青蟹池塘生態育苗試驗

金中文, 王揚才, 吳仲寧, 戴海平, 蔡志立

(1.寧波市海洋與漁業研究院, 浙江 寧波315012; 2.寧波市鄞州區漁業技術管理服務站, 浙江 寧波315100;3.寧波鄞州咸祥志立水產苗種養殖場, 浙江 寧波315100)

青蟹是我國沿海重要的養殖種類, 是珍貴的海珍品之一[1], 在我國養殖有近百年的歷史。據中國漁業統計資料[2], 2010年全國青蟹年產量11.59×104t,然而, 青蟹養殖的苗種幾乎依賴自然海區的野生苗種。雖然, 國內外對青蟹養殖開展長期的研究與技術開發, 青蟹苗種培育技術均采取工廠化人工育苗的方法, 但苗種產業化生產技術尚未取得根本性的突破[3], 養殖業也因此受到制約。青蟹苗種培育對于環境和營養的要求高于其他蟹類, 人工培育的親蟹所產的卵, 可能存在先天的營養缺陷, 而工廠化人工育苗存在飼料營養不能滿足幼體發育的營養需求,最終導致幼體變態率低, 不能順利完成幼體全過程的變態。幼體培育的生態環境也是決定育苗成敗的關鍵[4]。河蟹、梭子蟹土池育苗技術較為成熟, 已經普及推廣并在養殖生產中發揮重要作用, 青蟹土池育苗尚未有成功的報道[5]。為此, 本文開展青蟹池塘生態育苗相關的基礎研究, 探討青蟹池塘生態育苗的可行性, 尋求青蟹苗種培育新的途徑。

1 材料與方法

1.1 實驗條件

2011年和2012年4~6月期間, 試驗選擇在浙江省寧波市位于象山港畔區域養殖場, 池塘2個, 育苗池形狀為長方形, 每個池塘面積 300~500 m2, 池深1.2~1.5 m, 坡比1∶2。整個育苗池鋪設防滲膜, 完全隔離與土壤的聯系, 在防滲膜內外設有排水管和滲水排水管, 每口池塘安裝水車式增氧機。

1.2 實驗方法

1.2.1 親蟹培育與幼體孵化

種蟹選擇浙江省三門灣區域養殖場養殖的擬穴青蟹(Scylla paramamosai), 親蟹殼寬(11.66±0.83) cm,殼高(8.35±0.58) cm。親蟹放置在育苗室內培育, 抱卵蟹胚胎發育成熟, 心跳120次/min以上, 移至池塘中孵化, 掌握蟹卵集中在2 d內全部孵化, 每池放入抱卵蟹 5~7只。推算抱卵蟹卵數量平均 150×104粒,孵化率80%左右, 每只抱卵蟹孵化幼體120×104只[1]。幼體密度掌握在 1.2×104~2.8×104只/m3。

1.2.2 水質管理

育苗開始前 15 d, 蓄水池進水, 用漂白粉50 mg/L消毒, 孵化前 5 d, 將蓄水池的水抽入育苗池, 水位 80 cm, 進水后, 投施浮游藻類的營養素培養藻類。幼體培育15 d后開始換水, 換水量視水質狀況決定, 定時開增氧機。觀察水體浮游植物狀態、數量, 適當添加藻類營養素或氮肥、磷肥和硅酸鹽等,保持藻類良好的狀態與適當的密度。

1.2.3 餌料投喂

幼體孵化后, 及時投喂輪蟲和配合飼料。輪蟲由專門土池塘培養, 密度為300~500個/L, 每日1~2次, 螺旋藻粉和日本對蝦配合飼料, 每次用量各1mg/L, 每日3次。之后隨著幼體發育進展, 加大輪蟲投喂密度, 逐漸增至500~1000 個/L。幼體發育變態至蚤狀幼體Ⅲ期(Z3)后, 開始投喂豐年蟲幼體, 變態到大眼幼體階段,增投豐年蟲成蟲, 幼蟹Ⅰ~Ⅱ期(C1~C2)階段, 投喂冷凍的豐年蟲成蟲,投喂量為幼體總體質量的100%~200%。

1.3 采樣與檢測

1.3.1 浮游生物采樣

浮游生物每 5 d采樣一次, 浮游藻類采樣水深0.5 cm, 水樣1 L, 采得后立即加入15 mL魯哥氏液固定。浮游動物用2.5 L采水器, 采樣10 L, 現場利用浮游動物網(25號)過濾, 濃縮樣品集中于500 mL塑料瓶中, 并加入7 mL甲醛(4%)固定,帶回實驗室鑒定和計數。浮游植物和浮游動物計數方法參考湖泊富營養化調查規范[6]。

1.3.2 水質檢測

在池塘設固定水質檢測點, 用美國產“QUANTA”水質檢測儀, 現場測定溶解氧、溫度、鹽度、pH值、飽和度, 營養鹽測定方法, 按照《海洋調查規范》進行[7]。

1.3.3 幼體生長指標測定

每個變態期對幼體取樣, 取變態前1 d和剛變態的幼體。幼體體質量檢測方法, 用吸紙吸除幼體體表的水分, 然后進行稱質量。

13.4 數據分析

使用Prime軟件中Simper分析群落的優勢物種,用SPSS軟件進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 育苗數量與幼體成活率

2011年和2012年實驗的兩口池塘, 共培育出蟹苗(稚蟹Ⅰ至Ⅱ期)34.1×104只。2011年單位產苗量107.00只/m2, 2012年為 212.38 只/m2, 單位水體育苗最高產量為383.00只/m2。2011年幼體成活率平均0.89%, 2012年2.10%, 幼體成活率(Z1至C1~2)最高為3.19%(表2和表3)。

表1 餌料投喂量參考表Tab.1 Bait feeding quantity

表2 2011年青蟹育苗量統計表Tab.2 Seedling quantity statistics in 2011

表3 2012年青蟹育苗量統計表Tab.3 Seedling quantity statistics in 2012

2.2 幼體變態與生長

幼體生長(蚤狀幼體Ⅰ期至大眼幼體階段)符合指數生長, 計算生長曲線方程:y=0.14e0.497x(圖1),大眼幼體平均體質量3.43 mg, 稚蟹Ⅰ期(C1)平均體質量18.13 mg。

圖1 幼體體質量增長結果Fig.1 Larvae weight growth curve

從蚤狀幼體孵出至蟹苗銷售的時間需要33~34 d, 出售蟹苗規格為稚蟹Ⅰ至Ⅱ期, 幼體全部變態至稚蟹再繼續培育約一周后。幼體的變態時間,Z1變態至 C1約 23~25 d(表4)。

表4 幼體變態天數Tab.4 Larva abnormal days

2.3 育苗池塘水質因子變化

2011年育苗期間, 池塘水溫(24.85±26.50)℃, 鹽度(S)26.50±4.64。2012 年池塘水溫(23.13±1.25)℃, 鹽度 20.18±1.37(圖2, 圖3), 溶解氧(DO)(7.20±0.67)mg/L, pH8.65±0.39。

圖2 2011年育苗池塘鹽度變化Fig.2 Changes of water salinity in seedling pond in 2012

圖3 2012年育苗池塘鹽度變化Fig.3 Changes of water salinity in seedling pond in 2012

表5 2012年池塘營養鹽分析Tab.5 Pond nutrients in 2012

池塘氨氮濃度為(0.037±0.012) mg/L, 亞硝酸鹽濃度為(0.026±0.012) mg/L, 硝酸鹽濃度為(0.186±0.136 ) mg/L(表5)。

2.4 浮游生物種類與群落特征

2.4.1 浮游植物

鑒定出藻類20種。硅藻門:尖刺菱形藻(Nitzschia pungens Grunow),小環藻(Cyclotellasp.),曲舟藻(Pleurosigma affine), 舟形藻(Naviculasp), 角毛藻(Chaetoceros.sp.), 菱形藻(Nitzschiasp), 雙尖菱形藻(Nitzschia amphioxys), 奇異菱形藻(Nitzschia paradoxa), 楔形藻(Licmophorsp.); 綠藻門: 小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 盤星藻(Pediastrum), 卵囊藻(Oocystis), 小形平藻(Pedinomona sminor), 柵藻(Scenedesmus quadricanda), 綠球藻(Chlorellasp.); 甲藻門:裸甲藻(Gymnodinium aerucyinosum), 多甲藻(Peridinium conicum); 藍藻門:顫藻(Oscillatoria), 螺旋藻(Arthrospira)。細胞密度(1760.2×104±5119.4×104)個/L。藻類群落以小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 尖刺菱形藻(Nitzschia pungensGrunow), 小環藻(Cyclotellasp.),舟形藻(Naviculasp.), 菱形藻(Nitzschiasp.), 出現的頻度較高, 細胞密度大(表6)。

表6 主要藻類種類以及密度Tab.6 The main plankton species and density

2.4.2 浮游動物

鑒定出大型浮游動物種類 11種, 原生動物 12種。橈足類: 尖額真猛水蚤(Euterpe acutifrons)、透明溫劍水蚤(Thermocyclops hyalinus)、無節幼蟲(Nauplius)、精致真刺水蚤(Euchaeta concinna)、刺尾紡錘水蚤(Acartia spinicauda)、紅小毛猛水蚤(Microsetella rosea); 輪蟲: 皺褶臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis); 幼體: 輻射幼蟲(Actinula)、搖蚊幼蟲(Chironomidae larva)、纖毛幼蟲(Zoanthina larva); 線蟲: 線蟲(Nematoda)。密度(646.28±899.17)個/L(表7, 圖4, 圖5)。

原生動物: 膜袋蟲(Cyclidiumsp.)、纖毛蟲(Ciliophorasp)、蚤狀中縊蟲(Mesodinium pulex)、急游蟲(Strombidiumsp.)、草履蟲(paramoeciumsp.)、單柱偏體蟲(Dysteria monostyla)、輻射變形蟲(Amoeba radiosa)、尾毛蟲(Uronemasp.)、袋形蟲(Bursariasp.)、游仆蟲(Euplotessp.)、優雅擬盜蟲(Strombidinopsis elegans)、鐘蟲游泳體(Vorticellasp.)。密度(6.66×104±18.57 )個/L。優勢種類有: 游仆蟲、丁丁急游蟲、水虱幼體(表8, 圖6, 圖7)。

表7 主要大型浮游動物種類及密度Tab.7 The main species and density of zooplankton

圖4 1#池塘浮游動物密度變化Fig.4 Dynamics of zooplankton in pond 1#

圖5 2#池塘浮游動物密度變化Fig.5 Dynamics of zooplankton in pond 2#

浮游動物群落以橈足類和輪蟲生物量最大。人工投喂的皺褶臂尾輪蟲在蚤狀幼體培育的前兩周,1#池塘密度維持在 250~300個/L, 2#池塘密度200~1500 個/L, 之后, 也保持一定的數量。育苗開始約20 d(池塘進水時開始計算)后, 尖額真猛水蚤數量上升, 密度 100~250 個/L, 無節幼蟲在進水 1~2周時出現峰值。1#池塘的原生動物在育苗開始的一周后, 數量減少, 2#池塘原生動物在育苗開始15 d后,丁丁急游蟲等原生動物數量增加。固著類纖毛蟲以及幼體在育苗開始后20~25 d出現高峰。

表8 主要原生動物種類及密度Tab.8 The main species and density of protozoon

圖6 1#池塘原生動物密度變化Fig.6 Dynamics of protozoon in pond 1#

圖7 2#池塘原生動物密度變化Fig.7 Dynamics of protozoon in pond 2#

3 討論

育苗池塘的鹽度呈初期高, 后期低, 符合自然海區中青蟹幼體的生長發育過程經歷了從高鹽到低鹽的過渡[8]。陳弘成和鄭金華[9]青蟹早期幼體適宜鹽度為25~30, 后期適宜鹽度為20~25。2012年育苗鹽度低, 平均 20.18±1.37, 1#池塘鹽度從 5月 29日的20.27到 6月 4日持續下降至 15.66, 期間觀察到 Z5幼體密度明顯減少, 育苗成活率可能與鹽度偏低有關,推測蚤狀幼體Ⅴ期至大眼幼體階段鹽度應高于20。

水溫是選擇合適的育苗季節的主要依據。浙江寧波沿海4月份氣溫較低, 冷空氣頻繁, 直至5月上中旬也有多個冷空氣影響, 6月份水溫穩定并趨于明顯的上升, 鑒于當地青蟹養殖一般在 6月上旬之前放養, 產品當年可以上市的習慣, 5月上旬育苗時段顯得十分重要。幼體變態速度與水溫有密切關系[10],整個育苗期間的水溫范圍, 2011年為(23.13±1.25)℃,2012年為(24.85±26.50)℃。幼體變態至稚蟹的時間(Z1~C1)25d左右, 整個育苗周期33 d左右, 池塘培育幼體變態時間與曾朝曙等[10]所需時間基本一致。鋸緣青蟹蚤狀幼體生長發育的適溫范圍為25~30℃。溫度對蚤狀幼體變態過程有明顯影響, 水溫大于或達到 30℃時不利于變態的進行, 但變態后的大眼幼體對高溫適應力增強[10]。寧波地區青蟹池塘育苗時間,春夏季選擇在 5~7月, 此時, 水溫穩定在 23℃以上,開展池塘育苗較為合適。

育苗期間, 池塘溶解氧處在較高的水平, pH值在正常范圍之內, 各池塘的氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽濃度不存在顯著差異(P＞0.05), 濃度普遍較低。這可能與育苗時間短, 投喂活餌料和控制配合餌料投量,加之, 池塘用防滲膜與土壤隔離以后, 大幅度減少池塘底部有機物數量有關。以上水質指標反映池塘的物質代謝順暢, 水質相對穩定, 對育苗是十分有利的。

育苗池塘浮游藻類以硅藻、小球藻和扁藻為優勢。小球藻作為輪蟲的營養強化餌料和保持水質穩定性發揮十分重要作用, 不僅可以提高輪蟲的 EPA和DHA含量, 尤其是DHA含量, 將有利于鋸緣青蟹幼體的存活和發育[11-13], 硅藻和扁藻是蝦蟹類幼體的優良餌料。池塘橈足類豐富, 后期幼體投喂橈足類可以提高成活率[14]。可見, 池塘育苗過程中幼體可以獲得更全面和優質的餌料營養。

育苗過程中, 尖額真猛水蚤等水蚤密度過大,合計達到120.27 個/L, 尖額真猛水蚤的繁殖速度快,日增值率 0.149[15], 而且, 猛水蚤與其幼體的游泳速度極快, 與青蟹幼體產生餌料和水體空間的競爭。青蟹幼體捕食水蚤與其幼體的的機會十分有限。

青蟹幼體發生固著性纖毛蟲附著現象比較普遍,纖毛蟲病在河蟹和三疣梭子蟹土池育苗同樣存在嚴重的危害[16-17]。2012年育苗的1#池塘沒有檢測到纖毛蟲, 2#池塘, 后期纖毛蟲密度呈高達 10×104ind/L,嚴重危害幼體的攝食和活動, 纖毛蟲可能是造成幼體成活率低的主要原因之一。纖毛蟲的主要來源可能從投喂輪蟲時攜帶入池塘, 土池培養輪蟲, 預防纖毛蟲十分關鍵。才女蟲(Polydorasp)對中華絨螯蟹(Eriocheir sinens)、梭子蟹土池育苗造成嚴重危害,防滲膜圍隔可以徹底避免才女蟲的滋生[18], 育苗過程中未發生才女蟲危害。

青蟹池塘生態育苗試驗表明: 池塘餌料豐富,幼體可以獲得更全面和優質的餌料營養, 水體環境良好, 經過兩年的試驗, 在自然條件下成功培育出蟹苗, 幼體成活率和單位產量與梭子蟹地膜池塘育苗幼體成活率為6.95%, 單位產量1325.8只/m2[16]的結果接近。地膜池塘培育梭子蟹苗試驗[18]結果, 梭子蟹幼體成活率有顯著提高(P<0.05), 平均出苗量比較土池塘的出苗量提高 16.24%, 育成率提高 63.53%,試驗池塘的蟹苗捕撈更方便、徹底。只要選擇合適的季節, 做好競爭性生物和病害的預防, 可以獲得量產的目標, 池塘生態育苗方法培育青蟹苗是可行的, 并有可能獲得規模化生產的重大突破。

[1]賴慶生.青蟹養殖[M].北京: 農業出版社, 1990.

[2]農業部漁業局.中國漁業年鑒[M].北京: 中國農業出版社, 2010.

[3]李少菁, 王桂忠.青蟹繁殖生物學及人工育苗和養成技術的研究[J].廈門大學學報: 自然科學版, 2001,40(2): 552-565.

[4]喬振國.鋸緣青蟹苗種培育的科技進展[J].海洋漁業, 2005, 27(2): 160-163.

[5]顧孝連, 喬振國.我國蟹類土池育苗技術研究進展[J].海洋漁業 2012, 34(1): 110-116.

[6]金相燦, 屠清瑛.湖泊富營養化調查規范[M].北京:中國環境科學出版社, 2001.

[7]國家質量監督檢驗檢疫局.海洋調查規范[S].GB 12763, 6-91.北京: 中國標準出版社, 1991.

[8]王桂忠, 林淑君, 林瓊武, 等.鹽度對鋸緣青蟹幼體存活與生長發育的影響[J].水產學報, 1998, 22(1):89-92.

[9]陳弘成, 鄭金華.1985鱘苗人工培育之研究.I溫度鹽度對鱘卵孵化及鱘苗存活和成長之影響[J].臺灣水產學會會刊.12(2): 70-77.

[10]曾朝曙, 李少菁.溫度對鋸緣青蟹幼體成活與發育的影響[J].水產學報, 1992, 16(3): 213-221.

[11]彭慧婧, 蔣 艷, 楊家林, 等.兩種補充營養在鋸緣青蟹育苗中后期的效果分析[J].廣西科學, 2008,15(4): 449-451, 460.

[12]艾春香, 劉建國, 林瓊武, 等.青蟹的營養需求研究及其配合飼料研制[J].水產學報, 2007, 30(增刊) :124-128.

[13]翁幼竹, 李少菁, 王桂忠.鋸緣青蟹幼體餌料的營養強化[J].水產學報 2001, 25(3): 228-231.

[14]陳凱, 喬振國, 王朝新.不同餌料對擬穴青蟹(Scylla paramamosian)后期幼體變態及成活率的影響[J].現代漁業信息, 2010, 25(11): 25-27.

[15]陳世杰.廈門港尖額真猛水蚤室內培養的研究[J].水產學報, 1988, 12(4): 439-345.

[16]李曉東, 金送笛, 劉胥, 等.河蟹生態育苗中集中常見生物對其蚤狀幼體的影響[J].水產科學, 2000,19(3): 1-4.

[17]閻斌倫, 梁利國, 張曉君.三疣梭子蟹主要病害研究進展[J].水產科技情報, 2010, 37(1): 29-37.

[18]金中文, 戴海平, 蔡志立.地膜池塘三疣梭子蟹育苗試驗[J].福建水產, 2010, 12(4): 35-38.