水產品氯霉素膠體金試紙條快速檢測研究

張瑩瑩

摘要：水產品中氯霉素殘留會通過食物鏈富集作用對人體健康構成危害，建立快速、簡便、有效的檢測技術十分必要。膠體金試紙條快速檢測技術操作簡單，檢測時間短，攜帶方便，價格經濟。對膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，為水產品氯霉素殘留快速檢測發展提供技術依據。

關鍵詞：水產品；氯霉素；膠體金試紙條；快速檢測

中圖分類號：TS207.3 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作為廣譜抗生素，于2002年被禁止在我國水產品的養殖、保鮮、加工和運輸等生產環節中使用，美國、歐盟等國家也嚴格規定水產品中氯霉素不得檢出（檢出限為1 μg/kg）。藥物殘留問題給我國水產品出口貿易帶來巨大影響。同時，近年來食品安全已成為我國百姓最關心的話題之一，隨著水產品消費量的日益增長，其質量安全問題也受到廣泛關注。因此，建立簡便、快速、有效的檢測技術十分必要。本文對氯霉素膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，以期為快速檢測技術的進一步發展提供參考。

1 氯霉素的應用與危害

氯霉素（CAP）為白色或微帶黃綠色的結晶性粉末，味極苦，易溶于甲醇、丙酮等有機溶劑，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽桿菌、鏈球菌及衣原體等多種病原微生物。CAP因其對水產品病害的預防和治療都有良好的效果，且價格低廉，在20世紀80年開始被廣泛應用于水產品的養殖和加工中。

CAP在水產品中代謝慢，殘留時間長，會通過食物鏈的富集作用對人體構成危害。曹巧玲等人認為，CAP可導致人體骨髓造血功能紊亂、胃腸道不適、嬰兒灰嬰綜合征等多種不良反應。CAP不僅對人體有副作用，對動植物也有不同程度的影響。因此，許多國家制訂了動物源性食品中CAP的使用限量和檢出標準，我國也規定其在水產品中禁止使用。

2 水產品氯霉素快速檢測概況

目前，水產品中CAP常用的檢測方法有酶聯免疫法、膠體金免疫層析法和色譜分析法等。色譜分析法靈敏度高、準確性好，但是前處理過程復雜，且儀器設備成本較高，不易普及，也不適合日常的監管工作。酶聯免疫法和膠體金免疫層析法操作簡單、用時較短，但易出現假陽性，可用于大批量樣品的初篩工作。張曉輝等人的研究結果表明，膠體金免疫層析法比酶聯免疫法操作更簡便、使用更快捷、價格更經濟，適于現場篩選工作。膠體金試紙條是在膠體金免疫層析技術基礎上研制而成的，其便于攜帶，操作時間短，可在現場經肉眼判斷得到檢測結果。

我國水產行業規模越來越大，但分布較為零散，難以集中管理，而水產品中的CPA并不能通過肉眼辨別出來，檢測程序繁雜，給基層監管人員帶來大量的工作。如果先用膠體金試紙條在現場進行快速初篩，然后將疑似樣品通過色譜技術進行進一步檢測，可以大大縮短檢測周期，提高工作效率，更加及時有效地進行監管工作。

3 膠體金試紙條快速檢測技術

3.1 膠體金試紙條快速檢測技術的原理

膠體金試紙條是采用膠體金標記技術，以膠體金作為示蹤物，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。若樣品溶液中含有CAP（抗原物質），則CAP與金標抗體相結合，進而封閉金標抗體上CAP的抗原結合點，阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，使T線顯色較弱、甚至不顯色，結果為陽性；若樣品溶液中沒有CAP，則不能阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，從而T線顯色較強，呈紅褐色，結果為陰性。具體如圖1所示。

3.2 膠體金試紙條快速檢測技術的應用

膠體金試紙條具有快速、簡便、安全、適用于現場篩選和快速檢測工作等優點。張曉輝等人的研究結果表明，采用膠體金試紙條快速檢測法，可在5～10 min可測得蝦中殘留的CAP，檢測限為1.000 μg/kg，與酶聯免疫法進行比較，檢測結果總符合率為92.5%，說明該法特異性強、重復性好，適于現場檢測。肖治理等人采用檸檬酸鈉還原法制備膠體金，可在5～8 min完成CPA檢測，方法穩定，檢測限為2 ng/mL，檢測結果肉眼可判斷。但是，膠體金試紙條用于水產品快速檢測的時日尚短，需要進一步觀察和完善，而且目前市面上的膠體金試紙條快速檢測產品品種繁多、質量參差不齊。劉歡等人研究報道，國內市面上銷售的4種膠體金試紙條快速檢測產品，僅有1種產品能100%準確地檢測出68個樣品中是否殘留CAP，有1種產品的假陽性率達35%，2種產品的最低檢測濃度值與商標標識最低檢出限不相符。所以，在使用膠體金試紙條快速檢測產品前，應該先進行產品信息驗證，確保該產品符合標準后方能用于批量樣品檢測工作。

參考文獻

[1] 肖樂.氯霉素風波[J].中國水產，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，蘇德森，等.高效液相色譜法測定對蝦中五種磺胺類藥物殘留[J].現代科學儀器，2005（1）：70-72.

[3] 湯軼偉，勵建榮，孟良玉.水產品中氯霉素藥物殘留檢測方法研究進展[J].食品科學，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，楊凱，吳澤新，等.氯霉素的毒性作用和檢測方法研究進展[J].職業與健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 劉曦薇，吳玲玲.氯霉素對斑馬魚早期發育的毒性效應[J].環境科學學報，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 呂順，錢鑫萍，范遠景，等.氯霉素細胞毒性研究[J].安徽農業科學，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 張曉輝，李余動，孔蕾，等.ELISA和GICA快速檢測水產品中氯霉素殘留的比較[J].浙江農業學報，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素膠體金免疫層析快速檢測試紙條的研制[J].食品與機械，2013，29（4）：54-62.

[9] 劉歡，孫偉紅，馬兵，等.水產品中氯霉素殘留快速檢測產品的質量分析和評價[J].中國漁業質量與標準，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection

摘要：水產品中氯霉素殘留會通過食物鏈富集作用對人體健康構成危害，建立快速、簡便、有效的檢測技術十分必要。膠體金試紙條快速檢測技術操作簡單，檢測時間短，攜帶方便，價格經濟。對膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，為水產品氯霉素殘留快速檢測發展提供技術依據。

關鍵詞：水產品；氯霉素；膠體金試紙條；快速檢測

中圖分類號：TS207.3 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作為廣譜抗生素，于2002年被禁止在我國水產品的養殖、保鮮、加工和運輸等生產環節中使用，美國、歐盟等國家也嚴格規定水產品中氯霉素不得檢出（檢出限為1 μg/kg）。藥物殘留問題給我國水產品出口貿易帶來巨大影響。同時，近年來食品安全已成為我國百姓最關心的話題之一，隨著水產品消費量的日益增長，其質量安全問題也受到廣泛關注。因此，建立簡便、快速、有效的檢測技術十分必要。本文對氯霉素膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，以期為快速檢測技術的進一步發展提供參考。

1 氯霉素的應用與危害

氯霉素（CAP）為白色或微帶黃綠色的結晶性粉末，味極苦，易溶于甲醇、丙酮等有機溶劑，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽桿菌、鏈球菌及衣原體等多種病原微生物。CAP因其對水產品病害的預防和治療都有良好的效果，且價格低廉，在20世紀80年開始被廣泛應用于水產品的養殖和加工中。

CAP在水產品中代謝慢，殘留時間長，會通過食物鏈的富集作用對人體構成危害。曹巧玲等人認為，CAP可導致人體骨髓造血功能紊亂、胃腸道不適、嬰兒灰嬰綜合征等多種不良反應。CAP不僅對人體有副作用，對動植物也有不同程度的影響。因此，許多國家制訂了動物源性食品中CAP的使用限量和檢出標準，我國也規定其在水產品中禁止使用。

2 水產品氯霉素快速檢測概況

目前，水產品中CAP常用的檢測方法有酶聯免疫法、膠體金免疫層析法和色譜分析法等。色譜分析法靈敏度高、準確性好，但是前處理過程復雜，且儀器設備成本較高，不易普及，也不適合日常的監管工作。酶聯免疫法和膠體金免疫層析法操作簡單、用時較短，但易出現假陽性，可用于大批量樣品的初篩工作。張曉輝等人的研究結果表明，膠體金免疫層析法比酶聯免疫法操作更簡便、使用更快捷、價格更經濟，適于現場篩選工作。膠體金試紙條是在膠體金免疫層析技術基礎上研制而成的，其便于攜帶，操作時間短，可在現場經肉眼判斷得到檢測結果。

我國水產行業規模越來越大，但分布較為零散，難以集中管理，而水產品中的CPA并不能通過肉眼辨別出來，檢測程序繁雜，給基層監管人員帶來大量的工作。如果先用膠體金試紙條在現場進行快速初篩，然后將疑似樣品通過色譜技術進行進一步檢測，可以大大縮短檢測周期，提高工作效率，更加及時有效地進行監管工作。

3 膠體金試紙條快速檢測技術

3.1 膠體金試紙條快速檢測技術的原理

膠體金試紙條是采用膠體金標記技術，以膠體金作為示蹤物，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。若樣品溶液中含有CAP（抗原物質），則CAP與金標抗體相結合，進而封閉金標抗體上CAP的抗原結合點，阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，使T線顯色較弱、甚至不顯色，結果為陽性；若樣品溶液中沒有CAP，則不能阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，從而T線顯色較強，呈紅褐色，結果為陰性。具體如圖1所示。

3.2 膠體金試紙條快速檢測技術的應用

膠體金試紙條具有快速、簡便、安全、適用于現場篩選和快速檢測工作等優點。張曉輝等人的研究結果表明，采用膠體金試紙條快速檢測法，可在5～10 min可測得蝦中殘留的CAP，檢測限為1.000 μg/kg，與酶聯免疫法進行比較，檢測結果總符合率為92.5%，說明該法特異性強、重復性好，適于現場檢測。肖治理等人采用檸檬酸鈉還原法制備膠體金，可在5～8 min完成CPA檢測，方法穩定，檢測限為2 ng/mL，檢測結果肉眼可判斷。但是，膠體金試紙條用于水產品快速檢測的時日尚短，需要進一步觀察和完善，而且目前市面上的膠體金試紙條快速檢測產品品種繁多、質量參差不齊。劉歡等人研究報道，國內市面上銷售的4種膠體金試紙條快速檢測產品，僅有1種產品能100%準確地檢測出68個樣品中是否殘留CAP，有1種產品的假陽性率達35%，2種產品的最低檢測濃度值與商標標識最低檢出限不相符。所以，在使用膠體金試紙條快速檢測產品前，應該先進行產品信息驗證，確保該產品符合標準后方能用于批量樣品檢測工作。

參考文獻

[1] 肖樂.氯霉素風波[J].中國水產，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，蘇德森，等.高效液相色譜法測定對蝦中五種磺胺類藥物殘留[J].現代科學儀器，2005（1）：70-72.

[3] 湯軼偉，勵建榮，孟良玉.水產品中氯霉素藥物殘留檢測方法研究進展[J].食品科學，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，楊凱，吳澤新，等.氯霉素的毒性作用和檢測方法研究進展[J].職業與健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 劉曦薇，吳玲玲.氯霉素對斑馬魚早期發育的毒性效應[J].環境科學學報，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 呂順，錢鑫萍，范遠景，等.氯霉素細胞毒性研究[J].安徽農業科學，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 張曉輝，李余動，孔蕾，等.ELISA和GICA快速檢測水產品中氯霉素殘留的比較[J].浙江農業學報，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素膠體金免疫層析快速檢測試紙條的研制[J].食品與機械，2013，29（4）：54-62.

[9] 劉歡，孫偉紅，馬兵，等.水產品中氯霉素殘留快速檢測產品的質量分析和評價[J].中國漁業質量與標準，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection

摘要：水產品中氯霉素殘留會通過食物鏈富集作用對人體健康構成危害，建立快速、簡便、有效的檢測技術十分必要。膠體金試紙條快速檢測技術操作簡單，檢測時間短，攜帶方便，價格經濟。對膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，為水產品氯霉素殘留快速檢測發展提供技術依據。

關鍵詞：水產品；氯霉素；膠體金試紙條；快速檢測

中圖分類號：TS207.3 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2014）04-0087-02

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）作為廣譜抗生素，于2002年被禁止在我國水產品的養殖、保鮮、加工和運輸等生產環節中使用，美國、歐盟等國家也嚴格規定水產品中氯霉素不得檢出（檢出限為1 μg/kg）。藥物殘留問題給我國水產品出口貿易帶來巨大影響。同時，近年來食品安全已成為我國百姓最關心的話題之一，隨著水產品消費量的日益增長，其質量安全問題也受到廣泛關注。因此，建立簡便、快速、有效的檢測技術十分必要。本文對氯霉素膠體金試紙條快速檢測技術進行探討，以期為快速檢測技術的進一步發展提供參考。

1 氯霉素的應用與危害

氯霉素（CAP）為白色或微帶黃綠色的結晶性粉末，味極苦，易溶于甲醇、丙酮等有機溶劑，微溶于水。CAP能有效抑制炭疽桿菌、鏈球菌及衣原體等多種病原微生物。CAP因其對水產品病害的預防和治療都有良好的效果，且價格低廉，在20世紀80年開始被廣泛應用于水產品的養殖和加工中。

CAP在水產品中代謝慢，殘留時間長，會通過食物鏈的富集作用對人體構成危害。曹巧玲等人認為，CAP可導致人體骨髓造血功能紊亂、胃腸道不適、嬰兒灰嬰綜合征等多種不良反應。CAP不僅對人體有副作用，對動植物也有不同程度的影響。因此，許多國家制訂了動物源性食品中CAP的使用限量和檢出標準，我國也規定其在水產品中禁止使用。

2 水產品氯霉素快速檢測概況

目前，水產品中CAP常用的檢測方法有酶聯免疫法、膠體金免疫層析法和色譜分析法等。色譜分析法靈敏度高、準確性好，但是前處理過程復雜，且儀器設備成本較高，不易普及，也不適合日常的監管工作。酶聯免疫法和膠體金免疫層析法操作簡單、用時較短，但易出現假陽性，可用于大批量樣品的初篩工作。張曉輝等人的研究結果表明，膠體金免疫層析法比酶聯免疫法操作更簡便、使用更快捷、價格更經濟，適于現場篩選工作。膠體金試紙條是在膠體金免疫層析技術基礎上研制而成的，其便于攜帶，操作時間短，可在現場經肉眼判斷得到檢測結果。

我國水產行業規模越來越大，但分布較為零散，難以集中管理，而水產品中的CPA并不能通過肉眼辨別出來，檢測程序繁雜，給基層監管人員帶來大量的工作。如果先用膠體金試紙條在現場進行快速初篩，然后將疑似樣品通過色譜技術進行進一步檢測，可以大大縮短檢測周期，提高工作效率，更加及時有效地進行監管工作。

3 膠體金試紙條快速檢測技術

3.1 膠體金試紙條快速檢測技術的原理

膠體金試紙條是采用膠體金標記技術，以膠體金作為示蹤物，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。若樣品溶液中含有CAP（抗原物質），則CAP與金標抗體相結合，進而封閉金標抗體上CAP的抗原結合點，阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，使T線顯色較弱、甚至不顯色，結果為陽性；若樣品溶液中沒有CAP，則不能阻止金標抗體與纖維素膜上的CAP偶聯物結合，從而T線顯色較強，呈紅褐色，結果為陰性。具體如圖1所示。

3.2 膠體金試紙條快速檢測技術的應用

膠體金試紙條具有快速、簡便、安全、適用于現場篩選和快速檢測工作等優點。張曉輝等人的研究結果表明，采用膠體金試紙條快速檢測法，可在5～10 min可測得蝦中殘留的CAP，檢測限為1.000 μg/kg，與酶聯免疫法進行比較，檢測結果總符合率為92.5%，說明該法特異性強、重復性好，適于現場檢測。肖治理等人采用檸檬酸鈉還原法制備膠體金，可在5～8 min完成CPA檢測，方法穩定，檢測限為2 ng/mL，檢測結果肉眼可判斷。但是，膠體金試紙條用于水產品快速檢測的時日尚短，需要進一步觀察和完善，而且目前市面上的膠體金試紙條快速檢測產品品種繁多、質量參差不齊。劉歡等人研究報道，國內市面上銷售的4種膠體金試紙條快速檢測產品，僅有1種產品能100%準確地檢測出68個樣品中是否殘留CAP，有1種產品的假陽性率達35%，2種產品的最低檢測濃度值與商標標識最低檢出限不相符。所以，在使用膠體金試紙條快速檢測產品前，應該先進行產品信息驗證，確保該產品符合標準后方能用于批量樣品檢測工作。

參考文獻

[1] 肖樂.氯霉素風波[J].中國水產，2002（7）：12-17.

[2] 郭根和，潘葳，蘇德森，等.高效液相色譜法測定對蝦中五種磺胺類藥物殘留[J].現代科學儀器，2005（1）：70-72.

[3] 湯軼偉，勵建榮，孟良玉.水產品中氯霉素藥物殘留檢測方法研究進展[J].食品科學，2013，34（11）：333-337.

[4] 曹巧玲，楊凱，吳澤新，等.氯霉素的毒性作用和檢測方法研究進展[J].職業與健康，2013，29（16）：2 095-2 097.

[5] 劉曦薇，吳玲玲.氯霉素對斑馬魚早期發育的毒性效應[J].環境科學學報，2010，30（8）：1 649-1 657.

[6] 呂順，錢鑫萍，范遠景，等.氯霉素細胞毒性研究[J].安徽農業科學，2008，36（20）：8 472-8 474.

[7] 張曉輝，李余動，孔蕾，等.ELISA和GICA快速檢測水產品中氯霉素殘留的比較[J].浙江農業學報，2005，17（4）：216-218.

[8] 肖治理，曾文亮，王弘，等.氯霉素膠體金免疫層析快速檢測試紙條的研制[J].食品與機械，2013，29（4）：54-62.

[9] 劉歡，孫偉紅，馬兵，等.水產品中氯霉素殘留快速檢測產品的質量分析和評價[J].中國漁業質量與標準，2012，2（3）：55-61.

Abstract： Chloramphenicol residues in aquatic products affect human health through enrichment of the food chain， so a rapid， simple， and effective technology is necessary. Colloidal gold test strip is a testing technology with such advantages as easy operation， short detection time， being convenient to carry and favorite price. In this paper， the colloidal gold test strip for rapid detection technology is discussed to provide the technical basis for the development of rapid detection of chloramphenicol residues in aquatic products.

Key words： aquatic products； chloramphenicol； colloidal gold test strip； rapid detection