血培養(yǎng)分離菌的菌譜特征及耐藥性分析

李玉梅 安宏志

1.遼寧省朝陽市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧朝陽 122000；2.遼寧省朝陽市衛(wèi)生學(xué)校，遼寧朝陽 122000

血培養(yǎng)是臨床實(shí)驗(yàn)室最主要的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，臨床幾乎所有的發(fā)熱性疾病，如多種細(xì)菌性傳染病、肺炎、腦膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、腹膜癥、產(chǎn)后膿毒血癥、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎以及發(fā)熱待查等，均可能因細(xì)菌進(jìn)入血液而引起菌血癥、敗血癥，每年因此而導(dǎo)致死亡率高達(dá)30%～50%。目前，由于各類侵入性治療，抗菌藥物的廣泛應(yīng)用等，給臨床治療帶來很大困難[1]。血液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)是診斷菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn)。為了解該院血培養(yǎng)陽性標(biāo)本中的菌譜分布情況和細(xì)菌耐藥情況，以指導(dǎo)臨床合理用藥，現(xiàn)就該院2012—2013年間住院患者血培養(yǎng)陽性細(xì)菌的分布及耐藥情況做分析和總結(jié)，以便更好的指導(dǎo)臨床合理選擇抗菌藥物，報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

該院2012—2013年門診及住院患者送檢的血培養(yǎng)共計2 370例，分離出細(xì)菌共291 株，陽性率為12.28%。

1.2 儀器與試劑

Bact/Alert120 全自動血培養(yǎng)儀及配套的標(biāo)準(zhǔn)成人活性炭需氧培養(yǎng)瓶和厭氧培養(yǎng)瓶及兒童瓶；ATB-NEW 法國梅里埃半自動細(xì)菌鑒定及藥敏分析儀，鑒定和藥敏板條均為法國梅里埃公司產(chǎn)品；血平板等培養(yǎng)基為溫州康泰生物有限公司。

1.3 菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)

血培養(yǎng)儀報陽性的培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)種至血平板和巧克力平板，18～24 h 后純化、鑒定、藥敏，結(jié)果傳至lis。質(zhì)控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC29213、銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922 均購自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.4 細(xì)菌耐藥性統(tǒng)計分析

采用WHONET5.6 軟件進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌檢出率及構(gòu)成比

2 370 份血培養(yǎng)標(biāo)本共分離到細(xì)菌291 株，陽性率為12.28%。其中，革蘭陽性菌占71.1%,革蘭陰性菌占23%,真菌占1%，其他占5%。見表1。

表1 分離出的細(xì)菌種類及株數(shù)

2.2 細(xì)菌的耐藥率

凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、腸球菌對萬古霉素100%敏感，沒有耐藥菌株產(chǎn)生；其中MRSA 占62%，MRCNS 占45%；見表2。該次統(tǒng)計中，前四位革蘭陰性桿菌對臨床常用抗生素耐藥率見表3。其中，大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs 菌株有14 株，占50.0%，肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs 菌株有7 株，占35.0%。大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯菌，超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的產(chǎn)生很大程度上是由于β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物長期廣泛應(yīng)用而引起的[2]。產(chǎn)酶株比非產(chǎn)酶株的耐藥性明顯增強(qiáng)[3],可供選用的藥物減少。較敏感的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭孢菌素(頭孢吡肟)以及某些喹諾酮類和氨基糖苷類抗生素。以銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌為代表的非發(fā)酵菌,以及糞腸球菌和真菌也占有一定比例，這與文獻(xiàn)[4]報道基本一致。因檢測菌株數(shù)量較少，未做藥敏分析。

表2 主要革蘭氏陽性球菌對臨床常用抗生素的耐藥率(%)

從表2 和表3 中可以看出，對G-桿菌較敏的藥物是阿米卡星、亞胺培南、美羅培南、頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦，對G+球菌敏感的藥物是呋喃妥因、米諾環(huán)素、萬古霉素、利福平。細(xì)菌對青霉素、紅霉素、氨芐西林、替卡西林表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性。

表3 主要革蘭氏陰性桿菌對臨床常用抗生素的耐藥率(%)

3 討論

該院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室自2012年開始，推薦臨床采集血培養(yǎng)標(biāo)本的最佳方案是雙瓶雙側(cè)或不同部位采集2～3 套（需氧、厭氧各一瓶為一套）；成年每次采血量為10～20 mL，兒童采集3～5 mL，嬰幼兒為1～2 mL。采集的20 mL 血液分別注入兩個瓶內(nèi)，先分配在需氧瓶10 mL，然后剩余的入?yún)捬跗績?nèi)（10 mL）。2012—2013 兩年中，共收集到2 370 份血培養(yǎng)標(biāo)本，共分離到細(xì)菌291株，陽性率為12.28%。與文獻(xiàn)報道的基本一致[5]。統(tǒng)計中發(fā)現(xiàn)，凝固酶陰性葡萄球菌占52.5%。有資料顯示，血培養(yǎng)中凝固酶陰性葡萄球菌被認(rèn)為污染或可疑的比例可達(dá)44.1%[6]。如果由于某個環(huán)節(jié)污染而造成的假陽性，不僅貽誤治診斷和治療，而且增加患者的住院時間和費(fèi)用[7]。影響血培養(yǎng)結(jié)果的因素有很多[8]，采集樣本的時間、部位、標(biāo)本量、污染、采集樣本次數(shù)、樣本的運(yùn)送、樣本的儲存及患者用藥情況、培養(yǎng)基與檢驗(yàn)方法的選擇等都有關(guān)系，因此應(yīng)嚴(yán)格把握每種因素的最佳條件以提高血培養(yǎng)標(biāo)本的送檢率、合格率及陽性分離率。為此，該院微生物室制定標(biāo)本采集手冊下發(fā)臨床，定期多次通過醫(yī)務(wù)科組織繼續(xù)教育，對臨床醫(yī)生護(hù)士進(jìn)行血培養(yǎng)相關(guān)知識的培訓(xùn)；同時，做好室內(nèi)質(zhì)控，及時與臨床溝通，綜合判斷，得到最可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，更好地為患者服務(wù)。

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