水溫對虎紋蛙受精卵孵化的影響

符史杭+徐尚沖

摘要：孵化是虎紋蛙（Rana rugulosa）養殖的第一個環節，為研究水溫對虎紋蛙受精卵孵化率及蝌蚪成活率的影響，設置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等水溫進行虎紋蛙受精卵孵化，記錄了48、60、72 h的蝌蚪數量。結果表明，虎紋蛙孵化的合適水溫為24～34 ℃，其孵化率均在70%以上，孵出的蝌蚪24 h成活率均在96%以上;在此水溫范圍內孵化率隨著溫度的升高而升高，而蝌蚪24 h成活率則沒有明顯變化。

關鍵詞：虎紋蛙（Rana rugulosa）;水溫;成活率;孵化率

中圖分類號：S966.3+3 ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ?文章編號：0439-8114（2014）20-4924-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.20.040

Effects of Water Temperature on Hatching Fertilized Egg of Tiger Frog

FU Shi-Hang， XU Shang-Chong

（College of Life Sciences/Ministry of Education Key Laboratory for Tropical Animal and Plant Ecology，

Hainan Normal University， Haikou 571158， China）

Abstract： Hatching was the first part of tiger frog breeding. The fertilized egg of tiger frog were incubated at 12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃ to study the impact of the water temperature on hatching rate of fertilized egg and survival rate of tadpole of tiger frog. The number of tadpole after 48、60、72 h were recorded. The results showed that the most suitable water temperature for hatching was 24～34 ℃， with hatching rate of more than 70% and 24 h survival rate of more than 96%. The hatching rate increased when the water temperature increased， but the 24 h survival rate of tadpole did not change.

Key words：tiger frog（Rana rugulosa）; temperature of water; survival rate; hatching rate

研究表明熱環境能影響兩棲爬行類的胚胎發育及幼體的生長發育，在孵化溫度范圍內，熱環境顯著地影響孵化成功率及新生幼體的大小、生長和行為[1-5]。恒定的相對高溫增加了林蛙和中華大蟾蜍受精卵的孵化速率，但是降低了其存活率[6-8]。

國家林業局于2003年8月12日公布了《商業性經營利用馴養繁殖技術成熟的陸生野生動物名單》，虎紋蛙（Rana rugulosa）等54種陸生野生動物列在其中。海南省是全國最主要的虎紋蛙養殖區，養殖量曾經占全國的85%[9]。虎紋蛙人工養殖的第一個環節就是孵化。由于氣溫的原因，海南島每年的冬春季中有一段時間無法進行產卵、孵化，生產進入種蛙保存環節，待氣溫回升后才能開始產卵、孵化。每年年初上市的商品蛙市場價格較高，養殖效益明顯，導致養殖戶都盡早安排每年的第一個養殖周期。在實際生產過程中，許多養殖戶僅根據氣溫回暖的感覺安排生產，由于缺乏科學知識的指導，第一批虎紋蛙受精孵化率往往不高，有的養殖場甚至出現整批失敗的現象，影響了虎紋蛙養殖業的發展。本研究將探明影響虎紋蛙受精卵孵化率的熱環境量化因素，為虎紋蛙養殖業健康發展提供科學指導。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

虎紋蛙受精卵來源于海南省海口市美蘭區大致坡鎮伍生虎紋蛙養殖場730日齡虎紋蛙種蛙所產。

1.2 ?方法

根據虎紋蛙冬眠溫度和海南省人工養殖虎紋蛙集中區域露天養殖池水體最高溫度，在生化培養箱中設置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等16個不同溫度試驗組，每組設3個重復。分別將10 mL的受精卵放在20 cm×10 cm×26 cm的孵化箱中進行孵化，記錄各個孵化箱的受精卵投放數量（簡稱為受精卵總量，下同）和48、60、72 h蝌蚪的數量。

孵化率=（蝌蚪數量/受精卵總量）×100%;成活率=（72 h蝌蚪數量/48 h蝌蚪數量）×100%，并用Excel軟件對試驗數據進行統計分析。

2 ?結果與分析

2.1 ?水溫對虎紋蛙受精卵孵化率的影響

在生化培養箱中設置了12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42 ℃等16個溫度梯度，每個培養箱中放入3個20 cm×10 cm×26 cm的孵化箱，并加水至10 cm處。每個孵化箱水體中加入10 mL虎紋蛙受精卵進行孵化，虎紋蛙受精卵孵化結果見表1。由表1可以看出，12、14、16、18、20、38、40、42 ℃恒溫環境中孵化48 h后，各個孵化箱均沒有蝌蚪出現;而22、24、26、28、30、32、34、36 ℃恒溫環境中孵化48 h后各個孵化箱均有蝌蚪出現。

2.2 ?不同水溫環境中孵化的蝌蚪的存活情況

將孵化出來的虎紋蛙蝌蚪在培養箱中繼續培養24 h，觀察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情況，每個孵化箱中均有死亡蝌蚪出現（表2）。

3 ?小結與討論

2011～2013年，海南省養殖的第一批虎紋蛙的市場收購價格均在20元/kg左右，是年均價格的2～3倍，使養殖戶爭先提早安排當年的第一批養殖，甚至出現春節剛過就急著進行種蛙抱對產卵孵化，但是孵化率普遍較低，造成大量浪費種蛙資源現象，直接推高了養殖成本[6-12]。本研究表明水溫在22～36 ℃虎紋蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水溫在24～34 ℃孵化率穩定在72%以上，水溫在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之間安排種蛙抱對產卵孵化，確保養殖成功率，提高養殖經濟效益，促進虎紋蛙養殖業健康發展。

本研究是為了探明溫度與虎紋蛙受精卵孵化之間的關系而設置的恒溫試驗，由于人工養殖虎紋蛙是在露天環境中進行的，水溫隨著氣溫的變化而變化，變化的水溫對虎紋蛙受精卵孵化的影響如何，有待于進一步研究。

參考文獻：

[1] ALLSTEADT J， LANG J W. Incubation temperature affects body size and energy reserves of hatchling American alligators （Alligator mississippiensis）[J]. Physiol Zool，1995，68：76-97.

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[8] 王立志，李曉晨.溫度對中國林蛙卵孵化和孵出熱耐受性的影響[J].動物學雜志，2007，42（1）：121-127.

[9] 陳 ?雯，俞根寶，鄭榮泉，等.溫度對棘胸蛙胚胎發育及蝌蚪表型特征的影響[J].貴州農業科學，2010，38（1）：108-110.

[10] 符史杭.虎紋蛙在海南的瀕危狀況及其保護措施[D].南京：南京農業大學，2010.

[11] 符史杭.虎紋蛙三種養殖方式的經濟效益比較[J].北京農業，2013（5）：168-169.

[12] 符史杭，汪繼超，傅麗蓉，等.海南省人工養殖虎紋蛙的現狀及其對策[J].湖北農業科學，2013，52（5）：1118-1121.

2.2 ?不同水溫環境中孵化的蝌蚪的存活情況

將孵化出來的虎紋蛙蝌蚪在培養箱中繼續培養24 h，觀察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情況，每個孵化箱中均有死亡蝌蚪出現（表2）。

3 ?小結與討論

2011～2013年，海南省養殖的第一批虎紋蛙的市場收購價格均在20元/kg左右，是年均價格的2～3倍，使養殖戶爭先提早安排當年的第一批養殖，甚至出現春節剛過就急著進行種蛙抱對產卵孵化，但是孵化率普遍較低，造成大量浪費種蛙資源現象，直接推高了養殖成本[6-12]。本研究表明水溫在22～36 ℃虎紋蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水溫在24～34 ℃孵化率穩定在72%以上，水溫在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之間安排種蛙抱對產卵孵化，確保養殖成功率，提高養殖經濟效益，促進虎紋蛙養殖業健康發展。

本研究是為了探明溫度與虎紋蛙受精卵孵化之間的關系而設置的恒溫試驗，由于人工養殖虎紋蛙是在露天環境中進行的，水溫隨著氣溫的變化而變化，變化的水溫對虎紋蛙受精卵孵化的影響如何，有待于進一步研究。

參考文獻：

[1] ALLSTEADT J， LANG J W. Incubation temperature affects body size and energy reserves of hatchling American alligators （Alligator mississippiensis）[J]. Physiol Zool，1995，68：76-97.

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[12] 符史杭，汪繼超，傅麗蓉，等.海南省人工養殖虎紋蛙的現狀及其對策[J].湖北農業科學，2013，52（5）：1118-1121.

2.2 ?不同水溫環境中孵化的蝌蚪的存活情況

將孵化出來的虎紋蛙蝌蚪在培養箱中繼續培養24 h，觀察60、72 h孵化箱中的蝌蚪存活情況，每個孵化箱中均有死亡蝌蚪出現（表2）。

3 ?小結與討論

2011～2013年，海南省養殖的第一批虎紋蛙的市場收購價格均在20元/kg左右，是年均價格的2～3倍，使養殖戶爭先提早安排當年的第一批養殖，甚至出現春節剛過就急著進行種蛙抱對產卵孵化，但是孵化率普遍較低，造成大量浪費種蛙資源現象，直接推高了養殖成本[6-12]。本研究表明水溫在22～36 ℃虎紋蛙受精卵才能孵化蝌蚪，水溫在24～34 ℃孵化率穩定在72%以上，水溫在22 ℃以上，最好在24～34 ℃之間安排種蛙抱對產卵孵化，確保養殖成功率，提高養殖經濟效益，促進虎紋蛙養殖業健康發展。

本研究是為了探明溫度與虎紋蛙受精卵孵化之間的關系而設置的恒溫試驗，由于人工養殖虎紋蛙是在露天環境中進行的，水溫隨著氣溫的變化而變化，變化的水溫對虎紋蛙受精卵孵化的影響如何，有待于進一步研究。

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[9] 陳 ?雯，俞根寶，鄭榮泉，等.溫度對棘胸蛙胚胎發育及蝌蚪表型特征的影響[J].貴州農業科學，2010，38（1）：108-110.

[10] 符史杭.虎紋蛙在海南的瀕危狀況及其保護措施[D].南京：南京農業大學，2010.

[11] 符史杭.虎紋蛙三種養殖方式的經濟效益比較[J].北京農業，2013（5）：168-169.

[12] 符史杭，汪繼超，傅麗蓉，等.海南省人工養殖虎紋蛙的現狀及其對策[J].湖北農業科學，2013，52（5）：1118-1121.