大豬屎豆化學成分系統預試及TCL測定研究

摘要：目的對大豬屎豆進行化學成分初步分析與TCL測定。方法采用化學成分系統預試法和薄層色譜法。結果大豬屎豆化學成分預實驗表明，其含有生物堿、鞣質、有機酸、黃酮類、酚類、香豆素類、內酯、強心苷、甾體類、三萜類和油脂等化學成分。TLC測定研究表明大豬屎豆莖、葉中均含β-谷甾醇。結論該研究可為了解大豬屎豆的化學成分及對其進一步開發利用提供參考。

關鍵詞：大豬屎豆；化學成分；薄層色譜大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.為豆科植物，全株均可入藥，夏秋季采收，去凈鮮用或者曬干用。其莖葉藥材名為\"自消容\"，根藥材名為\"自消容根\"，莖葉及根味淡、性微涼[1]。《藥用植物辭典》中記載大豬屎豆產于中國華南、西南地區及安徽、臺灣等地。莖、葉、根、種子均具有清熱解毒，止血消腫，涼血降壓，利水的作用。可用于黃疸型肝炎、 咳嗽吐血、腫脹、牙痛、小兒頭瘡、疳積、高血壓、白血病、惡性腫瘤、跌打損傷、風濕骨痛、外傷出血、刀傷、小便不利、腎結石、腎炎、腎虛耳鳴等疾病的治療。文獻研究表明，目前尚未見有對大豬屎豆的化學成分系統預試與TLC測定的相關研究報道。因此，我們對其進行化學成分系統預試與TLC測定的進行研究，具體如下。

1資料與方法

1.1一般資料 DHG-9241型電熱恒溫干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；ZF-2型三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠）；UPK-Ⅰ型優普超純水機（成都超純科技有限公司）；電子分析天平（上海方瑞儀器有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（上海申賢恒溫水浴鍋有限公司）。939型自動鋪板器（重慶南岸貝爾德儀器技術廠）。對照品為β-谷甾醇（中國藥品生物制品檢定所，供鑒別用，批號：0851-9601），試劑均為分析純。

大豬屎豆的3批樣品均采自廣西藥用植物園，經廣西中醫藥大學郭敏副教授鑒定為豆科植物豬屎豆屬大豬屎豆Crotalaria assamica Benth.的全株，標本存于廣西中醫藥大學藥用植物教研室。

1.2方法與結果

1.2.1化學成分預實驗

1.2.1.1水提取液的制備 分別稱取粗粉10.0 g，分別置入200 mL的三角燒瓶中，加入蒸餾水100 mL，室溫浸泡過夜。濾過，取濾液約20 mL，每試管1~2 mL供檢查氨基酸、多膚、蛋白質用。剩余藥渣加水適量，在60℃左右水浴上加熱30 min，濾過，濾液取每試管1~2 mL作氨基酸、多膚、蛋白質、糖、多糖、皂苷、苷類、鞭質、有機酸等成分定性檢測。3批樣品的實驗測定結果一致，見表1。

1.2.1.2乙醇提取液的制備 分別稱取3批樣品粗粉10.0 g，分別置入250 mL圓底燒瓶中，加入95%乙醇100 mL于水浴上加熱回流1 h，稍冷后加人蒸餾水使其含醇量為70%，冷至室溫，過濾，濾液轉移至分液漏斗中；用100 mL石油醚(60℃~90℃)分2次萃取，每次用石油醚50 mL，以除去葉綠素等，分出下層乙醇提取液，濃縮至40~50 mL，加95%乙醇50 mL溶解后過濾，濾液取每試管1~2mL供檢查黃酮、蒽醌、香豆素、萜類、甾體化合物、有機酸、酚類、鞣質等成分用。3批樣品的實驗測定結果一致，見表2。

1.2.1.3石油醚提取液的制備 分別稱取樣品粗粉1.0 g，分別置入50 mL的燒杯中，加入石油醚(60℃~90℃)10 mL，密閉浸泡2 h，過濾，濾液供檢查揮發油、甾體化合物等成分用。3批樣品的實驗測定結果一致，見表3。

1.2.2 TLC測定

1.2.2.1供試品溶液的制備 分別稱取3個批大豬屎豆莖、葉粉末20 g，分別置入250 mL塞錐形瓶中，加入250 mL 95%乙醇于水浴回流2 h，濾過，濾渣再加250 mL 95%乙醇水浴回流2 h，提取3次，合并乙醇提取液，水浴濃縮，得到供試品溶液。

1.2.2.2對照品溶液的制備 取β-谷甾醇對照品少量，加無水乙醇適量，溶解，制成對照品溶液。

1.2.2.3展開與檢識 用毛細管吸取上述供試品溶液10 μL，對照品溶液5 μL，分別點于同一硅膠G板上，以石油醚：丙酮4∶1（V/V）為展開劑展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液顯色，晾干，至斑點出現。結果表明：大豬屎豆莖和葉與β-谷甾醇對照品在黃色背景的相應位置上均出現相同的藍色斑點，提示其莖、葉中均含有β-谷甾醇；不同月份的莖、葉中均能檢測出β-谷甾醇，見圖1。

圖1 大豬屎豆TLC測定實驗結果圖

注：1、5、9為β-谷甾醇對照品；2、3、4為①、②、③批莖；6、7、8為①、②、③批葉；比移值Rf=0.42。

2討論

大豬屎豆始載于清代的《生草藥性備要》，該本草中稱其為\"自消容\"，具有散結、清濕熱、利濕解毒之功效。近代對大豬屎豆研究表明，其對小鼠肉瘤S-180、S-37及淋巴肉瘤1號腹水型的生長，有顯著的抑制作用[3]。此外，它還可用作綠肥植物[4]。該實驗研究結果表明：大豬屎豆中含有生物堿、鞣質、有機酸、黃酮類、酚類、香豆素、內酯、強心苷、植物甾醇、三萜類和油脂等化學成分。TLC結果表明：其莖、葉中均含有β-谷甾醇。該研究結果可為大豬屎豆生物活性成分的提取、分離、純化研究提供參考，并為大豬屎豆的深入研究與開發、利用提供一定的研究基礎與數據支持。

參考文獻：

[1]國家中醫藥管理局中華本草編委會.中華本草 第四冊[M].上海:上海科學技術出版社，1999:421-423.

[2]連文琰.豬屎豆屬藥用植物的調查[J].中藥材，1986，29(3):6-9.

[3]劉忠輝，劉國道，黃必志.云南豬屎豆屬遺傳多樣性的ISSR分析[J].草業學報，2009，10(5):7-9.編輯/肖慧