翹嘴鱖?斑鱖雜交子代F1及其自交子代F2胚胎發育的研究及鑒定

袁勇超+梁旭方+田昌緒+嚴偉+蔡文靜+竇亞琪+易提林

摘要：利用人工催產、人工授精的方法獲得翹嘴鱖（Siniperca chuatsi） （♀）×斑鱖 （Siniperca scherzeri）（♂）雜交子代F1及F1 的自交子代F2，并對翹嘴鱖、斑鱖及其雜交后代F1和F1自交后代F2的胚胎和胚后發育進行了初步觀察與比較，并采用SSR分子標記方法對翹嘴鱖、斑鱖及其正交子代F1進行了分子鑒定。結果表明，翹嘴鱖卵徑為（1.09±0.05） mm，正交F1雌魚卵徑為（1.26±0.05）mm、F2卵徑（1.19±0.04） mm，顯著小于斑鱖的卵徑（1.83±0.09） mm （P< 0.05）。翹嘴鱖受精卵在水溫23.4～25.1 ℃經過46 h孵化破膜，F1受精卵在水溫23.1～24.8 ℃經過49 h 孵化破膜，F2受精卵在22.6～24.5 ℃經過51 h孵化破膜，斑鱖受精卵在水溫 23.5～25.7 ℃經過107 h孵化破膜。翹嘴鱖、斑鱖、F1和F2初孵仔魚大小分別為（4.06±0.50） mm、（4.58±0.30） mm、（4.21±0.30） mm和（4.14±0.20） mm。采用SSR分子標記方法，根據DNA帶型的不同可以成功鑒別出翹嘴鱖、斑鱖及其雜交子F1。

關鍵詞：翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）;斑鱖（Siniperca scherzeri）;雜交;微衛星;鑒定

中圖分類號：S917.4 ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ?文章編號：0439-8114（2014）20-4920-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.20.039

Identification of Embryonic Development Hybrids F1 of Siniperca chuatsi （♀） × Siniperca schezeri （♂） and Its F2

YUAN Yong-chao1， LIANG Xu-fang1，TIAN Chang-xu2，YAN Wei2， CAI Wen-jing2，DOU Ya-qi1，YI Ti-lin1

（1.College of Fisheries/Key Lab of Freshwater Animal Breeding，Ministry of Agriculture/Freshwater Aquaculture Collaborative Innovation

Center of Hubei Province， Huazhong Agricultural University， Wuhan 430070， China;

2.Hubei Academy of Agricultural Sciences， Wuhan 430064， China）

Abstract： Embryonic and post-embryonic developments were observed and compared in mandarinfish Siniperca chuatsi， spotted mandarinfish Siniperca schezeri and its hybrids F1 and F2 induced to spawn and artificially fertilized at room temperature. The embryonic development of hybrids of Siniperca chuatsi × spotted mandarinfish Siniperca schezeri and their hybrids F1 and F2 were described and compared with each other and their parents. The results showed that in diameter the ?eggs of spotted mandarin fish （1.83±0.09） mm were larger than that of the hybrids F1 [（S. chuatsi （♀） × S. schezeri （♂）] （1.26±0.05） mm， hybrids F2 （1.19±0.04）mm and the mandarin fish （1.09±0.05）mm. The embryos of the mandarin fish， F1 and F2 were hatched in about 46 h at 23.4～25.1 ℃， 49 h at 23.1～24.8 ℃， 51 h at 22.6～24.5 ℃ while the embryos of the spotted mandarinfish were hatched in about 107 h at 23.5～25.7 ℃. Newly hatched mandarin fish， spotted mandarin fish， F1 and F2 larvae were （4.06±0.50） mm， （4.58±0.30） mm， （4.21±0.30） mm， and （4.14±0.20） mm in length， respectively. It is indicated that SSR markers can discriminate well mandarin fish， spotted mandarin fish， and its hybrids.

Key words： Siniperca chuatsi; Siniperca schezeri; hybrid; microsatellite; identification

翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）和斑鱖（Siniperca scherzeri）同隸屬于鱸形目鱖亞科鱖屬。翹嘴鱖和斑鱖肉味鮮美、營養豐富，是我國傳統的淡水養殖名貴魚類。翹嘴鱖生長速度快，容易發生病害[1，2]，制約了翹嘴鱖養殖業的發展。自1994年以來，廣東省每年鱖暴發性流行病發病率達60%，死亡率為20%～30%。斑鱖是珠江流域的經濟魚類[3]，其肉質鮮美、病害少，但其個體較小，生長速度慢。雜交不僅能豐富遺傳結構，還能使親本的優良性狀得到結合，提高雜交后代的生長性能[4]。翹嘴鱖和斑鱖的生物學特性和人工繁殖均有報道[5-9]，研究表明雜交鱖能遺傳親本的某些優良生長性狀[10-13]。翹嘴鱖和斑鱖的雜交子代能夠表現出較好的養殖性能及生長性能。翹嘴鱖、斑鱖和雜交子代形態相似，在育種過程中特別是育苗階段和親本選擇階段，傳統的形態學鑒別方法很難準確地辨別純種和雜交種，因此容易造成種質混雜。

微衛星又稱簡單重復序列，均勻分布于真核生物基因組中，由2～6個核苷酸的串聯重復片段構成，具有等位基因數目多、重復性好、共顯性遺傳等特點，被廣泛應用于物種鑒定和基因定位等研究。本研究中對翹嘴鱖和斑鱖的正交子代F1，F1自交子代F2的胚胎發育及胚后發育進行了觀察，并對翹嘴鱖、斑鱖及其雜交子代進行了分子鑒定，解決了水產養殖中雜交鱖（翹嘴鱖和斑鱖的雜交子一代）鑒定難和種質混雜的問題，以期為鱖魚及其雜交子代的鑒別提供科學依據。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

試驗用翹嘴鱖、翹嘴鱖幼體和斑鱖性成熟個體購自于麻城市中和水產開發有限公司漁場和遼寧省遼陽市遼陽縣興大養殖場。

試驗于2011年6月和2013年5月在麻城市中和水產開發有限公司漁場進行。正交子代[S. chuatsi（♀）× S. scherzeri（♂）]為不同野生親本的人工繁殖子一代，均分批采自麻城市中和水產開發有限公司漁場。

1.2 ?人工催產

在2011年和2013年繁殖季節，通過外源藥物誘導，對翹嘴鱖和斑鱖親魚及其雜交子代F1親本進行人工催產及人工授精，獲得質量較好的受精卵。

1.3 ?胚胎發育觀察

對翹嘴鱖和斑鱖胚胎及其雜交子代F1和F1自交子代F2的胚胎發育進行觀察，每隔2 h測量1次水溫;對翹嘴鱖和斑鱖及其雜交子代F1和F1自交子代F2孵出的仔魚進行胚后發育觀察，仔魚孵出初期，每隔4 h觀察1次，每次隨機抽取10尾魚。中后期根據發育情況逐漸延長取樣時間間隔，以50%個體出現新特征作為劃分發育時期的標準，直至8日齡。

1.4 ?基因組DNA的提取

33尾鱖魚（翹嘴鱖親本11尾，斑鱖親本10尾，翹嘴鱖和斑鱖的正交子代F1 12尾）從麻城市中和水產開發有限公司漁場采得。部分樣本剪少量新鮮尾鰭條，保存于95%乙醇中。利用DNA提取試劑盒從鰭條組織提取基因組DNA，并用紫外分光光度計檢測DNA濃度。

1.5 ?SSR分析

以提取的待測樣品基因組DNA為模板，采用聚合酶鏈式反應（PCR）擴增出DNA目的片段，用于PCR擴增反應的一對微衛星引物序列為：上游引物：5′-ATGTAACCGTAAGTGACCTC-3′;下游引物：5′-TGTTGTTCAGACGATGACGA-3′。

PCR反應體系為10×PCR Buffer 2.5 μL， 25 mmol/L MgCl2 2.5 μL，1.0 mmol/L dNTPs 2.5 μL，上、下游引物各2.0 μL，模板DNA 50～100 ng，Taq DNA聚合酶（5 U/μL ）0.2 μL ，補ddH2O至25 μL。PCR反應程序為94 ℃預變性4 min;94 ℃變性30 s，55 ℃退火45 s，72 ℃延伸1 min，35個循環;72 ℃延伸10 min，反應結束后于4 ℃中保存。將PCR產物以8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠進行電泳分離，常規銀染法染色后，拍照記錄電泳結果。

2 ?結果與分析

2.1 ?翹嘴鱖、斑鱖及雜交子代F1胚胎發育

以翹嘴鱖為母本，斑鱖為父本的正交子代F1及F1自交子代F2魚卵均為非黏性卵，呈淡黃色且透明，在流水中呈漂浮性。受精卵大多數具有1個大油球，有些卵具有數個油球，最多達8個。正交子代F1卵子直徑為（1.26±0.05） mm;F1自交子代F2卵子直徑為（1.19±0. 04） mm;翹嘴鱖卵子直徑為（1.09±0.05） mm;斑鱖卵子直徑為（1.83±0.09） mm。

2.2 ?翹嘴鱖、斑鱖及雜交子代F1的仔魚形態特征

以翹嘴鱖為母本，斑鱖為父本的正交子代F1剛孵出的仔魚卵黃囊較大，全身透明，可清晰見到血液流動。正交子代F1剛孵出的仔魚全長為 （4.21±0.30） mm;F1自交子代F2剛孵出的仔魚全長為（4.14±0.20） mm;翹嘴鱖剛孵出的仔魚全長為 （4.06±0.05） mm;斑鱖剛孵出的仔魚全長為 （4.58±0.30） mm。翹嘴鱖、斑鱖及其交雜交子代F1胚后發育形態特征見表1。

2.3 ?翹嘴鱖、斑鱖及其雜交子代F1的SSR帶譜

采用SSR分子標記方法來鑒別翹嘴鱖、斑鱖及其正交子代F1（圖1）。翹嘴鱖、斑鱖及其雜交子代F1擴增出3種不同的DNA帶型：第一種帶型為翹嘴鱖，在105 bp處擴增出1條特異性DNA條帶;第二種帶型為雜交子代F1，在105 bp和120 bp處各擴增出1條特異性DNA條帶;第三種帶型為斑鱖，在120 bp處擴增出1條特異性DNA條帶。根據DNA帶型的不同即可鑒別出翹嘴鱖、斑鱖及其雜交子代F1。

3 ?小結與討論

本研究中，正交子代F1胚胎發育時序特征與翹嘴鱖基本相同，在水溫為23.1～24.8 ℃下，胚胎發育約需經過49 h。F1自交子代F2受精卵在22.6～24.5 ℃經過51 h。這與其他鱖類研究結果基本相似，如翹嘴鱖胚胎半數孵化需時34 h （ 27.2 ℃）[5]; 鴨綠江斑鱖受精后60 h到心跳期，孵化需時約144 h （ 22.2～25. 2 ℃）[14]; 碧流河水庫斑鱖受精后44 h到心跳期，孵化需時約146 h（ 19.0～23.5 ℃）[15]。然而斑鱖與翹嘴鱖雖然同為鱖屬，但其胚胎發育時序卻不相同。

研究表明，雜種后代的性狀一般偏向于母本，即母本對后代基因有較大的影響力。本研究中在外部條件基本相同的情況下，以翹嘴鱖為母本的雜交鱖胚胎發育時序均以母本為基準，說明卵細胞在胚胎發育過程中對胚胎發育時序、胚胎大小起到了決定性的作用，這可能是卵細胞中的細胞質對生物遺傳性狀有明顯的母性遺傳作用的原因。由此可見，在自然選擇和人工選擇的共同作用下，雙親對后代群體的遺傳貢獻是不均等的[16]。宓國強等[11]利用傳統形態學和框架分析法分析，發現翹嘴鱖和斑鱖的雜交子代的形態性狀偏向母本;三角魴（Megalobrama terminalis）和團頭魴（M. amblycephala）的正、反交雜交后代形態性狀也存在一定的母性效應[17]。虹鱒Oncorhynchus mykiss（♀）×山女鱒Oncorhynchus masou（♂）雜交F1受精卵與母本的胚胎發育積溫相當[18]。牙鲆Paralichthys olivaceus（♀）×圓斑星鰈Verasper variegatus（♂）雜交胚胎的發育過程也與母本相似[19]。

SSR分子標記由于具有高度多態性、共顯性的孟德爾遺傳方式以及數目巨大且隨機分布的特點，被廣泛應用到性狀分析、群體遺傳分析、進化和種質鑒定等研究中[20]。在利用SSR分子標記進行種質鑒定方面，Jenneckens等[21]用湖鱘LS39引物擴增10種鱘微衛星位點，該位點在閃光鱘上獨有且僅有1個110 bp的等位基因，從而與其他9種鱘區分開。Beacham等[22]應用13個微衛星位點區分了環太平洋區不同區域種群的大麻哈魚（Oncorhynchus tshawytscha）。微衛星是以1～6個核苷酸為基本重復單元的串聯重復序列，其本身重復單元數的變異是物種具有遺傳多態性的基礎[23]。對于個體而言，某一微衛星位點的等位基因數是和該生物的染色體倍性相關的。一般地，對于一個普通二倍體生物個體，由于引物是針對特異的微衛星位點設計的，因而每對引物在雜合個體中只能擴增出2條目的條帶，在純合個體中只能擴增1條目的條帶[24]。

參考文獻：

[1] 黃志堅，何建國.鱖魚疾病的研究概括[J].水產科技情報，1999，26（6）：268-271.

[2] 陳昌福，曾妍雄.患細菌性敗血病的翹嘴鱖血清中蛋白質成分的變化[J].華中農業大學學報，2000，19（5）：481-482.

[3] 吳會民，林文輝，吳淑勤，等.鱖養殖池塘底泥脫氫酶活性測定方法的研究[J].大連水產學院學報，2007，22（4）：311-314.

[4] 羅仙池，徐田祥，吳振興，等.鱖魚的胚胎、仔稚魚發育觀察[J].水產科技情報，1992，19（6）：165-168.

[9] 樓允東.魚類育種學[M].北京：中國農業出版社，2001.40-107.

[5] 鄭閩泉，丁桂枝，黃涵生，等.鱖魚胚胎發育的觀察[J].江西水產科技，1994（3）：21-24.

[6] 曾可為，王青云，高銀愛，等.斑鱖的生物學及其繁殖生物學的研究[J].內陸水產，2005（2）：27-29.

[7] 何利君.溫度對鱖魚胚胎發育的影響[J].四川畜牧獸醫學院學報，1999，13（4）：19-22，28.

[8]周才武.鱖亞科魚類的分類整理和地理分布[J].動物學研究，1988，99（2）：113-125.

[10] 趙 ?建，朱新平，陳永樂，等.翹嘴鱖、斑鱖及其雜交種形態差異分析[J].華中農業大學學報，2008，27（4）：506-509.

[11] 宓國強，趙金良，賈永義，等.鱖（♀）×斑鱖（♂）雜種F1的形態特征與微衛星分析[J].上海海洋大學學報，2010，19（2）：145-150.

[12] 宓國強，陳建明，練青平.雜交鱖與鱖魚、斑鱖肌肉營養成分和氨基酸含量比較[J].水產養殖，2009，30（4）：35-37.

[13] 宓國強，練青平，王雨辰，等.雜交鱖胚胎發育觀察[J].浙江海洋學院學報（自然科學版），2009，28（3）：264-269.

[14] 王 ?丹，李文寬，閆有利，等.鴨綠江斑鱖胚胎及胚后發育觀察[J].大連水產學院學報，2007，22（6）：415-420.

[15] 吳立新，鄒 ?波.碧流河水庫斑鱖胚胎發育的形態觀察[J].水產科學，1993，12（9）：5-8.

[16] 楊 ?寧，吳常信.親本對后代群體的不均等遺傳貢獻及其優化控制[J].遺傳學報，1993，20（1）：294-299.

[17] 楊懷宇，李思發，鄒曙明.三角魴和團頭魴正反交F1的遺傳性狀[J].上海水產大學學報，2002，11（4）：305-309.

[18] 陳術強，張玉勇，賈智英，等.虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：757-762.

[19] 李 ?竹，張全啟，齊 ?潔，等.牙鲆（♀）×圓斑星鰈（♂）雜交子代的胚胎及仔魚發育[J].中國水產科學，2006，13（5）：732-739.

[20] 孫效文，張曉鋒，趙瑩瑩，等.水產生物微衛星標記技術研究進展及其應用[J].中國水產科學，2008，15（4）：689-703.

[21] JENNECKENS I， MEYER J N， SCHWARK G H， et al. A fixed allele at microsatellite locus LS-39 exhibiting species-specificity for the black caviarproducer Acipenserstellatus [J]. J Appl Ichthyol， 2001， 17： 39-42.

[22] BEACHAM T D， CANDY J R， JONSEN K L， et al. Estimation of stock composition and individual identification of chinook salmon across the Pacific rim by use of microsatellite variation [J]. Trans Am Fish Soc， 2006， 135： 861-888.

[23] 宋國華，劉田福.微衛星標記及其在實驗動物中的應用[J].中國比較醫學雜志，2005，15（4）：244-248.

[24] CROOIJMANS R P M A， BIERBOOMS V A F， KOMEN J， et al. Microsatellite markers in common carp （Cyprinus carpio L.） [J]. Anim Genet， 1997， 28： 129-134.

3 ?小結與討論

本研究中，正交子代F1胚胎發育時序特征與翹嘴鱖基本相同，在水溫為23.1～24.8 ℃下，胚胎發育約需經過49 h。F1自交子代F2受精卵在22.6～24.5 ℃經過51 h。這與其他鱖類研究結果基本相似，如翹嘴鱖胚胎半數孵化需時34 h （ 27.2 ℃）[5]; 鴨綠江斑鱖受精后60 h到心跳期，孵化需時約144 h （ 22.2～25. 2 ℃）[14]; 碧流河水庫斑鱖受精后44 h到心跳期，孵化需時約146 h（ 19.0～23.5 ℃）[15]。然而斑鱖與翹嘴鱖雖然同為鱖屬，但其胚胎發育時序卻不相同。

研究表明，雜種后代的性狀一般偏向于母本，即母本對后代基因有較大的影響力。本研究中在外部條件基本相同的情況下，以翹嘴鱖為母本的雜交鱖胚胎發育時序均以母本為基準，說明卵細胞在胚胎發育過程中對胚胎發育時序、胚胎大小起到了決定性的作用，這可能是卵細胞中的細胞質對生物遺傳性狀有明顯的母性遺傳作用的原因。由此可見，在自然選擇和人工選擇的共同作用下，雙親對后代群體的遺傳貢獻是不均等的[16]。宓國強等[11]利用傳統形態學和框架分析法分析，發現翹嘴鱖和斑鱖的雜交子代的形態性狀偏向母本;三角魴（Megalobrama terminalis）和團頭魴（M. amblycephala）的正、反交雜交后代形態性狀也存在一定的母性效應[17]。虹鱒Oncorhynchus mykiss（♀）×山女鱒Oncorhynchus masou（♂）雜交F1受精卵與母本的胚胎發育積溫相當[18]。牙鲆Paralichthys olivaceus（♀）×圓斑星鰈Verasper variegatus（♂）雜交胚胎的發育過程也與母本相似[19]。

SSR分子標記由于具有高度多態性、共顯性的孟德爾遺傳方式以及數目巨大且隨機分布的特點，被廣泛應用到性狀分析、群體遺傳分析、進化和種質鑒定等研究中[20]。在利用SSR分子標記進行種質鑒定方面，Jenneckens等[21]用湖鱘LS39引物擴增10種鱘微衛星位點，該位點在閃光鱘上獨有且僅有1個110 bp的等位基因，從而與其他9種鱘區分開。Beacham等[22]應用13個微衛星位點區分了環太平洋區不同區域種群的大麻哈魚（Oncorhynchus tshawytscha）。微衛星是以1～6個核苷酸為基本重復單元的串聯重復序列，其本身重復單元數的變異是物種具有遺傳多態性的基礎[23]。對于個體而言，某一微衛星位點的等位基因數是和該生物的染色體倍性相關的。一般地，對于一個普通二倍體生物個體，由于引物是針對特異的微衛星位點設計的，因而每對引物在雜合個體中只能擴增出2條目的條帶，在純合個體中只能擴增1條目的條帶[24]。

參考文獻：

[1] 黃志堅，何建國.鱖魚疾病的研究概括[J].水產科技情報，1999，26（6）：268-271.

[2] 陳昌福，曾妍雄.患細菌性敗血病的翹嘴鱖血清中蛋白質成分的變化[J].華中農業大學學報，2000，19（5）：481-482.

[3] 吳會民，林文輝，吳淑勤，等.鱖養殖池塘底泥脫氫酶活性測定方法的研究[J].大連水產學院學報，2007，22（4）：311-314.

[4] 羅仙池，徐田祥，吳振興，等.鱖魚的胚胎、仔稚魚發育觀察[J].水產科技情報，1992，19（6）：165-168.

[9] 樓允東.魚類育種學[M].北京：中國農業出版社，2001.40-107.

[5] 鄭閩泉，丁桂枝，黃涵生，等.鱖魚胚胎發育的觀察[J].江西水產科技，1994（3）：21-24.

[6] 曾可為，王青云，高銀愛，等.斑鱖的生物學及其繁殖生物學的研究[J].內陸水產，2005（2）：27-29.

[7] 何利君.溫度對鱖魚胚胎發育的影響[J].四川畜牧獸醫學院學報，1999，13（4）：19-22，28.

[8]周才武.鱖亞科魚類的分類整理和地理分布[J].動物學研究，1988，99（2）：113-125.

[10] 趙 ?建，朱新平，陳永樂，等.翹嘴鱖、斑鱖及其雜交種形態差異分析[J].華中農業大學學報，2008，27（4）：506-509.

[11] 宓國強，趙金良，賈永義，等.鱖（♀）×斑鱖（♂）雜種F1的形態特征與微衛星分析[J].上海海洋大學學報，2010，19（2）：145-150.

[12] 宓國強，陳建明，練青平.雜交鱖與鱖魚、斑鱖肌肉營養成分和氨基酸含量比較[J].水產養殖，2009，30（4）：35-37.

[13] 宓國強，練青平，王雨辰，等.雜交鱖胚胎發育觀察[J].浙江海洋學院學報（自然科學版），2009，28（3）：264-269.

[14] 王 ?丹，李文寬，閆有利，等.鴨綠江斑鱖胚胎及胚后發育觀察[J].大連水產學院學報，2007，22（6）：415-420.

[15] 吳立新，鄒 ?波.碧流河水庫斑鱖胚胎發育的形態觀察[J].水產科學，1993，12（9）：5-8.

[16] 楊 ?寧，吳常信.親本對后代群體的不均等遺傳貢獻及其優化控制[J].遺傳學報，1993，20（1）：294-299.

[17] 楊懷宇，李思發，鄒曙明.三角魴和團頭魴正反交F1的遺傳性狀[J].上海水產大學學報，2002，11（4）：305-309.

[18] 陳術強，張玉勇，賈智英，等.虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：757-762.

[19] 李 ?竹，張全啟，齊 ?潔，等.牙鲆（♀）×圓斑星鰈（♂）雜交子代的胚胎及仔魚發育[J].中國水產科學，2006，13（5）：732-739.

[20] 孫效文，張曉鋒，趙瑩瑩，等.水產生物微衛星標記技術研究進展及其應用[J].中國水產科學，2008，15（4）：689-703.

[21] JENNECKENS I， MEYER J N， SCHWARK G H， et al. A fixed allele at microsatellite locus LS-39 exhibiting species-specificity for the black caviarproducer Acipenserstellatus [J]. J Appl Ichthyol， 2001， 17： 39-42.

[22] BEACHAM T D， CANDY J R， JONSEN K L， et al. Estimation of stock composition and individual identification of chinook salmon across the Pacific rim by use of microsatellite variation [J]. Trans Am Fish Soc， 2006， 135： 861-888.

[23] 宋國華，劉田福.微衛星標記及其在實驗動物中的應用[J].中國比較醫學雜志，2005，15（4）：244-248.

[24] CROOIJMANS R P M A， BIERBOOMS V A F， KOMEN J， et al. Microsatellite markers in common carp （Cyprinus carpio L.） [J]. Anim Genet， 1997， 28： 129-134.

3 ?小結與討論

本研究中，正交子代F1胚胎發育時序特征與翹嘴鱖基本相同，在水溫為23.1～24.8 ℃下，胚胎發育約需經過49 h。F1自交子代F2受精卵在22.6～24.5 ℃經過51 h。這與其他鱖類研究結果基本相似，如翹嘴鱖胚胎半數孵化需時34 h （ 27.2 ℃）[5]; 鴨綠江斑鱖受精后60 h到心跳期，孵化需時約144 h （ 22.2～25. 2 ℃）[14]; 碧流河水庫斑鱖受精后44 h到心跳期，孵化需時約146 h（ 19.0～23.5 ℃）[15]。然而斑鱖與翹嘴鱖雖然同為鱖屬，但其胚胎發育時序卻不相同。

研究表明，雜種后代的性狀一般偏向于母本，即母本對后代基因有較大的影響力。本研究中在外部條件基本相同的情況下，以翹嘴鱖為母本的雜交鱖胚胎發育時序均以母本為基準，說明卵細胞在胚胎發育過程中對胚胎發育時序、胚胎大小起到了決定性的作用，這可能是卵細胞中的細胞質對生物遺傳性狀有明顯的母性遺傳作用的原因。由此可見，在自然選擇和人工選擇的共同作用下，雙親對后代群體的遺傳貢獻是不均等的[16]。宓國強等[11]利用傳統形態學和框架分析法分析，發現翹嘴鱖和斑鱖的雜交子代的形態性狀偏向母本;三角魴（Megalobrama terminalis）和團頭魴（M. amblycephala）的正、反交雜交后代形態性狀也存在一定的母性效應[17]。虹鱒Oncorhynchus mykiss（♀）×山女鱒Oncorhynchus masou（♂）雜交F1受精卵與母本的胚胎發育積溫相當[18]。牙鲆Paralichthys olivaceus（♀）×圓斑星鰈Verasper variegatus（♂）雜交胚胎的發育過程也與母本相似[19]。

SSR分子標記由于具有高度多態性、共顯性的孟德爾遺傳方式以及數目巨大且隨機分布的特點，被廣泛應用到性狀分析、群體遺傳分析、進化和種質鑒定等研究中[20]。在利用SSR分子標記進行種質鑒定方面，Jenneckens等[21]用湖鱘LS39引物擴增10種鱘微衛星位點，該位點在閃光鱘上獨有且僅有1個110 bp的等位基因，從而與其他9種鱘區分開。Beacham等[22]應用13個微衛星位點區分了環太平洋區不同區域種群的大麻哈魚（Oncorhynchus tshawytscha）。微衛星是以1～6個核苷酸為基本重復單元的串聯重復序列，其本身重復單元數的變異是物種具有遺傳多態性的基礎[23]。對于個體而言，某一微衛星位點的等位基因數是和該生物的染色體倍性相關的。一般地，對于一個普通二倍體生物個體，由于引物是針對特異的微衛星位點設計的，因而每對引物在雜合個體中只能擴增出2條目的條帶，在純合個體中只能擴增1條目的條帶[24]。

參考文獻：

[1] 黃志堅，何建國.鱖魚疾病的研究概括[J].水產科技情報，1999，26（6）：268-271.

[2] 陳昌福，曾妍雄.患細菌性敗血病的翹嘴鱖血清中蛋白質成分的變化[J].華中農業大學學報，2000，19（5）：481-482.

[3] 吳會民，林文輝，吳淑勤，等.鱖養殖池塘底泥脫氫酶活性測定方法的研究[J].大連水產學院學報，2007，22（4）：311-314.

[4] 羅仙池，徐田祥，吳振興，等.鱖魚的胚胎、仔稚魚發育觀察[J].水產科技情報，1992，19（6）：165-168.

[9] 樓允東.魚類育種學[M].北京：中國農業出版社，2001.40-107.

[5] 鄭閩泉，丁桂枝，黃涵生，等.鱖魚胚胎發育的觀察[J].江西水產科技，1994（3）：21-24.

[6] 曾可為，王青云，高銀愛，等.斑鱖的生物學及其繁殖生物學的研究[J].內陸水產，2005（2）：27-29.

[7] 何利君.溫度對鱖魚胚胎發育的影響[J].四川畜牧獸醫學院學報，1999，13（4）：19-22，28.

[8]周才武.鱖亞科魚類的分類整理和地理分布[J].動物學研究，1988，99（2）：113-125.

[10] 趙 ?建，朱新平，陳永樂，等.翹嘴鱖、斑鱖及其雜交種形態差異分析[J].華中農業大學學報，2008，27（4）：506-509.

[11] 宓國強，趙金良，賈永義，等.鱖（♀）×斑鱖（♂）雜種F1的形態特征與微衛星分析[J].上海海洋大學學報，2010，19（2）：145-150.

[12] 宓國強，陳建明，練青平.雜交鱖與鱖魚、斑鱖肌肉營養成分和氨基酸含量比較[J].水產養殖，2009，30（4）：35-37.

[13] 宓國強，練青平，王雨辰，等.雜交鱖胚胎發育觀察[J].浙江海洋學院學報（自然科學版），2009，28（3）：264-269.

[14] 王 ?丹，李文寬，閆有利，等.鴨綠江斑鱖胚胎及胚后發育觀察[J].大連水產學院學報，2007，22（6）：415-420.

[15] 吳立新，鄒 ?波.碧流河水庫斑鱖胚胎發育的形態觀察[J].水產科學，1993，12（9）：5-8.

[16] 楊 ?寧，吳常信.親本對后代群體的不均等遺傳貢獻及其優化控制[J].遺傳學報，1993，20（1）：294-299.

[17] 楊懷宇，李思發，鄒曙明.三角魴和團頭魴正反交F1的遺傳性狀[J].上海水產大學學報，2002，11（4）：305-309.

[18] 陳術強，張玉勇，賈智英，等.虹鱒（♀）×山女鱒（♂）雜交種胚胎及仔魚發育的研究[J].上海海洋大學學報，2010，19（6）：757-762.

[19] 李 ?竹，張全啟，齊 ?潔，等.牙鲆（♀）×圓斑星鰈（♂）雜交子代的胚胎及仔魚發育[J].中國水產科學，2006，13（5）：732-739.

[20] 孫效文，張曉鋒，趙瑩瑩，等.水產生物微衛星標記技術研究進展及其應用[J].中國水產科學，2008，15（4）：689-703.

[21] JENNECKENS I， MEYER J N， SCHWARK G H， et al. A fixed allele at microsatellite locus LS-39 exhibiting species-specificity for the black caviarproducer Acipenserstellatus [J]. J Appl Ichthyol， 2001， 17： 39-42.

[22] BEACHAM T D， CANDY J R， JONSEN K L， et al. Estimation of stock composition and individual identification of chinook salmon across the Pacific rim by use of microsatellite variation [J]. Trans Am Fish Soc， 2006， 135： 861-888.

[23] 宋國華，劉田福.微衛星標記及其在實驗動物中的應用[J].中國比較醫學雜志，2005，15（4）：244-248.

[24] CROOIJMANS R P M A， BIERBOOMS V A F， KOMEN J， et al. Microsatellite markers in common carp （Cyprinus carpio L.） [J]. Anim Genet， 1997， 28： 129-134.