孕激素膜受體1在40例卵巢癌中的表達及意義

任峻青 鄭洪

（遵義醫學院附屬醫院病理科，貴州 遵義563003）

近年來發現孕激素膜受體1（PGRMC1）是一種新型膜激素受體，廣泛存在于細胞膜、微粒體及突觸膜上。PGRMC1是作為一種接頭蛋白并參與細胞信號轉導通路，與腫瘤細胞增殖，侵襲密切相關。PGRMC1在乳腺癌、結腸癌、卵巢癌和肺癌等多種腫瘤細胞和腫瘤組織系中高表達，表明PGRMC1促進腫瘤的生存和發展 。目前關于PGRMC1在卵巢癌發生、發展過程中作用少有報道，因此，本文探討PGRMC1表達水平和卵巢癌分期、分級的相關性，為卵巢癌的治療提供新的治療靶點?，F報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 采集遵義醫學院附屬醫院病理科2011－2013年卵巢漿液性囊腺癌石蠟標本40例，10%甲醛固定，石蠟包埋。年齡28～69歲，平均46.7歲，全部患者術前未化療，術后予以化療，具有完整的臨床病理資料。年齡 ＜50歲18例，≥50歲22例；腫瘤大?。?cm 11例，≥5cm 29例；病理分級：Ⅰ～Ⅱ期13例，Ⅲ期27例；有淋巴結轉移的10例，無淋巴結轉移的30例。另選擇正常輸卵管傘端上皮10例（來自尸檢，病理證實輸卵管上皮組織無異常者，年齡28～46歲，平均38.9歲）為對照組，漿液性囊腺瘤10例（年齡23～45歲，平均31.5歲），交界性腫瘤10例（年齡32～62歲，平均47.5歲）。

1.2 試劑 兔抗人PGRMC1一抗購自北京博奧森生物技術有限公司，抗體工作濃度1∶200，EnVision試劑盒購自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3 PGRMC1的免疫組化定位 每例石蠟標本脫蠟，水化；用3%H2O2阻斷內源性過氧化物酶活性。在pH 9.0的EDTA緩沖液中微波修復抗原后，加入已稀釋的一抗PGRMC1（1∶200）4℃孵育過夜；加入生物素標記的二抗，滴加DAB顯色劑顯色，蘇木素復染核，脫水、透明、封片。以PBS緩沖液代替一抗作空白對照，正常腎臟組織為陽性對照。

1.4 結果判定標準 細胞質染成淡黃色至棕黃色為陽性標志，將陽性細胞數和顯色強度分為3級：弱陽性（＋），陽性細胞數＜10%，顯色強度為淡黃色或僅個別細胞為黃至棕黃色；強陽性（＋＋＋），陽性細胞數＞60%，多數細胞為黃至棕黃色；中度陽性（＋＋）陽性細胞數及強度介于前兩者之間。

1.5 圖像分析 每張切片應用美國 MediaCybemetics公司生產的Image－ProPlus圖像分析軟件（IPP6.0）進行圖像分析平均光密度值（MOD）。

1.6 統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件分析，PGRMC1陽性表達率和卵巢癌臨床病理學計數資料采用卡方檢驗。

2 結 果

2.1 PGRMC1在卵巢癌中的陽性表達率 對照組10例，PGRMC1陽性表達率20%；良性組10例，PGRMC1陽性表達率30%，F＝12.370，P＝0.006；交界性組10例，PGRMC1陽性表達率50%；惡性組40例，PGRMC1陽性表達率72.5%。各組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。陽性部位主要以癌細胞胞漿內呈現棕黃色顆粒狀染色。見圖1。

2.2 PGRMC1在實驗各組的陽性表達量 對照組10例，MOD（0.0 180±0.00 789）；良性組10例，MOD（0.0 210±0.00 738），F＝14.648，P＝0.000；交界性組10例，MOD（0.0 320±0.0 103）；惡性組40例，MOD（0.0 470±0.01 870）。良性組與對照組比較，差異有統計學意義（P＞0.05）；交界性組與良性組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；惡性組分別與對照組、良性組、交界性組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。

圖1 PGRMC1在各組中的表達（×400）

2.3 PGRMC1的表達與卵巢癌臨床病理指標的關系 PGRMC1的表達與卵巢癌腫瘤大?。≒＝0.02）、病理分級（P＝0.011）密切相關，與年齡（P＝0.498）和臨床分期（P＝0.4）、淋巴結轉移情況（P＝0.838）無關。見表1。

表1 PGRMC1在卵巢癌中的表達及其與臨床指標的關系 （n＝40）

3 討 論

PGRMC1在多種腫瘤組織和腫瘤細胞系中高表 達［1－2］。 本 研 究 表 明，卵 巢 良 性 腫 瘤 組 織 中PGRMC1的表達水平相對于正常對照組來說增高不明顯（P＞0.05），且交界性組相對于良性組增高不明顯（P＞0.05），惡性組與正常組、良性組、交界組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。隨著惡性程度的增加，PGRMC1的陽性表達量顯著增多，與上述結果基本一致。可以推測PGRMC1在卵巢癌中過度表達。

Peluso等［3］研究顯示PGRMC1／Hpr6.6跨膜區的C末端參與孕激素抗正常顆粒細胞凋亡的調控，而PGRMC1與纖溶酶原激活物抑制劑RNA結合蛋白1（PAIRBP1）結合位點也在其C末端的70～130aa的位置，敲除PGRMC1表達后，可使3－H孕激素入胞率下降60%，孕激素抗卵巢癌細胞凋亡效應喪失。體內外PGRMC1均與卵巢癌細胞對順鉑的敏感度密切相關，敲除PGRMC1基因后，瘤細胞體外培養生長緩慢，荷瘤裸鼠瘤體明顯小于對照組［4］。因此，結合本實驗中卵巢漿液性囊腺癌組織中PGRMC1表達與臨床病理特征關系表明，在卵巢癌臨床病理特征分組中PGRMC1在各組中表達，組與組間比較有腫瘤大小、病理分級差異有統計學意義（P＜0.05）?？赏茰yPGRMC1在一定程度上減弱或阻止凋亡及阻斷凋亡通路引起細胞凋亡，腫瘤直徑越大、分化越差的卵巢癌PGRMC1表達較高，提示卵巢癌的發生與PGRMC1密不可分，PGRMC1可能是指示腫瘤進展的潛在標志物和治療腫瘤的潛在靶標分子。因此需進一步深入研究PGRMC1與卵巢癌發生的關系有助于尋找新的腫瘤標志物，將為卵巢癌的早期診斷提供理論和實驗依據。

［1］ H.Neubauer，S.E.Clare，W.Wozny，et al.Breast cancer proteomics reveals correlation between estrogen receptor status and differential phosphorylation of PGRMC1［J］.Breast Cancer Research，2008，10（5）：R85.

［2］ G.Crudden，R.Loesel，R.J.Craven.Overexpression of the cytochrome p450activator hpr6 （heme－1 domain protein／human progesterone receptor）in tumors［J］.Tumour Biology，2005，26（3）：142－146.

［3］ J.J.Peluso，X.Liu，M.M.Saunders，et al.Regulation of ovariancancer cell viability and sensitivity to cisplatin by progesterone receptor membrane component－1［J］.Journal of Clinical Endocrinloogy ＆ Metabolism，2008，93（5）：1592－1599.

［4］ 紀術峰，吳愛國，楊華峰.孕激素膜受體1在乳腺癌的表達及其生物學意義［J］.南方醫科大學學報，2012，32（5）：635－638.