鹽酸乙胺丁醇片近紅外定量分析模型的建立

孫夢(mèng)希，劉 蟬(安徽省食品藥品檢驗(yàn)研究院，安徽合肥 230051)

鹽酸乙胺丁醇片收錄于中國(guó)藥典2010年版二部(含鹽酸乙胺丁醇應(yīng)為標(biāo)示量的 95.0%～105.0%)，屬抗結(jié)核病藥。中國(guó)藥典2010年版二部采用非水溶液滴定法測(cè)定含量［1］，該法樣品前處理過(guò)程繁瑣，且可能在處理過(guò)程中損失一定量的樣品。為了對(duì)市場(chǎng)中的鹽酸乙胺丁醇片進(jìn)行快速篩查和快速定量分析，本文建立近紅外光譜法，簡(jiǎn)便、無(wú)損失的進(jìn)行鹽酸乙胺丁醇片含量檢測(cè)，為假劣藥品的現(xiàn)場(chǎng)篩查提供有力的手段。

1 儀器與試藥

Sartorius電子天平，Matrix-F近紅外光譜儀(德國(guó)BRUKER公司)，OPUS 6.5分析軟件。鹽酸乙胺丁醇片:4個(gè)廠家，22批樣品，規(guī)格均為0.25 g。氫氧化鈉、氯化鈉、三氯甲烷、冰醋酸均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 非水溶液滴定法含量測(cè)定 按照中國(guó)藥典2010年版二部中鹽酸乙胺丁醇片含量測(cè)定法對(duì)鹽酸乙胺丁醇片進(jìn)行含量測(cè)定［1］。22批鹽酸乙胺丁醇片的含量范圍為68.36% ～81.52%。

2.2 鹽酸乙胺丁醇片近紅外光譜的測(cè)定 近紅外光譜分辨率為8 cm－1，掃描范圍為12 000～4 000 cm－1，共掃描32次，每批樣品測(cè)定6片，分別得到6張?jiān)脊庾V，計(jì)算平均光譜。

圖1 鹽酸乙胺丁醇片近紅外平均光譜圖

2.3 建模方法、譜段和預(yù)處理方法的確定［2－5］將所有非鋁塑鹽酸乙胺丁醇片的近紅外平均光譜用于建立模型，圖1中7 500～6 500、5 500～4 500 cm－1這兩段譜段，是各廠家差異較大的以及滑石粉的光譜區(qū)域，去掉這兩段譜段區(qū)域，再將所有平均光譜作為校正集采用交叉驗(yàn)證法(Cross Validation)，通過(guò)使用 OPUS進(jìn)行自動(dòng)優(yōu)化，得到譜段9 701.4 ～7 502.6 cm－1。預(yù)處理方法為最小最大歸一化(Min－Max normalization)+一階導(dǎo)數(shù)化+減去一條直線，采用交叉驗(yàn)證法(Cross Validation)建模。

2.4 驗(yàn)證結(jié)果 驗(yàn)證該譜段和預(yù)處理方法。首先以所有樣本為校正集進(jìn)行內(nèi)部交叉驗(yàn)證，計(jì)算得到R2為 92.49%，均方根誤差(RMSECV)為 0.82;然后將樣本的一部分作為校正集、另一部分作為驗(yàn)證集，進(jìn)行外部驗(yàn)證，得到R2為96.12%，均方根誤差(RMSEP)為0.632。結(jié)果見表1、圖1、3。藥典方法測(cè)定值與NIR預(yù)測(cè)值相比較，NIR法的平均偏差為0.71%，最大偏差為 1.49%。

圖2 鹽酸乙胺丁醇片定量分析模型內(nèi)部驗(yàn)證參考值與預(yù)測(cè)值結(jié)果圖

圖3 鹽酸乙胺丁醇片定量分析模型外部驗(yàn)證參考值與預(yù)測(cè)值結(jié)果圖

2.5 模型重復(fù)性考察 隨機(jī)在22批樣品中抽取1批，用近紅外光譜儀進(jìn)行光譜測(cè)定，連續(xù)測(cè)定6次，結(jié)果NIR含量測(cè)定值分別為74.415%、74.538%、74.581%、74.209%、74.761%、73.907%，平均為74.40%，RSD為0.5%，表明本模型重復(fù)性良好。藥典方法含量測(cè)定值為74.41%。

2.6 模型中間精密度考察 不同的分析人員，在不同的日期，選擇5批樣品，分別采集近紅外光譜圖，計(jì)算平均光譜。用這5張平均光譜進(jìn)行模型的中間精密度考察，見表2，結(jié)果表明本模型精密度良好。

3 討論

通過(guò)對(duì)22批樣品的預(yù)測(cè)結(jié)果與藥典方法含量測(cè)定結(jié)果比較，其平均相對(duì)偏差為0.71%，模型測(cè)定的結(jié)果與藥典方法的相對(duì)偏差大多數(shù)在2% 以內(nèi)，在快速分析的接受范圍，故該通用定量模型具有一定的實(shí)用價(jià)值［6］。

表1 鹽酸乙胺丁醇片近紅外定量模型測(cè)定結(jié)果及偏差

表2 鹽酸乙胺丁醇片近紅外定量模型測(cè)定結(jié)果及偏差

本文應(yīng)用近紅外光譜法對(duì)鹽酸乙胺丁醇片進(jìn)行定量測(cè)定，方法準(zhǔn)確可靠，方便快捷。在基層的打假治劣中，就可以利用藥品快檢車在抽驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)對(duì)鹽酸乙胺丁醇片真?zhèn)芜M(jìn)行篩選，提高了工作效率，將藥品的技術(shù)監(jiān)督與行政監(jiān)督有機(jī)融為一體，提高了假劣藥檢出率與抽驗(yàn)靶向率，大大節(jié)省了檢驗(yàn)成本［7－10］。當(dāng)然在實(shí)際檢驗(yàn)中，由于各個(gè)廠家的制備工藝、輔料和樣品均勻程度等方面存在一定差異，同時(shí)樣品的厚度、溫度、殘留溶劑、含水量和光學(xué)性質(zhì)等方面也有所不同，這些都可以對(duì)近紅外光譜產(chǎn)生一定的影響，因此還需要對(duì)近紅外定量模型進(jìn)行補(bǔ)充與完善。

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