HPLC法測定對乙酰氨基酚泡騰片含量

【摘 要】對乙酰氨基酚也稱為對羥基乙酰苯胺、醋氨酚或撲熱息痛，是一種常用的退熱和止痛藥物。本實驗建立反相高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚泡騰片中對乙酰氨基酚的含量。方法：采用安捷倫 C18色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），檢測波長為254nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結論：本法簡便、準確，可用于對乙酰氨基酚泡騰片中對乙酰氨基酚的含量測定。

【關鍵詞】對乙酰氨基酚泡騰片；含量；測定

對乙酰氨基酚也稱為對羥基乙酰苯胺、醋氨酚或撲熱息痛，是一種常用的退熱和止痛藥物。對乙酰氨基酚有解熱鎮痛作用，用于感冒發燒、關節痛、神經痛、偏頭痛、癌痛及手術后止痛等。對乙酰氨基酚是非那西丁在體內的代謝產生，其抑制中樞神經系統前列腺素合成的作用與阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱。本實驗采用高效液相色譜法對對乙酰氨基酚泡騰片中的對乙酰氨基酚的進行了含量測定。

1.儀器與試藥

1.1儀器

FL2200-2高效液相色譜儀（浙江福立分析儀器有限公司）；CO-1000型色譜柱溫箱（上海子期實驗設備有限公司）；R-215旋轉蒸發儀（瑞士步琦有限公司）；HQ-50高端試劑級超純水機（鄭州華新電氣公司） ；ABS220-4分析天平（德祥科技有限公司）；AP-01P無油隔膜真空泵（杭州格圖科技有限公司）；JL_720DTH超聲波清洗器（南京科捷分析儀器有限公司）；TU-1810紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）。

1.2色譜柱

安捷倫 C18色譜柱（218 mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品

對乙酰氨基酚 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑

甲醇（上海譜振生物科技有限公司）、磷酸二氫鈉（撫順市新光精細化工有限責任公司）、溴化四丁基銨（北京邁瑞達科技有限公司）、乙腈（上海譜振生物科技有限公司）、冰醋酸（武漢宏信康精細化工有限公司）、三乙胺（鄭州皇朝化工產品有限公司）、四丁基硫酸氫銨（上海譜振生物科技有限公司）、庚烷磺酸鈉（沈陽試三生化科技開發有限公司）、四氫呋喃（武漢宏信康精細化工有限公司）。

1.5試藥

對乙酰氨基酚泡騰片。

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[1-10]。流動相：磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），檢測波長：254nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數按對乙酰氨基酚峰計算應不得低于2000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取對乙酰氨基酚泡騰片適量，研細，精密稱取，置50mL量瓶中，加水溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4專屬性試驗

在處方中去對乙酰氨基酚制成陰性樣品，依上述方法測定，結果在對乙酰氨基酚出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5精密度試驗

精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為20μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.76%，表明本方法精密度良好。

2.6對照品的線性考察

精密稱取對乙酰氨基酚對照品15mg，置250ml容量瓶中，加入流動相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，對乙酰氨基酚在18～60μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.7重現性試驗

稱取同一批的對乙酰氨基酚泡騰片樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.83%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的對乙酰氨基酚對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.2%，RSD=0.86%。結果表明此方法的回收率良好。

2.9樣品穩定性試驗

取同一批對乙酰氨基酚泡騰片樣品，按2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、2、4、6、8小時，精密吸取供試品溶液10μl 注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定對乙酰氨基酚泡騰片中對乙酰氨基酚的RSD=0.72%。結果表明供試品8小時內穩定。

3.結論

分別考察磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），甲醇-0.01mmol·L-1三乙胺水溶液（70∶30，冰醋酸調pH7.0），甲醇-0.3%磷酸（37∶63），2%庚烷磺酸鈉溶液-甲醇-乙腈-三乙胺（25：30：30：0.1），乙腈-四氫呋喃-三乙胺磷酸緩沖液（25：15：60），磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10），0.34%四丁基硫酸氫銨溶液-乙腈（75∶25）不同比例的流動相，結果以磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（85：5：10）為流動相。本實驗表明此方法可用于對乙酰氨基酚泡騰片中對乙酰氨基酚的含量測定。對乙酰氨基酚泡騰片中對乙酰氨基酚的含量為標示量的95-105%。

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