2006～2012年青海省海西州中心血站ELISA實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控的回顧性分析

劉志強(qiáng)

2006年衛(wèi)生部頒布了《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》，在兩個(gè)規(guī)范基礎(chǔ)上，本血站逐步完善了實(shí)驗(yàn)室的硬件建設(shè)，建立了符合本血站工作實(shí)際的質(zhì)量管理體系、制定了檢驗(yàn)科標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程（SOP）、開展了對(duì)檢驗(yàn)人員培訓(xùn)、積極參加衛(wèi)生部臨檢中心、省血液質(zhì)量控制中心等的室間質(zhì)評(píng)工作，使實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力得到逐步提高。在實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)過程中，本血站也建立和實(shí)施了與檢測(cè)項(xiàng)目相適應(yīng)的室內(nèi)質(zhì)量控制程序，以保證檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到預(yù)期的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)分析是檢測(cè)者在常規(guī)的血液檢測(cè)過程中認(rèn)識(shí)、分析、改進(jìn)的重要手段，通過持續(xù)關(guān)注質(zhì)控圖，根據(jù)預(yù)先制定的質(zhì)控策略和質(zhì)控圖的提示，決定是否對(duì)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行干預(yù)。本研究選取2006～2012年海西州中心血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 質(zhì)控血清 由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。含量分別為：HBsAg 0.2 IU/mL，抗-HCV 1 NCU/mL，抗-HIV 0.5 NCU/mL，TP 1 NCU/mL。

1.2 試劑 HBsAg、抗-HCV，抗-HIV，TP檢測(cè)試劑盒初檢為北京萬泰，復(fù)檢為廈門新創(chuàng)。均為ELISA試劑盒，經(jīng)中國藥品生物制品檢定所檢定合格，每批試劑有廠家完整的批批檢報(bào)告單，且經(jīng)血站質(zhì)管科抽檢符合，2℃～8℃儲(chǔ)存，在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 MultiskanMK 3酶標(biāo)儀（芬蘭雷勃分析儀器公司，芬蘭）、瑞士Tecansunrise酶標(biāo)儀（帝肯公司，瑞士）、Tecan hydro flex洗板機(jī)（瑞士帝肯公司，瑞士）。

1.4 方法

1.4.1 開始檢測(cè)前，操作人員應(yīng)當(dāng)有充分的時(shí)間熟悉試劑或儀器的操作說明，實(shí)驗(yàn)原理，規(guī)格，實(shí)驗(yàn)步驟，局限性，質(zhì)量控制和健康安全信息，檢測(cè)人員應(yīng)完全掌握試驗(yàn)操作、確定關(guān)鍵的操作步驟步驟并正確操作。質(zhì)控血清與待檢標(biāo)本在本血站ELISA試驗(yàn)室相同條件下進(jìn)行檢測(cè)，每項(xiàng)檢測(cè)均帶一孔質(zhì)控血清，按試劑盒說明書要求進(jìn)行操作。采用Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控ELISA實(shí)驗(yàn)過程穩(wěn)定性。即在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)條件下，連續(xù)測(cè)定同一批號(hào)的弱陽性質(zhì)控品10～20 d，收集至少20個(gè)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行離群值檢驗(yàn)，剔除超過±3 s以外的數(shù)據(jù)，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差、均值、變異系數(shù)值后作Levey-Jennings質(zhì)控框架圖，從21次起以后的檢測(cè)數(shù)據(jù)代入Levey-Jennings質(zhì)控框架圖，按照室內(nèi)質(zhì)控的基本方法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。在試驗(yàn)過程中，如果更換新批號(hào)試劑，鑒于ELISA實(shí)驗(yàn)的特性和試劑批間的不穩(wěn)定性，重新建立Levey-Jennings質(zhì)控圖框架。如果更換新批號(hào)質(zhì)控品，在試劑批號(hào)不變的情況下，采用將新批號(hào)質(zhì)控品和舊批號(hào)質(zhì)控品同時(shí)檢測(cè)的方式，以確保在舊批號(hào)質(zhì)控品使用結(jié)束前，獲得計(jì)算新批號(hào)質(zhì)控品均值和標(biāo)準(zhǔn)差的數(shù)據(jù)，建立Levey-Jennings質(zhì)控圖框架。如果質(zhì)控圖使用過程中，出現(xiàn)均值的偏移和標(biāo)準(zhǔn)差變化，需分析并消除產(chǎn)生偏差的原因，重新調(diào)整Levey-Jennings質(zhì)控圖框架，并分析出相應(yīng)的變異系數(shù)。

1.4.2 室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的匯總和統(tǒng)計(jì) 每種試劑或質(zhì)控品批號(hào)更換后，對(duì)該檢測(cè)項(xiàng)目質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)（CV）統(tǒng)計(jì)、分析、匯總整理并存檔。

1.4.3 本資料所用CV值為2006～2013年每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目初檢、復(fù)檢的原始質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)CV的累積變異系數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用簡(jiǎn)明統(tǒng)計(jì)軟件Concise Statistics,CS 10.34，采用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

7年間各項(xiàng)目ELISA實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)（CV）比較見表1。

表1 7年間各項(xiàng)目ELISA實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)（CV）比較

3 討論

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證體系中的重要組成部分，是監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量采取的必要的檢查和控制手段。室內(nèi)質(zhì)控能確保實(shí)驗(yàn)室血液檢測(cè)結(jié)果的分析誤差控制在允許限度內(nèi)，從而保證分析結(jié)果具有一定精密度和準(zhǔn)確度，使檢測(cè)數(shù)據(jù)在規(guī)定的置信概率內(nèi)，保證測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性，將測(cè)定結(jié)果的精密度控制在一定的允許范圍內(nèi)，并能及時(shí)發(fā)現(xiàn)、分析出檢測(cè)過程產(chǎn)生誤差諸因素中（包括方法、標(biāo)準(zhǔn)物、儀器設(shè)備、試劑、操作者水平等）是那個(gè)因素起著較大作用，以便有針對(duì)性地改進(jìn)工作。室內(nèi)質(zhì)控通常采用試劑盒陰陽性對(duì)照、弱陽性質(zhì)控品實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的有效性，同時(shí)采用弱陽性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。

表1顯示，通過對(duì)2006～2012年變異系數(shù)的對(duì)比分析，海西州中心血站隨著實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、環(huán)境硬件能力提高、檢測(cè)人員水平持續(xù)改進(jìn)，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力逐年提高。海西州中心血站ELISA實(shí)驗(yàn)室一直使用半自動(dòng)化檢測(cè)血液樣品，在此過程中衛(wèi)生部2006年《血站質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、2012年《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》出臺(tái)，海西州中心血站ELISA實(shí)驗(yàn)室也依據(jù)兩個(gè)規(guī)范建立了《實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》并結(jié)合血站工作實(shí)際進(jìn)行修訂和換版，逐步完善實(shí)驗(yàn)操作程序的規(guī)范化，持續(xù)改進(jìn)其有效性，確保了血液檢測(cè)的準(zhǔn)確性；運(yùn)行了血站信息化管理系統(tǒng)《唐山現(xiàn)代血站信息化管理系統(tǒng)5.0》；更新了檢測(cè)設(shè)備酶標(biāo)儀，由國產(chǎn)設(shè)備更換為進(jìn)口設(shè)備；加強(qiáng)了對(duì)檢測(cè)人員的培訓(xùn)和操作能力的提高。通過這些措施的開展，血站實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制工作逐年提高，各項(xiàng)檢測(cè)項(xiàng)目?jī)?nèi)質(zhì)控變異逐年降低充分說明基層血站實(shí)驗(yàn)室建立和開展完善的血站實(shí)驗(yàn)室管理工作，可以有效保證血液檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

通過對(duì)表1數(shù)據(jù)分析，在2012年本站因升級(jí)換代血站信息管理系統(tǒng)和更換了酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等部分檢測(cè)設(shè)備，CV值略有增大，這與實(shí)驗(yàn)工作人員對(duì)新的軟硬件設(shè)備的操作熟練度有一定的關(guān)聯(lián)，這將在今后工作中持續(xù)關(guān)注并改進(jìn)。

基層中心血站實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)硬件與人員素質(zhì)等方面相對(duì)薄弱，通過本站ELISA實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控變異系數(shù)的分析，ELISA試驗(yàn)過程影響因素較多[1]，要建立能確保臨床用血檢測(cè)安全的實(shí)驗(yàn)室，就要持續(xù)改進(jìn)和完善實(shí)驗(yàn)室工作人員、儀器設(shè)備、質(zhì)量控制等軟硬件的建設(shè)和管理：（1）加強(qiáng)引進(jìn)高學(xué)歷、高職稱的技術(shù)人員[2]來本站進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)與業(yè)務(wù)幫扶，加強(qiáng)本站檢驗(yàn)工作人員的業(yè)務(wù)能力的培訓(xùn)，提高檢驗(yàn)人員質(zhì)量意識(shí)，嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程規(guī)范操作[3]，明確職責(zé)，強(qiáng)化考核，規(guī)范工作人員行為，減少人為因素造成的實(shí)驗(yàn)偏差；（2）加強(qiáng)并完善實(shí)驗(yàn)室硬件建設(shè)，引進(jìn)先進(jìn)的儀器設(shè)備和計(jì)算機(jī)管理軟件，加強(qiáng)對(duì)設(shè)備的維護(hù)和保養(yǎng)，定期校準(zhǔn)，盡可能消除操作環(huán)節(jié)中的誤差，保證加樣量的準(zhǔn)確，確保檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定。本站實(shí)驗(yàn)室先后更新了酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等設(shè)備并定期校準(zhǔn)，升級(jí)了血站信息管理系統(tǒng)；逐步使實(shí)驗(yàn)室的軟件硬進(jìn)一步滿足實(shí)驗(yàn)要求，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和穩(wěn)定；（3）持續(xù)改進(jìn)和完善實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，保證穩(wěn)定的溫濕度等試驗(yàn)條件，確保實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定；（4）建立實(shí)施符合本實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)質(zhì)控方法，完善質(zhì)控框架。按照《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》附錄D要求，采用Levey-Jennings質(zhì)控圖，采用弱陽性質(zhì)控品和Levey-Jennings質(zhì)控圖監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性；（5）降低試劑批間變異[4-5]，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室使用試劑的頻次，科學(xué)合理定購試劑數(shù)量，盡量增大同一批號(hào)的試劑和質(zhì)控品的庫存量，并嚴(yán)格按規(guī)定的條件貯存和使用[6]，工作人員還要注意試劑或質(zhì)控品更換時(shí)按要求及時(shí)做好質(zhì)控圖框架的構(gòu)建[7]，確保實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定，最大限度降低試劑批間差造成的系統(tǒng)誤差；（6）參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心和青海省臨床檢驗(yàn)中心血的室間質(zhì)評(píng)，重視外部審核，認(rèn)真聽取審核員的意見和建議，改變慣性思維，及時(shí)采取糾正措施，改進(jìn)不足[7]，以確保室驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，做為基層血站ELISA實(shí)驗(yàn)室必須按照《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》、《血站技術(shù)操作規(guī)程（2012版）》等相關(guān)規(guī)范，按標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化、制度化、科學(xué)化要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和管理,不斷完善和持續(xù)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系,深入開展室內(nèi)質(zhì)控和參加室間質(zhì)評(píng)活動(dòng)[8],才能提高ELISA實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力與水平，保證血液檢測(cè)質(zhì)量，保障臨床用血的安全。

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