豬流行性腹瀉病毒的分離及間接ELISA的建立

摘要：豬流行性腹瀉疾病是世界上比較容易發生的疾病之一。這種病一旦發生，那將造成很嚴重的經濟損失。現在，在中國這種病的發生率依然很高，人們對這種病是非常關注和關心的。因為它對人們的生活會造成很大的影響。其實，豬流行性腹瀉疾病是一種病毒性疾病，這種病的發病率高，死亡率也高。那么本文就豬流行性腹瀉病毒的分離及間接ELISA的建立進行闡述，同時也介紹了豬流行性腹瀉疾病和這種病毒。

關鍵詞：豬流行性腹瀉病毒 分離 間接ELISA的建立

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起的。這種病的主要癥狀是腹瀉，嘔吐和脫水。豬流行性腹瀉疾病是一種易感性疾病，任何年齡段的豬都易感，一年四季均可感染。豬流行性腹瀉疾病不僅會使豬本身受到損害，同時也給人們帶來嚴重的經濟損失，這種病間接地也會影響到水資源，從而威脅到人們的健康。因此，我們必須找到一些方法來預防這種疾病的發生。那么，首先要做的就是學會一些方法將病毒進行分離，以了解它的結構與特征，這樣可以采取一些措施來減輕該種病毒的毒性。

1.豬流行性腹瀉的簡介

1.1什么是豬流行性腹瀉病毒

豬流行性腹瀉疾病是由豬流行性腹瀉病毒引起的一種腸道傳染疾病，這種疾病發生率最高的是冬季，當豬感染上這種疾病時，通常會表現為腹瀉，脫水，嘔吐以及精神沉郁。因此說，豬流行性腹瀉病毒就是能夠引起豬流行性疾病的一種傳染性病毒。這種病毒通常是從口鼻進入，作用在小腸，進而造成豬的腹瀉。

1.2豬流行性腹瀉的危害

豬流行性腹瀉疾病一旦感染了豬，尤其是仔豬，在短時期內極容易死亡，并且死亡率也很高。這樣就直接的增加了豬的飼養成本，進而就會造成人們的經濟損失。

1.3豬流行性腹瀉病毒的特點

通常來說，豬流行性腹瀉病毒具有一些特點。首先，這種病只發生在豬身上，其他動物不易感，也就是說這種病毒對宿主的選擇有特異型。其次，這種病毒的傳染性和感染性很高，它可以通過口鼻進入，然后再通過一些其他的途徑陸續的感染周圍的生活環境，進而使其它豬受到感染，這樣就會造成大片感染，從而成為流行性傳染疾病。另外，豬流行性腹瀉病毒大多發生于我國的冬季，也就是寒冷的季節，當然我們也不排除夏季發病的可能性。豬流行性腹瀉病毒發病結果是非常嚴重，豬一旦感染上這種疾病將會影響到今后的正常生活，即使康復也會有發育不良的現象。如果病情嚴重，還會造成大量豬死亡。因此說這種疾病是很復雜的一種疾病，這種病毒的毒力也是很強的。

2.分離

2.1豬流行性腹瀉病毒的分離內容

在分離之前，我們先要做好一些準備，準備好實驗器材，實驗材料。那么，選擇實驗材料也是很有講究的，我們需要選擇一些比較典型的病毒樣品，感染這種疾病的糞便就是非常好的實驗材料。具體的過程大體如下，在所獲取的糞便中加入一些胰蛋白酶處于室溫條件下，作用一段時間。然后將PK-15細胞單層在接種前也用同樣方法，用同樣使用量的胰蛋白酶的細胞維持液作用數分鐘，倒去細胞維持液，接入經過處理的病毒分離物，置37℃吸附60mni后，加人細胞維持液置37℃培養，每天觀察細胞病變。

2.2豬流行性腹瀉病毒對于分離的結果

由于豬流行性腹瀉病毒的獨特性，所以這種病毒是很難分離的。但是，伴隨著我們對該種病毒的了解與研究，通過實驗方法發現，可以運用帶毒傳代法將病毒分離，然后用熒光抗體進行檢測，在第三代時就發現了少量的熒光顆粒，在第六代時這種顆粒就非常明顯了。

2.3對結果的分析和討論

這種方法打破了傳統的不能在細胞上培養豬流行性腹瀉病毒的觀念。實驗證明，病毒在經過數次培養后，它的毒性會漸漸的減弱。根據這種特點，我們就可以使豬流行性腹瀉病毒的毒性減弱。從而，在一定程度上減輕豬流行性腹瀉疾病的發病率，減少人們的經濟損失。

3豬流行性腹瀉病毒間接檢側ELISA的建立

3.1豬流行性腹瀉病毒間接檢測ELISA的方法

ELESA抗體的檢測方法，這種方法主要是用來檢測某一區域內豬對流行性腹瀉病毒的抗體水平，這種方法和病毒的分離方法相同。也需要對實驗材料進行嚴格的選擇。

3.2豬流行性腹瀉病毒檢測ELISA的意義

我們通過一些實驗發現，ELESA檢測方法可以使檢測結果更加科學與精確。通過這種實驗方法，我們可以了解到豬對流行性腹瀉病毒的抵抗力。這樣，我們就可以采取一些好的方法來減輕豬流行性腹瀉病毒的毒性，這可以減少豬的感染率和死亡率。同時，減少人們的經濟損失。這種檢測方法對預防豬流行性腹瀉疾病的發生有著重要的意義。

4.結語：

豬流行性腹瀉疾病在世界上具有普遍的流行性，很多豬都容易感染此病，甚至威脅到豬的生存，給人們的經濟造成很大的損失，同時，也會威脅到人類的健康。隨著現代科學技術不斷發展，我們有能力對豬流行性腹瀉病毒進行研究并加以了解，要想能夠對該類病毒進行研究，首先做的就是學會一些方法對豬流行性腹瀉病毒進行分離和間接檢側ELISA的建立

參考文獻：

[1]韋顯凱，侯繼波，姜平 表達豬流行性腹瀉病毒S基因片段重組腺病毒的構建與免疫特性口 中國獸醫學報 2008

[2]董麗娜，高鳳山，許崇波，等.表達豬流行性腹瀉病毒CO「基因的重組乳酸茵的構建與鑒定 司.畜牧獸醫學報 2008

（作者單位：150030東北農業大學）