不同麻醉劑麻醉小鼠后對晶狀體影響的比較

摘要：目的 探討各種麻醉劑對小鼠晶狀體透明度的影響。方法 將環境溫度控制為（24±1）℃，分別用10%水合氯醛（400 mg/kg）、2%戊巴比妥鈉（40mg/kg）及25%烏拉坦（1000mg/kg）腹腔注射麻醉C57/BL6小鼠，擴瞳后于10、20、30、45、60min裂隙燈觀察晶狀體渾濁情況。結果 烏拉坦、水合氯醛麻醉組與戊巴比妥鈉麻醉組相比，麻醉持續時間較長，晶狀體出現渾濁的時間較早，渾濁程度較重；24h后裂隙燈檢測顯示各麻醉組晶狀體恢復透明狀態。結論 不同麻醉劑誘導小鼠晶狀體出現突發性渾濁的程度不同，使用小鼠進行晶狀體等眼球相關實驗時，要注意麻醉劑的選擇，減少對實驗結果的影響。

關鍵詞：麻醉；小鼠；晶狀體在研究晶狀體病變或者視網膜病變等眼科相關疾病時，C57/BL6小鼠已成為常見的實驗動物，麻醉是動物實驗中重要的步驟，麻醉后晶狀體是否透明在進行ERG、VEP、OCT等眼科儀器檢測時是至關重要的因素[1]。有研究指出，用甲苯噻嗪/氯胺酮、水合氯醛在進行常規麻醉時，會誘導小鼠晶狀體出現突發性可逆性渾濁，并干擾眼科儀器的檢查，影響實驗結果[2，3]，并指出麻醉后實驗動物出現晶狀體渾濁與溫度有關[2，4]。在前期研究中，我們也已經證實了低溫會誘導麻醉后C57/BL6小鼠晶狀體出現渾濁，因此，本實驗將溫度恒定在（24±1）℃，擬探討各種麻醉劑對小鼠晶狀體透明度的影響，為進行眼科動物實驗麻醉提供研究基礎。

1資料與方法

1.1實驗材料、試劑及主要儀器

1.1.1動物健康雄性C57/BL6小鼠36只，2個月齡，體重19～24g。由中南大學湘雅醫學院實驗動物中心提供。所有小鼠實驗前托吡卡胺眼液擴瞳后經裂隙燈檢測，晶狀體均透明正常。

1.1.2試劑及主要儀器麻醉劑水合氯醛、戊巴比妥鈉、烏拉坦（國藥集團化學試劑有限公司）；托吡卡胺擴瞳眼液（武漢五景藥業有限公司）；主要儀器為HS900BQ裂隙燈（瑞士）。

1.2方法

1.2.1實驗動物分組及處理將小鼠隨機分為4組：包括未經任何處置的正常對照組，其余三組分別用2%戊巴比妥鈉（40mg/kg）、25%烏拉坦（1000mg/kg）及10%水合氯醛（400mg/kg）腹腔注射麻醉，各麻醉組先后進行2次麻醉，間隔時間為24h。實驗期間，所有實驗小鼠飼養于室溫（24±1）℃、相對濕度50％～60％的環境，給予12h/12h光暗周期節律。

1.2.2裂隙燈檢查第1次麻醉后，卡托吡胺眼液擴瞳，分別于10、20、30、45、60min用裂隙燈觀察晶狀體渾濁情況，24h后，卡托吡胺眼液擴瞳，裂隙燈檢測晶狀體狀態，再行第2次麻醉，同樣于10、20、30、45、60min用裂隙燈觀察晶狀體渾濁情況。在裂隙燈下視野中，晶狀體 渾濁程度分為4個等級：無渾濁；輕度渾濁(晶狀體渾濁區域≤1/2)；中度渾濁(晶狀體渾濁區域>1/2)；重度渾濁(晶狀體全部渾濁)。見圖1。

圖1裂隙燈下晶狀體四種渾濁等級：0:無渾濁；1:輕度混濁；2:中度渾濁；3:重度渾濁。

2結果

2.1麻醉狀況各麻醉組麻醉狀況良好，角膜反射消失，呼吸心跳有所減慢，體溫稍有下降。水合氯醛麻醉組及烏拉坦麻醉組麻醉持續時間較長，可長達為90～150min，戊巴比妥鈉麻醉組麻醉持續時間為60～90min。24h后，進行第2次麻醉，發現各麻醉組麻醉的持續時間與第1次相比略微縮短。

2.2麻醉后對晶狀體的影響水合氯醛及烏拉坦麻醉小鼠后，出現明顯的眼球外突，眼瞼不能閉合，角膜干燥，而戊巴比妥鈉麻醉小鼠后眼瞼自然下垂，無明顯眼球外突及角膜干燥。三種麻醉劑麻醉小鼠后均呈現不同程度的晶狀體渾濁，主要表現為晶狀體皮質性渾濁，多開始于晶狀體的周邊部，逐步向中心發展，渾濁可表現為細小顆粒狀和囊泡狀。第1次麻醉中，烏拉坦、水合氯醛麻醉后晶狀體出現渾濁的時間早于戊巴比妥鈉麻醉組，20min后即出現晶狀體渾濁，麻醉后60min表現為中度及重度渾濁；戊巴比妥鈉麻醉后45min才出現小鼠晶狀體渾濁，裂隙燈觀察晶狀體僅輕度渾濁。24h后裂隙燈檢測，晶狀體均恢復透明。再次麻醉小鼠后，與第1次麻醉相比，各組小鼠晶狀體均出現渾濁提前，渾濁加重，水合氯醛麻醉組第2次麻醉45min后即已出現晶狀體重度渾濁，麻醉60min后，烏拉坦表現為重度渾濁，而戊巴比妥鈉麻醉組表現為中度渾濁。見表1。

3討論

麻醉是動物實驗中非常重要的步驟，目前，已有研究指出，用甲苯噻嗪/氯胺酮、水合氯醛在進行常規麻醉時，會誘導小鼠晶狀體出現突發性可逆性渾濁，并干擾眼科儀器的檢查，影響實驗結果[2，4]。在我們的實驗中，用水合氯醛、烏拉坦、戊巴比妥鈉三種麻醉劑在常規劑量下對C57/BL6小鼠進行腹腔注射麻醉，均能達到有效的麻醉效果，但同時也發現麻醉小鼠后均出現了晶狀體突發性渾濁，阻礙了進一步的實驗進展，由于晶狀體的渾濁，導致用OCT檢測小鼠視網膜時無法成像。但是，在實驗過程中，我們發現了不同麻醉劑對小鼠晶狀體渾濁的發生發展是有差異的。從先后兩次麻醉情況而言，烏拉坦、水合氯醛麻醉組與戊巴比妥鈉麻醉組相比，晶狀體出現渾濁的時間較早，渾濁程度較重，在第1次麻醉24h后檢測晶狀體，發現晶狀體恢復了透明狀態，提示麻醉誘導的小鼠晶狀體渾濁有可能是短暫的并且可逆的，但多次反復麻醉后，小鼠晶狀體是否還能恢復透明狀態還有待進一步研究。

目前，盡管已有研究者發現藥物、低溫、紫外線輻射等因素會導致晶狀體出現渾濁，但是卻缺乏麻醉劑對晶狀體的毒理研究。在此實驗中，為了避免溫度對實驗的影響，已經將溫度恒定在24℃左右。托吡卡胺眼液是目前常用的擴瞳藥物，Hubert等人在3000只小鼠使用托吡卡胺眼液后發現有19%的晶狀體出現渾濁[5]，本試驗中，所有小鼠在麻醉前托吡卡胺眼液擴瞳后經裂隙燈檢查晶狀體均是透明正常的，可以排除托吡卡胺眼液對晶狀體的影響。有學者認為，氯胺酮/甲苯噻嗪、水合氯醛常規麻醉后能誘導晶狀體突發性可逆性渾濁，認為與麻醉劑后導致的眼球外突，角膜干燥及眼瞼不能閉合有關[6，7]，在本實驗中，戊巴比妥鈉麻醉組無明顯的眼球外突，角膜干燥，眼瞼自然閉合，但仍發生了輕度的晶狀體渾濁，此外，我們在實驗過程中也曾嘗試使用羥甲基纖維素滴眼液改善角膜干燥，發現仍然阻止不了晶狀體渾濁。

因此，我們認為麻醉劑的副作用不僅僅是晶狀體突發性渾濁的主要因素，與不同麻醉劑的選擇有一定關系。使用小鼠進行晶狀體等眼球相關實驗時，要注意麻醉劑的選擇，減少因麻醉誘導的晶狀體渾濁對實驗結果的干擾。

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編輯/哈濤