妊娠期肝內膽汁淤積癥患者胎盤滋養細胞中TNF—α mRNA的表達及其與膽汁酸水平變化的關系

黃娟

【摘要】 目的 探討腫瘤壞死因子α（TNF-α）在妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）發病機制中的作用。方法 66例剖宮產術分娩的妊娠期肝內膽汁淤積癥產婦作為A組， 隨機抽取同期行單純剖宮產術的70例健康產婦作為B組。對A、B兩組臨床資料進行對比分析。結果 A組與B組相比， 新鮮的胎盤組織滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為（2.24±0.27）和（1.10±0.09）；兩組比較差異有統計學意義（P<0.01）；培養并處理后胎盤組織滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為（3.97±0.35）和（1.07±0.12）；兩組比較差異有統計學意義（P<0.01）。結論 TNF-α與妊娠期肝內膽汁淤積癥發生關系密切， 應引起臨床治療的注意。

【關鍵詞】 腫瘤壞死因子α；妊娠期肝內膽汁淤積癥；TNF-α mRNA

妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）是妊娠期比較常見的一種并發癥， 主要表現為血清膽汁酸水平升高和肝臟酶學指標異常。妊娠期肝內膽汁淤積癥嚴重危害胎兒， 早產、胎兒窘迫、胎死宮內的發生率很高。胎盤是胎兒和母體直接接觸的界面， 胎盤滋養細胞的變化是直接影響胎兒的。目前， 膽汁酸直接形成的危害是研究的重點， 為防治胎兒不良反應的發生， 揭示妊娠期肝內膽汁淤積癥的發病機制， 具有重要的臨床意義。本研究通過檢測妊娠期肝內膽汁淤積癥患者胎盤滋養細胞中腫瘤壞死因子α（TNF-α）的表達水平來探討TNF-α在妊娠期肝內膽汁淤積癥發病機制中的作用。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2011年7月～2013年7月收治的剖宮產術分娩產婦136例， 孕周為37～40周。66例妊娠期肝內膽汁淤積癥產婦作為A組， 妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）診斷標準如下：①妊娠期出現無法解釋的皮膚瘙癢， 排除皮膚疾病；②血清膽紅素約在1.1～5.0 mg/dl， 血清SGPT或SGOT約60～100 U， 更高者少見；③排除肝臟疾病、膽道疾病、需用抗生素的感染。隨機抽取同期行單純剖宮產術的70例健康產婦為B組， 比較兩組間術中出血量、術后24 h血紅蛋白下降、術后排氣時間、產后病率、手術時間以及手術后住院時間的情況。兩組患者年齡、孕周、產次差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 在胎盤娩出后無菌條件下進行取材， 置于DMEM培養液中送細胞培養室， 并制備新鮮的胎盤組織冰凍切片。先應用實時熒光定量PCR技術檢測A、B兩組新鮮的胎盤組織滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平；再對滋養細胞體外培養72 h后， A組滋養細胞加入膽酸混合物， B組滋養細胞加入等體積的乙醇， 6 h后應用實時熒光定量PCR技術檢測兩組滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平。

1. 3 統計學方法 本研究所得數據通過SPSS13.0統計學軟件進行分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 A組與B組新鮮的胎盤組織滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為（2.24±0.27）和（1.10±0.09）；兩組比較差異有統計學意義（P<0.01）。

2. 2 A組與B組培養并處理后胎盤組織滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平分別為（3.97±0.35）和（1.07±0.12）；兩組比較差異有統計學意義（P<0.01）。

3 討論

妊娠期肝內膽汁淤積癥可導致早產、胎兒宮內窘迫增加圍生兒死亡率， 發病機制及臨床過程復雜， 母嬰死亡率較高。本文對妊娠期肝內膽汁淤積癥發病機制進行探討。妊娠時胎盤作為內分泌器官產生大量重要的細胞因子， 這些細胞因子進入母體及胎兒血液循環， 對代謝、免疫、血管等系統發揮多種作用。在整個妊娠期， 這些細胞因子進行著復雜的平衡調節， 維持了正常妊娠的過程。近年來研究表明， 細胞因子作為參與免疫反應的重要介質， 在妊娠期肝內膽汁淤積癥的發生、發展過程中起重要的作用[1]。TNF-α主要是由單核-巨噬細胞分泌， 其他類型的細胞， 如淋巴細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞等在一定條件下也具有產生和釋放TNF-α的能力， 妊娠期TNF-α主要由胎盤和脂肪組織合成和分泌。TNF-α是一種由單核巨噬細胞產生的細胞因子， 在妊娠期肝內膽汁淤積癥的發生、發展過程中起重要的作用， 參與了滋養細胞的凋亡過程。TNF-α的主要生化作用有：直接殺傷細胞， 損壞肝細胞；刺激氧自由基產生， 導致肝細胞過氧化損傷；促進胎盤合成、分泌雌激素[2]。其主要通過受體發揮作用，參與多種生理與免疫過程。腫瘤壞死因子1受體（TNFR1）介導了TNF-α的主要生物學效應， TNFR1含死亡結構域， 可觸發信號傳導級聯反應而導致細胞凋亡或通過激活核轉錄因子——核因子кB（NFкB）促使細胞增殖、分化[3]。子宮內膜和胎盤組織中存在大量的巨噬細胞， 適量的TNF-α參與胎兒與胎盤組織的生長、分化調節， 刺激滋養細胞合成和分泌孕酮及HCG， 防止母體對胎兒的排斥反應。有研究提示， TNF-α可以提高超氧離子水平及超氧離子激活NO的能力， 使血管內皮功能失調， 使胎盤滋養細胞發生凋亡。

本研究顯示妊娠期肝內膽汁淤積癥組滋養細胞中TNF-α mRNA的表達水平明顯高于健康產婦組， 在高濃度膽酸的作用下， TNF-α水平明顯升高， 導致胎盤滋養細胞凋亡的增加， 引起的胎盤功能障礙， 盡而出現胎兒發育遲緩、胎兒窘迫、早產、死胎等不良現象。結論與杜巧玲等[4]一致， 高膽汁酸環境導致胎盤組織TNF-α水平增高， 導致滋養細胞凋亡增加， 引起不良妊娠結局。說明TNF-α與妊娠期肝內膽汁淤積癥關系相當密切， 抑制TNF-α的分泌或許會減輕對產婦和胎兒的危害， 對妊娠期肝內膽汁淤積癥治療達到新的切入點。

參考文獻

[1] 黎智彪.肝功能檢測與妊娠期肝內膽汁淤積癥的臨床研究.當代醫學， 2013（18）：43-44

[2] 曹麗瓊，曲廣第，王冬梅.妊娠期肝內膽汁淤積癥IL-10、TNF-α表達變化及其與肝功能變化的關系.免疫學雜志， 2012（5）：424-426.

[3] 李晶媛，李樹臣，楊維良.TNF-α誘導肝細胞凋亡機制的回顧與展望.世界華人消化雜志， 2007（6）：606-611.

[4] 杜巧玲，段濤.妊娠期肝內膽汁淤積癥患者胎盤滋養細胞中TNF-α mRNA的表達及其與膽汁酸水平變化的關系.中華婦產科學雜志， 2013， 9（48）：687-688.

[收稿日期：2014-08-21]endprint