚1、2、3、4 d半致死鹽度、半致死堿度均大于F0代幼魚，表明經過鹽堿馴化與選育，尼羅羅非魚后代幼魚的耐鹽、耐堿能力均得到了明顯提高。

3.2 選育一代尼羅羅非魚的鹽堿耐受性

有研究認為，鹽、堿對魚類致毒并非單一因子的作用，而是pH值、鹽度、堿度綜合作用的結果^[7-10]。在鹽堿耐受試驗中，隨著鹽堿濃度增大，尼羅羅非魚幼魚的致死時間均相應縮短；當鹽度由10 g/L提升至15、20 g/L時，尼羅羅非魚基礎群體與選育一代幼魚的堿度耐受值均下降，說明鹽、堿間存在著一定的交互作用，且為協同作用。

在鹽度10、15 g/L條件下的鹽堿混合組中，3個品系尼羅羅非魚F1代幼魚的1、2、3、4 d半致死堿度均顯著大于F0代幼魚（P<0.05），表明經鹽堿馴化選育后代的鹽堿耐受能力得到提高，選育效果明顯。研究表明，慢性馴化后的尼羅羅非魚在20 g/L鹽度、3 g/L堿度的鹽堿混合組中仍保持一定生長率^[11]。由于耐鹽堿性狀選育中既要鹽堿耐受強，又要有一定的養殖生長優勢，因此本研究采用先馴化、養殖，再選擇的綜合育種技術，該技術適用于尼羅羅非魚鹽堿耐受性狀選育。

不同鹽堿混合梯度條件下，3個品系尼羅羅非魚基礎群體幼魚的4 d半致死鹽堿度有一定差異，不同品系尼羅羅非魚幼魚的耐鹽堿性間存在一定變異。這主要是由于供試的3個品系尼羅羅非魚具有不同的遺傳背景，山東品系來源為自埃及引進的尼羅羅非魚原種后代，上海品系來源為新吉富羅非魚選育后代F16，河北品系來源為1994年引進的吉富品系繁育后代F13，經過多代繁育與選育，不同品系對鹽堿環境具有不同的適應力^[11]。經馴化、養殖、選育后，各鹽堿混合組中，河北品系F1代幼魚的4 d半致死鹽堿度均顯著大于上海品系、山東品系（P<0.05），初步認為河北品系可能更適宜作為耐鹽堿選育的候選材料。

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