子宮肌瘤中雌激素受體、孕激素受體及Wilms瘤基因的表達(dá)及相關(guān)性

張鳳榮，程玲瑗

（天水市第一人民醫(yī)院，甘肅 天水 741000）

子宮肌瘤是女性生殖器最常見的良性腫瘤，也是人體最常見的腫瘤。據(jù)尸檢資料顯示，35歲以上婦女中約20%患有子宮肌瘤，因很多患者無癥狀或肌瘤很小，臨床報(bào)道的發(fā)病率遠(yuǎn)較真實(shí)發(fā)病率低。子宮肌瘤雖惡變率低，但可引起子宮異常出血、腹痛、腰酸、下腹墜脹、感染、壓迫癥狀甚至不孕等多種并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患者身心健康。其病因及發(fā)病機(jī)制目前仍不十分清楚，目前主要的治療手段是手術(shù)切除。本研究通過觀察雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及 Wilms瘤基因（WT-1）在子宮肌瘤中的表達(dá)情況，探討子宮肌瘤的發(fā)病原因和機(jī)制，從而為子宮肌瘤的非手術(shù)治療提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 一般資料

1.1 研究對象

收集2012年1月至2014年8月我院手術(shù)切除、病理診斷明確的子宮肌瘤病例1 372例，將因子宮肌瘤切除子宮的、手術(shù)前至少3月內(nèi)沒有經(jīng)過任何激素治療的病例納入研究范圍，隨機(jī)選擇150例作為研究組，對應(yīng)的子宮肌層組織作為對照組，切白片3張，做ER、PR及WT-1標(biāo)記。1 372例患者按年齡分5組：＜30歲組，30～39歲組，40～49歲組，50～59歲組，＞59歲組，將標(biāo)記結(jié)果按照-、+、++統(tǒng)計(jì)歸類。

1.2 臨床表現(xiàn)

月經(jīng)量增多1 210例，月經(jīng)紊亂531例，下腹痛192例，貧血521例，下腹包塊221例，白帶增多231例，合并其他疾病者232例。其中：合并宮頸癌27例，合并子宮內(nèi)膜癌11例，合并腺肌癥122例，合并腺瘤樣瘤18例，合并妊娠8例，合并卵巢腫瘤45例，合并侵襲性葡萄胎1例。

1.3 試劑及方法

本項(xiàng)目隨機(jī)選擇多發(fā)、單發(fā)內(nèi)膜下、肌層及漿膜下子宮肌瘤病例150例，同時(shí)取對應(yīng)的子宮肌層組織作為對照，所有標(biāo)本均采用4%甲醛固定，石蠟包埋、HE染色。采用免疫組化法（SP），切片厚 4 μm，切白片 3張，高溫修復(fù)或酶消化，4℃冰箱過夜，以PBS緩沖液代替第一抗體作為陰性對照，已知的陽性組織作為陽性對照。免疫組化試劑ER、PR、WT-1及SP試劑盒購自邁新公司，操作按試劑盒說明書要求進(jìn)行。

1.4 結(jié)果判讀

ER、PR及WT-1陽性表達(dá)定位在細(xì)胞核，以看到棕黃色顆粒分布為陽性。（1）選染色均勻有表達(dá)的區(qū)域，以陽性細(xì)胞占視野的比例進(jìn)行分級：0：＜5%；1：6%～25%；2：26%～50%；3：＞50%。（2）按著色強(qiáng)弱分：0：陰性；1：弱，淡黃色；2：中等，黃色；3：強(qiáng)，棕褐色。（1）（2）相加判讀結(jié)果：0～2 為（-），3～4 為（+），5～6為（++）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行處理，以P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 子宮肌瘤在不同年齡段的分布情況

1 372 例子宮肌瘤患者中，40～49歲918例，占66.91%，其中單純子宮肌瘤831例，占90.52%（見表1）。

2.2 ER、PR及WT-1在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中的表達(dá)情況

ER、PR在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中的表達(dá)，有顯著性差異（P＜0.05）；而WT-1在子宮肌瘤組織和子宮肌層組織中均高表達(dá)，但二者之間的差異無顯著性（P＞0.05），見表2、表3。

表1 子宮肌瘤在不同年齡段的分布情況

表2 ER、PR在子宮肌瘤和子宮肌層組織中的表達(dá)情況

表3 WT-1在子宮肌瘤和子宮肌層組織中的表達(dá)情況

3 討論

（1）子宮肌瘤是女性生殖器最常見的良性腫瘤，多見于30～50歲婦女，其中40～50歲發(fā)病率高達(dá)51.2%～60.0%[1]。本組資料顯示：本地區(qū)子宮肌瘤患者亦多見于30～50歲女性，以40～49歲組發(fā)病率最高，占66.91%，單純因子宮肌瘤切除子宮的占所有切除子宮患者數(shù)的71.43%。子宮肌瘤的臨床表現(xiàn)因肌瘤所在部位、多少、大小而不同，如位于漿膜層、肌層、內(nèi)膜下，多發(fā)或單發(fā)，臨床癥狀主要是月經(jīng)量增多、月經(jīng)紊亂、下腹墜痛、貧血、下腹包塊等。子宮肌瘤在本地區(qū)發(fā)病率較高，也是導(dǎo)致子宮肌瘤病種醫(yī)療費(fèi)用不斷增高的原因之一，并且嚴(yán)重影響女性身心健康和生活質(zhì)量，所以，全社會都應(yīng)該重視該病的預(yù)防、治療。開展子宮肌瘤的非手術(shù)治療，對于降低醫(yī)療費(fèi)用，提高女性生活質(zhì)量，具有重要意義。

（2）雌、孕激素與子宮肌瘤的關(guān)系：雌、孕激素與子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，一直被認(rèn)為是子宮肌瘤發(fā)生和發(fā)展的促進(jìn)劑，當(dāng)外源性給予雌激素或妊娠時(shí)，子宮肌瘤迅速增大，絕經(jīng)后肌瘤停止生長甚至萎縮、消失，表明子宮肌瘤具有激素依賴性。相關(guān)資料顯示：雌、孕激素水平在肌瘤組織中的表達(dá)高于正常肌層組織，說明二者在肌瘤的發(fā)生、發(fā)展中起促進(jìn)作用。本組資料亦顯示ER、PR在肌瘤組織中高表達(dá)，明顯高于周圍肌層組織，這與文獻(xiàn)報(bào)道[2]一致。臨床上對于子宮肌瘤患者采用米非司酮治療[3]，已取得顯著效果，對于圍絕經(jīng)期子宮肌瘤患者，采取期待療法，同樣取得了一定效果。

（3）WT-1與子宮肌瘤的關(guān)系：有資料顯示，胰島素樣生長因子 2（IGF-2）、胰島素樣生長因子 1受體（IGF-1受體）[4]、表皮生長因子（EGF）、轉(zhuǎn)化生長因子 β（TGF-β）、Bcl-2和 C-myc基因等，在子宮平滑肌瘤的發(fā)生中通過抑制細(xì)胞凋亡或促使子宮平滑肌瘤分泌、旁分泌的方式，促進(jìn)子宮平滑肌瘤細(xì)胞增殖和生長。WT-1基因[5]于1990年在腎的Wilm腫瘤中作為抑癌基因被分離克隆，其染色體位于11P13，能與IGF-1、TGF-β、EGF、Bcl-2、C-myc等生長調(diào)控因子及其受體結(jié)合，調(diào)節(jié)這些生長因子的轉(zhuǎn)錄。我們研究發(fā)現(xiàn)：WT-1在子宮肌層和子宮平滑肌瘤中均有過表達(dá)，證明子宮肌層及肌瘤中均有WT-1基因存在，而肌瘤中WT-1的表達(dá)與肌層中有一定差異，提示W(wǎng)T-1參與了肌瘤的發(fā)生。資料顯示，WT-1能與上述調(diào)控因子及其受體結(jié)合，激活或抑制生長因子轉(zhuǎn)錄，因此我們推測：子宮局部雌、孕激素水平增高，導(dǎo)致部分生長因子及其受體含量增加，WT-1基因可能以不同的異構(gòu)體形式與以上調(diào)控因子結(jié)合，激活了其轉(zhuǎn)錄作用，導(dǎo)致子宮平滑肌瘤的發(fā)生、發(fā)展。目前國內(nèi)對ER、PR及WT-1在子宮平滑肌瘤中的表達(dá)情況，尚無相關(guān)報(bào)道。

WT-1可以與多種生長因子結(jié)合，但其在女性胃壁和腸壁平滑肌組織中均呈陰性，在正常子宮肌壁內(nèi)高表達(dá)，提示W(wǎng)T-1過度表達(dá)可能與雌、孕激素水平有關(guān)。因此，使用激素拮抗劑，不僅可以有效控制肌瘤生長，而且可以通過降低或抑制WT-1表達(dá)，達(dá)到抑制上述生長因子，阻止肌瘤生長，甚至使其萎縮、消失，或通過選擇干預(yù)位點(diǎn)，進(jìn)行靶點(diǎn)治療，達(dá)到治療子宮平滑肌瘤的目的，為子宮平滑肌瘤的藥物治療提供理論依據(jù)。

總之，我們認(rèn)為：子宮平滑肌瘤是多因素、多種生長因子共同作用的結(jié)果，降低性激素水平，阻斷WT-1基因位點(diǎn)，均能達(dá)到阻止肌瘤生長或使其萎縮甚至消失的目的。