新生兒溶血病血清學檢驗結果的分析

江永承 譚尚華

（1 廣東德慶縣婦幼保健院，廣東 德慶 526600；2 廣東省肇慶市第一人民醫院，廣東 肇慶 526040）

新生兒溶血病（HDN）臨床上是指由于母嬰血型不合，胎兒的血液隨母體血液循環進入母體后，導致母體產生相應的IgG抗體[1]，產生的IgG抗體歲母體血液循環進入胎兒體內并作用于胎兒的紅細胞而產生同種被動免疫性疾病。HDN可導致因而出現黃疸、水腫、貧血，嚴重者會導致新生兒出現膽紅素腦病，危及新生兒的生命[2]。HDN嚴重影響著新生兒的正常生長發育及生命安全，因此如何有效的進行HDN的治療具有重要的意義。臨床診斷是疾病治療的前提，準確的臨床診斷可有效的提高疾病的治療效果，基于此，筆者進行了HDN血清學檢查的相關臨床研究，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2009年6月至2012年3月我院接受分娩的O型血產婦108例，年齡1～30 d，平均年齡（16.4±4.7）d，產婦所產新生兒臨床表現為高膽紅素血癥，疑似HDN，按照新生兒血型不同，依次分為A型血組（A組）和B型血組（B組），其中A型血組新生兒50例，1～10 d新生兒14例，10～20 d新生兒26例，20～30 d新生兒10例，男性新生兒24例，女性新生兒26例；B型血組新生兒58例，1～10 d新生兒22例，10～20 d新生兒22例，20～30 d新生兒14例，男性新生兒30例，女性新生兒28例，兩組新生兒在年齡構成比及性別構成比方面無顯著性差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 檢測儀器

Grifols專用孵育器（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），Dianafuge-232專用離心機（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），HH.W21-420電熱恒溫（上海悅豐儀器儀表有限公司）。

1.2.2 檢測試劑

Diana-Ge1 Coombs卡（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），1%A、B、O標準紅細胞（上海醫藥生物公司），生理鹽水。

1.2.3 血液樣品的采集

兩組新生兒各取1管血液樣品，使用乙二胺四乙酸作為抗凝劑。

1.2.4 檢查方法

1.2.4.1 直接抗人球蛋白試驗

取各組新生兒紅細胞適量，使用生理鹽水進行洗滌，洗滌3次，除去上清液，制備1%紅細胞懸浮液（取洗滌后紅細胞5 μL，加入生理鹽水500 μL），于Diana-Ge1 Coombs檢測卡的一個小孔內加入1%紅細胞懸浮液50 μL，離心9 min，取出，直接觀察結果。

1.2.4.2 游離試驗和放散試驗

對Diana-Ge1 Coombs檢測卡的6個小孔進行標記，前三個孔用于游離試驗，依次放入A、B、O標準紅細胞50 μL，再各放入患兒血清50 μL。放散試驗（ABO血型系統采用熱放散法、Rh血型系統采用醚放散法），參照《全國臨床檢驗操作規程》進行操作[3]，于后三個小孔依次放入A、B、O標準紅細胞50 μL，再各放入患兒血清50 μL，將Diana-Ge1 Coombs檢測卡置于賦予相中，37 ℃孵育15 min，離心9 min，取出，直接觀察結果。

表1 ABO血型系統不同血清學檢查結果比較

1.2.5 檢查結果判定

陽性：紅細胞分布在凝膠中或留在微柱上端；陰性：紅細胞分布于微柱的底部或出現沉降。

1.2.6 統計學方法

統計兩組新生兒的各項檢查指標結果，使用SPSS13.0軟件包進行χ2檢驗，以P<0.05作為具有統計學意義的基本檢測標準。

2 結 果

2.1 結果分析

108例疑似HDN的高膽紅素血癥新生兒中，確診為HDN的患兒49例，占45.37%，其中ABO血型系統HDN患兒為45例（91.84%），其中A組21例（42.86%），B組24例（48.98%），Rh血型系統HDN患兒為4例（8.16%）。

2.2 ABO血型系統各項檢查結果比較

ABO血型系統不同檢查方法的檢查結果見表1。

3 討 論

現代臨床研究發現，HDN的起源來自胎兒從父親方面繼承的一部分紅細胞抗原，由于母親體內沒有這些抗原，因此當胎兒紅細胞中的抗原通過血液循環進入母體內，母體的免疫系統將會長生相應的抗體IgG，這部分抗體又會隨著母胎血液循環進入胎兒的體內，從而破壞胎兒的紅細胞，進而導致HDN的發生。ABO型HDN是臨床上最為常見的新生兒溶血證類型，其主要由于O型血目前血清中的IgG抗體抗A(B)效價較B型血清中的抗A和A型血清中的抗B效價高[4]，從而導致ABO血型系統HDN的母親多為O型血，本次臨床研究發現，ABO血型系統HDN患兒占91.84%，明顯高于Rh血型，與臨床報道一致；HDN的檢查方法中，直接抗人球蛋白試驗主要用于檢查患兒的紅細胞是否收到抗體致敏，而游離試驗和放散試驗主要檢測胎兒新生兒體內IgG抗體存在的與否，其中直接抗人球蛋白試驗在HDN的檢查中具有重要作用，其可區分HDN是ABO血液系統還是Rh血液系統，這是因為ABO血型系統所致的HDN對直接抗人球蛋白試驗強度很弱，僅有強ABO血型系統所致的HDN導致直接抗人球蛋白試驗呈弱陽性，而其他血液系統，尤其是Rh血型系統HDN對直接抗人球蛋白試驗強度通常超過“+”，本次臨床研究中，4例Rh型HDN患兒的直接抗人球蛋白試驗結果均為“++++”，同時，通常直接抗人球蛋白試驗結果越強，患兒的HDN越嚴重。本次臨床研究中通過對不同血型新生兒進行游離試驗和放散試驗發現，放散試驗對于ABO血型系統HDN的檢測靈敏度優于游離試驗。

總之，母嬰血型不合的HDN主要發生于ABO血型系統，放散試驗對ABO血型新生兒溶血病的檢查敏感度最高，直接抗人球蛋白試驗對Rh血型新生兒溶血病檢查檢查敏感度最高，可作為判定HDN的臨床診斷依據。

[1]謝世榮,張興明.凝聚胺技術在產前血型抗體及新生兒溶血病檢查中的應用[J].檢驗醫學與臨床,2008,5(4):218-219.

[2]孫六娜.108例新生兒溶血病患兒血清學檢測結果分析[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(21):2718-2719.

[3]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:256-257.

[4]劉孟黎,張艷,劉晟,等.新生兒溶血病患兒母親血清中IgG 亞類水平的臨床意義[J].細胞與分子免疫學雜志,2006,22(4): 498-499.