劉少華/濱州醫學院人文學院
西紅花苷對運動性疲勞小鼠MDA含量和SOD活性的影響
劉少華/濱州醫學院人文學院
目的 研究西紅花苷對運動性疲勞小鼠的保護作用,闡明西紅花苷抗運動性疲勞的作用。方法 復制小鼠力竭游泳模型,并測定應用西紅花苷后小鼠達到力竭所需的時間以及MDA、SOD等指標。結果 西紅花苷能明顯提高小鼠游泳到達力竭的時間,提高小鼠骨骼肌和肝臟SOD活性,骨骼肌和肝臟MDA含量等指標。結論 應用西紅花苷有利于延長游泳至力竭的時間,增強SOD活性,降低MDA含量,增強小鼠的抗氧化能力,維持細胞的正常生理功能。
西紅花苷;運動性疲勞;力竭游泳
西紅花苷是一類從梔子和西紅花中提取的特殊的水溶性胡蘿卜素。學者們研究發現,西紅花苷有廣泛的藥理活性,如其可保護心腦血管、殺滅腫瘤細胞、保護神經細胞和保肝作用。運動性疲勞是一直是體育學界和醫學界研究的熱點。本實驗利用小鼠力竭游泳模型,研究給小鼠補充西紅花苷是否影響小鼠的運動能力,從抗氧化角度來探討西紅花苷抗運動性疲勞作用,為研發西紅花苷成為運動補劑提供實驗依據。
1.1主要試劑和儀器
西紅花苷由濱州醫學院藥學院藥物研究所提供,純度≧98%。MDA測定試劑盒及SOD測定試劑盒購于南京建成生物工程有限公司。L - 550臺式低速離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司),Sartorius BT 25s電子天平(賽多利斯科學儀器(北京)有限公司),80-2臺式低速離心機(山海醫療器械(集團)有限公司手術器械廠);WFZUV-2000 型紫外可見分光光度計(尤尼柯(上海)儀器有限公司);秒表;溫度計;灌胃針頭,手術器械。
1.2方法
1.2.1動物分組和給藥。健康雄性昆明種小鼠,體質量 (22± 2) g,由濱州醫學院實驗SPF級動物中心提供。實驗動物在整個實驗過程中常規分籠飼養,每籠12只,自由飲水、進食。實驗前稱小鼠體重,隨機分為六組,每組12只,分別為安靜組、力竭游泳組、藥物10、15、20mg/kg組。 藥物組分別用10、15、20mg/kg的西紅花苷灌胃,每日1次,安靜組和力竭游泳組小鼠給以等量的生理鹽水,實驗周期為4周。
1.2.2實驗方法。于末次給藥30min后,力竭游泳組及藥物藥物10、15、20mg/kg組進行負重游泳:在距離小鼠尾根部1~ 2cm處,負重5%體質量的鉛皮,置入水溫30±2℃、水深25cm的游泳槽中游泳,記錄小鼠自游泳開始至力竭的時間。力竭判斷標準∶小鼠沉入水中超過10s,且在平地時翻正反射消失。
1.2.3標本收集和測定。在負重游泳后,斷頭處死小鼠,取部分肝、骨骼肌,置入組織勻漿器中研磨后取上層清液,按照試劑盒說明書測定SOD、MDA指標。
1.3統計學方法
實驗數據采用SPSS 13.0軟件,進行統計學處理。所有數據均以x±s表示,組間比較用方差分析。P≤ 0.05為差異有顯著性統計學意義。
2.1小鼠力竭游泳時間 灌胃給藥4周后,進行力竭游泳實驗,不同劑量西紅花苷對小鼠力竭游泳時間的影響見表1。藥物10、15、20mg/kg組與力竭游泳組相比,小鼠力竭游泳時間均延長。其中15mg/kg藥物組力竭游泳時間明顯延長,與安靜組相比,具有統計學意義(P< 0.05)。

表1 西紅花苷對小鼠力竭游泳時間的影響
2.2西紅花苷對小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影響 進行力竭游泳實驗結束后,立即處死小鼠,取肝臟和骨骼肌,加一定比例的稀釋液研磨后,測定上層細胞清液中MDA水平,結果見表2。與安靜組相比,力竭游泳組小鼠肝臟和骨骼肌MDA水平均升高,其差異具有統計學意義(p<0.05),而西紅花苷則降低力竭運動所致MDA升高,其差異具有統計學意義(p<0.05)。

表2 西紅花苷對小鼠肝、骨骼肌MDA水平的影響
2.3西紅花苷對小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影響 取肝臟和骨骼肌組織研磨后的上清后測定上清液中SOD活性,結果見表3。與安靜組相比,力竭游泳組小鼠肝臟和骨骼肌SOD活性降低,其差異具有統計學意義(p<0.05),與力竭游泳組相比,西紅花苷藥物組小鼠肝臟和骨骼肌SOD活性升高,差異具有統計學意義。

表3 西紅花苷對小鼠肝、骨骼肌SOD活性的影響
學者們研究發現,運動疲勞的發生與體內自由基異常增多直接相關[1]。力竭運動時,由于局部耗氧量增多、能量消耗增加、肌骨骼肌細胞線粒體負荷加重等因素導致機體內的酶系統和非酶系統產生大量自由基。異常增多的自由基觸發脂質過氧化反應,形成的脂質過氧化物經代謝后產生 MDA,MDA與骨骼肌、心臟、肝臟等組織器官內的蛋白質、核酸等發生交聯形成希夫式堿,進而使細胞的流動性和滲透性發生改變,細胞膜的正常結構破壞,細胞功能喪失,細胞內環境異常而影響細胞功能,產生疲勞[2]。因此,MDA反映機體自由基產生的水平和體內脂質過氧 化的情況,同時也是體內脂質損傷的重要指標。本實驗研究發現,與力竭游泳組相比,西紅花苷組肝臟和骨骼肌MDA活性降低(p<0.05),SOD活性升高(p<0.05),說明西紅花苷具有清除自由基的作用,對自由基過多造成的肝臟、腎臟的損害具有保護作用。
總之,西紅花苷具有抗運動性疲勞作用,其作用機制與降低血、肝和骨骼肌細胞中MDA含量,增強血、肝和骨骼肌細胞中SOD活性有關。
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[1] Ortenblad N,Sjogaard G,Madsen K.Impaired sarcoplasmic reticulum Ca2+release rate after fatiguing stimulation in rat skeletal muscle[J].Appl Physiol,2000,89(1)∶2210-217.
[2] 苑偉,李士博,馬迎春,等.紅景天納米粉對小鼠抗缺氧和抗疲勞作用的實驗研究[J].西 北 藥 學 雜 志,2011,26(3):122-123.