垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2和β－連環蛋白的表達與其侵襲性的相關性研究

李偉強，楊勁松

(1.太康縣人民醫院，河南 周口461400;2.鄭州大學實驗動物中心，河南 鄭州450052)

垂體腺瘤常見的顱內神經系統腫瘤，大多數為良性，預后較好，但有部分患者具有一定的侵襲性，這與垂體腺瘤復發、惡性傾向等具有有關關系［1］。但是，目前關于垂體腺瘤的侵襲性機制及對預后的影響尚未完全闡明。基質金屬蛋白酶－2 和β－連環蛋白均是與腫瘤有關的具有多種功能的蛋白，作者采用免疫組化S-P 法檢測垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 和β－連環蛋白的表達，并分析兩者表達水平與垂體腺瘤侵襲性的相關性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 入組2010年1月至2014年6月鄭州大學第一附屬醫院神經外科和太康縣人民醫院神經外科開顱或微創手術切除的垂體腺瘤組織83 例，所有組織標本均經病理組織學確診，男47 例，女36 例，年齡31 ～76 歲，中位年齡45 歲;病理類型:泌乳素腺瘤35 例，生長激素腺瘤17 例，混合性腺瘤13 例，促腎上腺皮質激素腺瘤9 例，無功能性腺瘤9 例;根據Wilson改良Hardy 分類系統分級分期法［2］對全組87 例垂體腺瘤進行分期，根據分期結果將其分為2 類，其中侵襲性垂體腺瘤40 例、非侵襲性垂體腺瘤43 例。

1.2 免疫組化S-P 法檢測垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶-2 和β-連環蛋白的表達 所有標本均經質量分數4%甲醛固定、石蠟包埋，然后制成4 μm 切片，按照免疫組化S-P 試劑盒說明書進行垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 和β－連環蛋白表達檢測，并以已知陽性組織切片作為陽性對照，以PBS 代替一抗作為陰性對照。本研究所用鼠抗人基質金屬蛋白酶－2和β－連環蛋白單克隆抗體及免疫組化S-P 試劑盒均購自福州邁新生物工程有限公司。

1.3 結果評判 所有切片均在高倍鏡下，隨機取5 個視野，用全自動彩色病理圖像分析儀測定其灰度值，并取其平均數作為最終結果，灰度值越高，表達水平越低;灰度值越低，表達水平越高。

1.4 統計學處理 采用SPSS 17.0 進行數據處理，灰度值用±s 表示，2 組之間比較采用t 檢驗，并采用Pearson 相關分析法分析兩者的相關性，檢驗水準α=0.05。

2 結果

基質金屬蛋白酶－2 表達于垂體腺瘤細胞的胞漿內，β－連環蛋白表達于垂體腺瘤細胞的細胞膜及少量細胞漿內，兩者均染色呈淺黃色至棕黃色。根據圖像分析結果，我們發現，侵襲性垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 的灰度值為137.4 ±9.6，顯著低于非侵襲性垂體腺瘤的173.8 ±15.4，提示侵襲性垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 的表達水平顯著高于非侵襲性垂體腺瘤(P ＜0.05);侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環蛋白的灰度值為157.6 ±13.4，顯著高于非侵襲性垂體腺瘤的145.2 ±10.1，提示侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環蛋白的表達水平顯著低于非侵襲性垂體腺瘤(P ＜0.05)。經Pearson 相關分析法分析后發現，垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 和β－連環蛋白的表達呈負相關(r=－0.637，P ＜0.05)。

3 討論

垂體腺瘤常見的顱內神經系統腫瘤，發病率僅次于腦膠質瘤和腦膜瘤，垂體腺瘤大多數為良性，經微創或開顱手術切除后預后良好，但有部分患者腫瘤組織具有一定的侵襲性，使得腫瘤組織切除不干凈，易于復發，以及向周圍組織浸潤［1－3］。基質金屬蛋白酶－2是基質金屬蛋白酶家族成員之一，在細胞外基質的降解中具有重要作用，能夠促進細胞外基質的降解，破壞基底膜，使腫瘤細胞易于向周圍擴散，發生腫瘤的侵襲遷移，其已經被證實在胃癌、乳腺癌、宮頸癌等多種實體瘤中存在高表達，并促進腫瘤的浸潤轉移等［4］。本文結果顯示，侵襲性垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2 的表達顯著高于非侵襲性垂體腺瘤，提示基質金屬蛋白酶－2 可能在垂體腺瘤的侵襲性發生中具有促進作用，這與蔡華等［4］的研究結果一致。β－連環蛋白是由CTNNB1 基因編碼的一種多肽鏈蛋白質，相對分子質量約為92 000 ～95 000，其既是同型細胞間黏附連接的主要結構成分，又是Wnt 信號傳導的下游元件。正常情況下，β－連環蛋白大多與細胞膜上的E－鈣黏蛋白結合，形成復合體，介導同型細胞之間的黏附，維持上皮細胞的完整性和極性，精確調控細胞的遷移［4］;少量存在于細胞漿中的β－連環蛋白則發揮介導Wnt 信號傳導的作用［5］。研究［6－7］證實，多種惡性腫瘤組織中存在β－連環蛋白的異常表達，β－連環蛋白表達水平的高低可以作為獨立的腫瘤預后評估指標。本研究結果顯示，侵襲性垂體腺瘤組織中β－連環蛋白的表達水平顯著低于非侵襲性垂體腺瘤，提示減少β－連環蛋白表達可能具有誘發垂體腺瘤侵襲的作用，這與夏多貴等［8］的研究結果一致。另外，本研究結果還顯示，垂體腺瘤組織中基質金屬蛋白酶－2和β－連環蛋白的表達呈負相關關系，提示兩者在垂體腺瘤組織侵襲性發生的過程中相互影響。總之，垂體腺瘤組織中存在基質金屬蛋白酶－2 和β－連環蛋白的異常表達，其表達水平檢測可用于垂體腺瘤侵襲性的評估。

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