消渴脂平膠囊對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及肝臟組織NF-κB的影響

摘要：目的觀察消渴脂平膠囊對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及肝臟組織NF-κB的影響。方法將健康雄性Wistar大鼠48只，分為正常組、模型組、消渴脂平膠囊治療組、馬來酸羅格列酮治療組。測定肝臟組織中NF-κB的表達水平。結果消渴脂平膠囊組NF-κB陽性反應產物低于模型組。結論消渴脂平膠囊可降低T2DM大鼠肝臟組織中NF-κB蛋白表達水平，減輕炎癥狀態，從而起到減輕胰島素抵抗，改善血糖的作用。

關鍵詞：消渴脂平膠囊；2型糖尿病；核因子κB；肝內炎癥；胰島素抵抗近年來研究表明許多炎癥因子與T2DM，IR關系密切。抗炎治療可改善IR，提高胰島素的敏感性，從而起到降血糖，調節血脂的作用。在炎癥和應激反應時肝臟能產生多種炎癥因子，而IR時肝臟產生炎癥敏感蛋白增加，血漿濃度增高，進一步促使蛋白產物的增加，增強了機體的炎癥反應。中醫學認為肝的疏泄功能可直接影響肺、脾（胃）、腎多臟腑功能，從而消渴乃成，變證叢生。消渴脂平膠囊為我院院內制劑，作為治療T2DM氣陰兩虛挾痰瘀的基礎方藥，以益氣養陰，化瘀瀉濁為治療原則。

1資料與方法

1.1實驗動物及分組選擇Wistar大鼠48只，雄性，隨機分為兩組，即正常組（n=12只），高脂組（n=36只）。將成模的Wistar大鼠隨機分為消渴脂平膠囊治療組12只，馬來酸羅格列酮治療組12只，模型組12只。

1.2藥物消渴脂平膠囊：由山楂、何首烏、黃精、葛根、人參、澤瀉、桑葉組成，長春中醫藥大學附屬醫院制劑中心提供，長衛藥制字（96）1372號。馬來酸羅格列酮片：葛蘭素史克（天津）有限公司提供。

1.3動物模型的建立按Srinivasan等和周迎生等[1]的方法為基礎，一次性腹腔注射2%STZ 30mg·kg-1。所有大鼠于STZ注射后72h時眼眶取血，分離血清，-20℃冰箱冷凍保存備用。

1.4方法消渴脂平膠囊和馬來酸羅格列酮以蒸餾水稀釋，灌胃劑量分別為3.6g/（kg·d）、4mg/（kg·d），各組灌胃給藥8w，1次/d。處死前1d，隔夜禁食不禁水12 h，次晨將大鼠乙醚麻醉，快速切除肝臟，用于檢測指標。

1.5統計方法采用SPSS13.0統計學軟件進行統計學分析。

2結果

2.1實驗動物一般情況實驗期間意外死亡動物9只，其中正常組1只，消渴脂平膠囊組2只，馬來酸羅格列酮組2只，模型組4只。正常組大鼠生長良好，體質量有所增加，無其他癥狀。模型組大鼠較其他三組比較肥胖，活動遲緩、懶動、毛色干枯無光澤。

2.2大鼠肝臟組織中NF-кB蛋白表達情況，見表1。

正常組：陽性反應產物呈棕褐色，主要表達于肝庫普弗細胞核、門管區細胞核、膽管上皮細胞核、少數肝細胞核及中央靜脈壁。

模型組：肝細胞彌漫脂肪變。NF-kB陽性反應產物主要表達于庫普弗細胞核、肝內浸潤的炎癥細胞核、肝脂滴小泡壁及少數肝細胞核，染色濃重、累及范圍廣。

馬來酸羅格列酮組：部分肝細胞出現脂變，小泡性、大泡性脂變共存。NF-kB陽性反應產物主要表達于庫普弗細胞核、肝內浸潤的炎癥細胞核、肝脂滴小泡壁及少數肝細胞核，但受累細胞數和染色強度模型低于模型組。

消渴脂平組：部分肝細胞出現脂變。NF-кB陽性反應產物主要表達于庫普弗細胞核、肝內浸潤的炎癥細胞核、肝脂滴小泡壁及少數肝細胞核，但受累細胞數和染色強度模型低于模型組，見圖1。

3討論

近年來，大量的流行病學、臨床和實驗室研究表明，肥胖、胰島素抵抗、2型糖尿病與慢性炎癥密切相關。肥胖患者體內的脂肪組織能分泌TNF-α、IL-6、瘦素、抵抗素、脂聯素等炎癥因子均參與胰島素抵抗和2型糖尿病的發生發展。核因子-кB（NF-кB）最初是從B細胞核提取物中發現的一種核蛋白因子，當它被激活后，即可進入核內，啟動或調節基因的早期轉錄。高脂血癥、高血糖、 高血壓、各類炎癥、創傷性疾病中均可見組織中NF-кB的高表達[2]。NF-кB作為炎癥啟動和調節的關鍵核因子，參與多種炎癥因子基因表達的調控，研究證明激活的NF-кB可誘導TNF-α（腫瘤壞死因子-α）、黏附分子、白細胞介素等炎癥因子的高表達。同時亦有研究證明NF-кB是高血糖和氧化應激的主要靶點，而糖尿病與多種細胞因子TNF-α，IL-6，CRP等之間存在必然的聯系。

胰島素抵抗不僅是機體的一種異常狀態，同時也是2型糖尿病發病的重要機制。研究發現肥胖患者外周血單個核細胞中NF-кB的活性明顯升高，從而可能導致胰島素抵抗。石秀林等[3]研究顯示，T2DM患者血清炎性因子水平及單個核細胞中NF-кB活性均升高，提示2型糖尿病患者處于炎性狀態，且可能與胰島素抵抗和動脈粥樣硬化的形成有關。從而證實了合理的抑制NF-кB的活性，可以起到抗炎作用，減輕胰島素抵抗，改善血糖。慢性炎癥產生的過程都會抑制胰島素作用，造成胰島素抵抗；同樣，胰島素抵抗又會加重炎癥反應，引起一系列機體內環境的改變，形成惡性循環[4]。因此改善機體的炎癥環境是治療T2DM胰島素抵抗的重要途徑之一。模型組大鼠肝臟組織中NF-кB表達明顯升高，這與NF-кB是各種炎癥啟動和調節的因子相符，提示其可能是致T2DM的重要因素。經消渴脂平膠囊治療后，NF-кB水平明顯降低，提示NF-кB是該中藥復方的作用靶點之一[5]。消渴脂平膠囊防治T2DM、IR的作用機制之一可能是通過阻斷肝內NF-кB過度表達來實現的。為臨床應用中醫防治IR提供理論依據。

參考文獻：

[1]周迎生，高妍，李斌，等.高脂喂養聯合鏈脲佐菌素注射的糖尿病大鼠模型特征[J].中國實驗動物學報，2005，13(3):154-158.

[2]陳紅，孫明杰，彭娟，等.黃連解毒湯對糖尿病大鼠肝臟核因子-κB、腫瘤壞死因子-α表達的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2010，16(18):153-156.

[3]石秀林，李芳萍，蔡夢茵，等.新診斷2型糖尿病患者血清炎癥因子及外周血單個核細胞中核因子κB活性變化[J].中山大學學報醫學科學版，2006，27(3):266-270.

[4]第五永長，許建秦.胰島素抵抗中醫病機探討[J].四川中醫，2008，26(1):8-10.

[5]陸君.慢性炎癥與2型糖尿病[J].實用心腦肺血管病雜志，2006，14(8):600-602.

編輯/申磊