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γ—干擾素、腺苷脫氨酶在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床價值

2014-11-14 01:12:15黃錫坤肖玲黃福達
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2014年30期

黃錫坤+肖玲+黃福達

[摘要] 目的 探討腹水γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA)在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床價值。 方法 分別檢測29例結(jié)核腹膜炎患者、22例癌性腹水患者的腹水γ-干擾素、腺苷脫氨酶水平,并進行比較。 結(jié)果 結(jié)核性腹膜炎組中γ-干擾素、腺苷脫氨酶的水平及活性均高于癌性腹水組(P值均<0.05)。2項指標聯(lián)合檢測對結(jié)核性腹膜炎診斷的靈敏度為86.2%,特異度95.5%,與單獨檢測ADA比較,敏感度相近,其特異度明顯增高。 結(jié)論 γ-干擾素、腺苷脫氨酶的檢測對結(jié)核性和癌性腹腔積液的鑒別有臨床意義,可用于兩者的鑒別診斷,同時進行IFN-γ與ADA檢測可提高結(jié)核性腹腔積液的診斷特異度。

[關鍵詞] 結(jié)核性腹膜炎;γ-干擾素(IFN-γ);腺苷脫氨酶(ADA)

[中圖分類號] R526 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2014)30-0013-03

結(jié)核病是全球嚴重的公共衛(wèi)生問題之一,我國也是世界22個結(jié)核病高負擔國家之一,其病例總數(shù)位居第二[1],僅次于印度,目前結(jié)核病感染人群有近5.5億人,對人民健康的危害遠遠超出其他傳染病,由結(jié)核感染而死亡的人數(shù)是其他傳染性疾病總死亡人數(shù)的2倍以上[1]。結(jié)核病的臨床表現(xiàn)呈多樣性,可累及全身多個臟器。近年來,結(jié)核病無論在發(fā)病率還是在復發(fā)率方面均有逐漸上升趨勢,其中結(jié)核性腹膜炎的發(fā)病率也有難以忽視之勢,但由于其癥狀缺乏特異性,且體征常以腹水為主要表現(xiàn),在診斷方面要獲取細胞學或病理學證據(jù)較為困難,故常易造成誤診,因此腹水作為最容易得到的標本,其生物標志物檢測的意義顯得甚為重要。本文我們將腹水γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA)進行聯(lián)合檢測,旨在進一步探討上述指標在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本實驗選取2012年8月~2013年12月在本院住院的腹腔積液患者51例作為病例資料,分為結(jié)核性腹膜炎組及癌性腹水組。結(jié)核性腹膜炎組29例:男16例,女13例,年齡17~68歲,平均38.8歲。診斷標準[2]: ①有結(jié)核病史,伴有其他器官結(jié)核病證據(jù);②不明原因長期發(fā)熱,伴有腹痛、腹脹、腹水、腹部包塊或腹壁柔韌感;③腹水性質(zhì)為滲出液,以淋巴細胞為主,普通細菌培養(yǎng)陰性,細胞學檢查未發(fā)現(xiàn)癌細胞;④放射線胃腸鋇餐發(fā)現(xiàn)腸粘連等征象;⑤PPD試驗(結(jié)核菌素試驗)呈強陽性;⑥抗結(jié)核治療有效。癌性腹水組22例:男13例,女9例,年齡41~76歲,平均58.6歲。22例病例均最終由影像學及病理學確診為惡性腫瘤。

1.2 儀器與方法

上述檢測對象均無菌穿刺留取腹水5 mL進行檢測。離心(離心半徑16 cm ,3000 r/min離心10 min),取上清液分裝,置液氮-20℃保存待測。IFN-γ檢測采用ELISA法,應用Wellscan MK3型酶標分析儀,試劑盒購自上海研輝生物科技有限公司的γ-干擾素ELISA進口分裝試劑盒(批號20120901A,有效期:2013年12月),嚴格按試劑盒的說明書進行操作,酶標儀自動打印出標準曲線及各孔IFN-γ濃度,設雙標準和空白對照。ADA測定用速率法。儀器使用西門子ADVIA1650全自動生化分析儀,試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供,按試劑盒說明操作。

1.3 觀察指標

以上述方法分別檢測出結(jié)核性腹膜炎組及癌性腹水組患者各自的腹水γ-干擾素、腺苷脫氨酶水平,并進行比較。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 12.0統(tǒng)計學軟件分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,組間比較采用t檢驗,率的比較采用χ2檢驗。兩種實驗方法的診斷效果評價采用靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率及Youden指數(shù)比較。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 γ-干擾素、腺苷脫氨酶檢驗結(jié)果

見表1。結(jié)核腹膜炎組腹水的γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA)活性均比癌性腹水組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2 IFN-γ、ADA陽性檢出結(jié)果

見表2。分別以IFN-γ>250 pg/mL、ADA>40 U/L為陽性檢出標準,26例結(jié)核性腹腔積液及4例惡性腹腔積液IFN-γ>250 pg/mL;25例結(jié)核性腹腔積液中ADA>40 U/L,2例惡性腹腔積液的ADA>40 U/L。

從表2可以看出,IFN-γ與另外兩組在對結(jié)核性腹腔積液中的靈敏度相近(P>0.05),其結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義,但特異度及Youden指數(shù),與ADA結(jié)果比較,其結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示ADA特異度比IFN-γ高;而IFN-γ及ADA聯(lián)合檢驗,雖然其靈敏度與單獨檢測ADA相同,但特異度及Youden指數(shù)均明顯增高,兩者比較,P<0.05,其結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義。提示聯(lián)合檢測IFN-γ、ADA,盡管診斷結(jié)核的敏感度相近,但特異度較單項檢測有明顯提高。

3 討論

近年來,由于多重耐藥結(jié)核分枝桿菌的出現(xiàn)、HIV感染的傳播、貧困、移民等多種因素,目前全球結(jié)核病疫情出現(xiàn)回升趨勢[3]。在結(jié)核性腹膜炎患者中腹水征是最常見的臨床表現(xiàn),通常起病較為緩慢、隱襲,臨床癥狀不典型,導致結(jié)核性腹膜炎診斷困難,使其較難與其他病因引起的滲出性腹水鑒別。結(jié)核性腹膜炎的早期診斷和合理治療對患者的病情起著至關重要的作用。取得細菌學和病理學的檢查結(jié)果是診斷的金指標,但陽性率太低,結(jié)核性腹水涂片找抗酸桿菌和結(jié)核菌培養(yǎng)結(jié)果檢出率低至10%[4],有研究報道[5,6],非選擇性腹膜活檢對不明原因腹腔積液的確診率僅為6.7%~46.4%,外科腹腔鏡檢查及腹膜活檢對結(jié)核性腹膜炎的確診率為93%,但檢查具有創(chuàng)傷性,不宜常規(guī)開展。故常常對胸腹腔積液中的其他實驗室指標進行檢測[7],本組資料通過檢測腹水IFN-γ含量、ADA活性,探討其對結(jié)核性腹膜炎的診斷價值。

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機體后侵犯腹膜,隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應性疾病,而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導作用的是淋巴細胞,腺苷脫氨酶(ADA)是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類,為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨,在人體各器官、組織中廣泛分布,尤其以淋巴細胞,特別是T淋巴細胞中含量最高。結(jié)核菌感染機體后刺激單核巨噬細胞系統(tǒng)使淋巴細胞增多,結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護性抗體,故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細胞免疫起作用。細胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細胞并促使其產(chǎn)生增殖,隨之引起巨噬細胞的活化,而活化的巨噬細胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多,從而起到增強對細胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明,在胸腹水檢測中,結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高,癌性胸腹水不增高,而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示,結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高,如以ADA活性40 U/L為臨界值,結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%,特異度90.9 %,與文獻報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中,細胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機體的主要免疫機制,人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應細胞是T淋巴細胞CD4+,其中以輔助T細胞1(Th1細胞)為主,Th1細胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細胞因子主要以γ-干擾素為主,有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應答反應中占主要地位[10]的是由Th1細胞介導的免疫應答,而Th2細胞是惡性腫瘤中的主要效應細胞,Th1細胞活性受抑制,故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水,因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻報道,檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11],由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn),結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高,提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機體免疫應答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值,對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示,在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高,二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高,聯(lián)合檢測γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA),對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%,特異性為95.5%,盡管診斷結(jié)核的敏感度相近,但特異度較單項檢測有明顯提高,結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素,結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述,在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中,腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷,二者也能幫助鑒別。因此2項指標聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速,適用于臨床。

[參考文獻]

[1] 李成娟. 老年肺結(jié)核病人生活滿意度及影響因素分析[J].中國公共衛(wèi)生,2010,26(2):153-154.

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[4] 盛圓,楊光偉. 結(jié)核感染T細胞斑點試驗在結(jié)核性腹水診斷中的價值[J]. 實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,17(24):147-148.

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[6] WANG WN,WALLACK MK,BARNHART S,et al. Tuberculousperitonitis:definitive diagnosis by laparoscopic peritoneal biopsy[J]. Am Surg,2008,74(12):1223-1224.

[7] 杜鳳嬌,戈啟萍,韋攀健,等. 酶聯(lián)免疫斑點術和流式細胞術檢測γ-干擾素對結(jié)核性胸膜炎的輔助診斷價值[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2011,34(7):617-622.

[8] 孫菲. 腺苷脫氨酶(ADA)的檢測及臨床應用[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志,2008,29(12):1151-1152.

[9] Lamsal M,Guatam N,Bhatta N,et al. Diagnostic utility of adenosine deaminase (ADA) activity in pleural fluid and serum of tuberculous and non-tubercilous respiratory disease patients[J]. Southeast Asian J Trop Med Public Health,2007,38(2):363-369.

[10] Cozmei C,Constantinescu D,Carasevici E,et al. Th1 and Th2 cyto-kine response in patients with pulmonary tuberculosis and healthcare workers occupationally exposed to M.tuberculosis[J]. Rev Med Chir Soc Med Nat Ias,2007,111(3):702-709.

[11] 黃錫坤,黃福達. 干擾素-γ與腺苷脫氨酶聯(lián)合檢測診斷結(jié)核性胸腔積液價值[J]. 中華實用診斷與治療雜志,2013,27(8):791-792.

(收稿日期:2014-04-11)

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機體后侵犯腹膜,隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應性疾病,而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導作用的是淋巴細胞,腺苷脫氨酶(ADA)是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類,為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨,在人體各器官、組織中廣泛分布,尤其以淋巴細胞,特別是T淋巴細胞中含量最高。結(jié)核菌感染機體后刺激單核巨噬細胞系統(tǒng)使淋巴細胞增多,結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護性抗體,故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細胞免疫起作用。細胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細胞并促使其產(chǎn)生增殖,隨之引起巨噬細胞的活化,而活化的巨噬細胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多,從而起到增強對細胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明,在胸腹水檢測中,結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高,癌性胸腹水不增高,而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示,結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高,如以ADA活性40 U/L為臨界值,結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%,特異度90.9 %,與文獻報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中,細胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機體的主要免疫機制,人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應細胞是T淋巴細胞CD4+,其中以輔助T細胞1(Th1細胞)為主,Th1細胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細胞因子主要以γ-干擾素為主,有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應答反應中占主要地位[10]的是由Th1細胞介導的免疫應答,而Th2細胞是惡性腫瘤中的主要效應細胞,Th1細胞活性受抑制,故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水,因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻報道,檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11],由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn),結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高,提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機體免疫應答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值,對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示,在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高,二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高,聯(lián)合檢測γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA),對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%,特異性為95.5%,盡管診斷結(jié)核的敏感度相近,但特異度較單項檢測有明顯提高,結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素,結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述,在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中,腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷,二者也能幫助鑒別。因此2項指標聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速,適用于臨床。

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(收稿日期:2014-04-11)

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機體后侵犯腹膜,隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應性疾病,而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導作用的是淋巴細胞,腺苷脫氨酶(ADA)是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類,為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨,在人體各器官、組織中廣泛分布,尤其以淋巴細胞,特別是T淋巴細胞中含量最高。結(jié)核菌感染機體后刺激單核巨噬細胞系統(tǒng)使淋巴細胞增多,結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護性抗體,故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細胞免疫起作用。細胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細胞并促使其產(chǎn)生增殖,隨之引起巨噬細胞的活化,而活化的巨噬細胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多,從而起到增強對細胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明,在胸腹水檢測中,結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高,癌性胸腹水不增高,而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示,結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高,如以ADA活性40 U/L為臨界值,結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%,特異度90.9 %,與文獻報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中,細胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機體的主要免疫機制,人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應細胞是T淋巴細胞CD4+,其中以輔助T細胞1(Th1細胞)為主,Th1細胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細胞因子主要以γ-干擾素為主,有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應答反應中占主要地位[10]的是由Th1細胞介導的免疫應答,而Th2細胞是惡性腫瘤中的主要效應細胞,Th1細胞活性受抑制,故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水,因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻報道,檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11],由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn),結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高,提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機體免疫應答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值,對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示,在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高,二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高,聯(lián)合檢測γ-干擾素(IFN-γ)、腺苷脫氨酶(ADA),對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%,特異性為95.5%,盡管診斷結(jié)核的敏感度相近,但特異度較單項檢測有明顯提高,結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素,結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述,在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中,腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷,二者也能幫助鑒別。因此2項指標聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速,適用于臨床。

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(收稿日期:2014-04-11)

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