三種紅細胞沉降率檢驗方法對比分析

王潤琴，李美英，李曉斌

(陽煤集團總醫院，山西 陽泉 045000)

紅細胞沉降率(evythrocyte sedimentation tate，ESR)是指在規定條件下，離體抗凝全血中的紅細胞自然下沉的速率。ESR是臨床常規檢測項目，雖特異性差，但其生理性及病理性增快對疾病的鑒別診斷以及疾病的動態觀察具有一定的實用價值［1］。ESR檢驗多年來一直延用傳統魏氏手工法。盡管魏氏法在國內屬規范方法，操作簡便，可是不能滿足美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)提出的保證操作者生物安全的要求［1］。隨著高新技術在醫學檢驗領域的應用，安全的ESR檢驗設備、快速的ESR檢驗方法誕生了，BD Sedi-15帶刻度血沉架、SD-100全自動血沉儀陸續應用于臨床實驗室。目前，國際血液學標準化委員會(ICSH)首選魏氏法作為參考方法，用于驗證其他方法的可靠性［1］。本研究以傳統魏氏法為參考，采用傳統魏氏法BD Sedi-15帶刻度血沉架改良魏氏法及SD-100全自動血沉儀法，于室溫(18～25℃)下分別對10例標本同時進行ESR檢驗，并對3種方法測定結果進行對比分析，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取陽泉煤業集團總醫院患者標本10例，采用紅細胞壓積為0.30～0.36、ESR 分布在15～105 mm/h范圍內的乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝全血。

1.2 儀器及器材

1.2.1 參考法 傳統魏氏法，將抗凝血置于特制刻度血沉管內，垂直立于室溫1 h后，讀取上層血漿的高度，即為ESR［2］;采用30 cm長一端帶20 cm刻度玻璃血沉管及其配套帶調節螺旋裝置的血沉架、EDTA抗凝普通真空采血管。

1.2.2 常規法 a)BD Sedi-15帶刻度血沉架法(常規法):將裝有抗凝血的專用血沉真空采血管直接垂直立于配套帶刻度血沉架內1 h后，對照血沉架上的特制刻度讀取上層血漿的高度，即為ESR;采用BD Sedi-15帶刻度血沉架及配套真空采血管。b)SD-100全自動血沉儀法(常規法2):全自動血沉儀根據紅細胞下沉過程中血漿濁度的改變，采用光電比濁、紅外線掃描或攝影法動態分析紅細胞下沉各個時段血漿的透光度，30 min后微電腦記錄并打印結果;采用SD-100全自動血沉儀及配套真空采血管。

1.3 方法

采用EDTA抗凝普通真空采血管分別對10位患者取樣，每位不少于8 mL，血樣充分混勻后將部分血樣按BD Sedi-15帶刻度血沉架法和SD-100全自動血沉儀法要求的標本量分別置于各自瀝干抗凝劑的配套真空采血管中，剩余部分留作傳統魏氏法用。將準備好的標本于室溫下分別用其配套方法按操作規程檢測ESR，標本采集后4 h內完成［2］。

1.4 記錄ESR結果

由于本實驗所用標本EDTA抗凝全血屬于未稀釋標本，故還需采用經驗公式將直接測得的ESR結果進行糾正、整理。未稀釋標本糾正ESR(mm/h)=(未稀釋標本 ESR ×0.86)－12［1］。

1.5 統計學方法

參照ICSH參考法與常規法ESR檢測結果比較范圍，以魏氏法作為參考，對其他兩種常規方法所得糾正ESR進行驗證［1］，所得糾正ESR應用2003版Excel軟件計算相關系數(r)并繪制散點圖作線性回歸處理，進行相關性分析。

2 結果

2.1 數據處理

經過調節同一標本的HCT，使ESR值分布在15～105 mm/h范圍，并對其他常規法相對應的ESR值進行驗證，將所有常規法結果的95%限定值范圍作為ICSH魏氏參考法與其他常規法ESR檢測結果比較范圍［1］，可見所有結果均在ICSH魏氏參考法與其他常規ESR檢測法結果范圍內。見表1。

表1 兩種常規方法糾正ESR結果與參考法比較 mm/h

2.2 統計學分析

據表1結果，以魏氏法作為參考，分別對其他兩種常規方法所得糾正ESR值計算相關系數，得r值，繪制散點圖作線性回歸處理(見圖1)可見，在整個取值范圍內兩種常規ESR檢驗方法和魏氏參考法比較的數據圖均呈直線關系。依照NCCLS EP9-A2中用患者樣本進行比對，r均大于0.975，說明標本取值范圍合適，可見兩種ESR檢驗方法的結果與魏氏法比較，具有直線相關性。

圖1 兩種常規方法糾正ESR與魏氏參考法相關性

3 討論

作為傳統且應用較廣的實驗室指標，ESR檢驗操作簡便，但迄今仍未建立確定性方法［1］。

魏氏法作為傳統方法，為國內規范方法。ICSH規定的ESR檢測的標準化文件中，均以魏氏法為基礎，對血沉管規格、抗凝劑使用、血標本制備、檢測條件和方法及報告結果等操作過程的各個環節重新作了嚴格的規定，其突出的優點是可采用EDTA抗凝，可與血液分析儀共用一份抗凝靜脈血標本，并在分析結果時易于綜合白細胞變化進行判斷［1］。由于魏氏法操作過程中需要開蓋移血，加之一次性血沉管成本較高，實驗室仍舊反復使用人工清潔干燥后的血沉管。明顯存在的高污染風險對ESR檢測方法的細節有了新的要求。NCCLS文件提出改進ESR檢測技術，要求采用自動或封閉系統代替開放系統從而保證操作者生物安全［1］。

隨著臨床實驗室真空采血管的引進，特制枸櫞酸鈉抗凝真空血沉采血管應用于ESR檢驗。應用改良魏氏法的BD Sedi-15帶刻度血沉架及采用紅外線掃描動態分析ESR速率的SD-100全自動血沉儀使用各自配套枸櫞酸鈉抗凝真空血沉采血管按要求采血后，無需開蓋移血，無需另外使用特制刻度血沉管，直接將其顛倒至少8次，待其充分混勻后按要求置于配套設備即可進行ESR檢測，滿足了NCCLS文件提出的保證操作者生物安全的要求。SD-100全自動血沉儀不僅自動化、微量化，還可在30 min內得到檢測結果，大大縮短了臨床等候報告的時間［1］。

目前，ICSH首選魏氏法作為參考方法，采用魏氏管和同一患者EDTA抗凝全血檢測ESR，而后對結果進行經驗公式糾正，用于驗證其他方法特定設備的ESR值［1］;NCCLS EP9-A2文件設計用患者樣本進行比對。因此，本實驗通過以魏氏法作參考，對BD Sedi-15帶刻度血沉架法及SD-100全自動血沉儀所得糾正ESR值進行比較及相關性分析，可見所有結果均在ICSH參考法與常規法ESR檢測結果比較范圍內，表明這兩種新方法應用于ESR檢驗結果滿意。兩種常規法的結果與魏氏參考法比較具有直線相關性，表明3種ESR檢驗方法的結果差異無統計學意義(P＞0.05)。

［1］熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎［M］.4版.北京:人民衛生出版社，2008.

［2］葉應撫，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程［M］.3版.南京:東南大學出版社，2006.