梅毒檢測中TRUST和TPPA應用價值的分析

方 菲 柯方妮

（中山醫科大學第一附屬醫院東山院區檢驗科，廣東 廣州 510080）

梅毒檢測中TRUST和TPPA應用價值的分析

方 菲 柯方妮

（中山醫科大學第一附屬醫院東山院區檢驗科，廣東 廣州 510080）

目的 對梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）檢測的臨床價值進行分析。方法 用TRUST和TPPA檢測1221份血清標本，并對檢測結果進行統計分析。結果 658份血清標本中，TRUST檢出陽性45份（6.84%）。563份血清標本中TPPA檢出陽性69份（12.26%）。二組之間陽性檢出率有顯著性差異（P＜0.005）。69份TPPA陽性血清標本中，用TRUST法檢測，其中陽性的有21份（30.44%），經治療后第一次復查TRUST仍為陽性者9份（13.04%），二次復查TRUST仍為陽性者2份（2.89%），失訪10份（14.49%）。結論 TRUST法檢測適用于梅毒篩查，隨訪療效，判斷復發或再次感染。TPPA法檢測準確可靠，適用于確診梅毒。二法聯合應用是一種理想組合，對梅毒的診斷可以減少漏診誤診，提高確診率。對于梅毒的有效防治，監測隨訪有重大意義。

梅毒；梅毒螺旋體；TRUST；TPPA

梅毒是由梅毒螺旋體（treponema pallidum）引起的一種全身性損害的性病。其臨床表現復雜呈多樣性，病程長，危害大。近年來我國梅毒發患者數呈急劇性上升趨勢。有報道指出［1］，在梅毒陽性檢出者中，隱性梅毒數量最多，分布較廣，增幅明顯。梅毒陽性檢出者幾乎覆蓋了所有的科室和所有的年齡段。梅毒檢測是防治監測該病重要而有效手段之一。因此，有必要對門診可疑患者和住院患者進行梅毒篩查。目前梅毒檢測有多種方法。一類是檢測非特異性抗體方法。如快速血漿反應素試驗RPR（rapid plasma regain），不加熱血清反應素試驗USR（unheated serum regain），甲苯胺紅不加熱血清實驗TRUST（toluidine red unheated serum test），性病研究實驗室試驗VDRL（renereal disease research laboratory test）等。另一類是檢測特異性抗體方法。如梅毒螺旋體血球凝集試驗TPHA（treponema pallidum hemagglutination assay），梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗TPPA（treponema pallidum particle agglutination assay），酶聯免疫吸附試驗ELISA（engyme linked immunosorbent assay）等。本文試以TRUST和TPPA組合聯用，對檢測結果進行分析，探討其特異性、敏感性和互補性在臨床合理應用中的價值。

1　材料與方法

1.1一般資料：收集2013年1至11月門診住院患者血清標本5007份。其中男性1771份，女性3236份，年齡1～97歲。用化學發光法檢測3786份，檢出梅毒陽性76份，陽性檢出率2.0%。用TRUST法檢測658份，檢出陽性45份，陽性檢出率6.84%。用TPPA法檢測563份，檢出梅毒陽性69份，陽性檢出率12.26%。

1.2試劑和儀器：TRUST檢測采用上海榮盛生物技術有限公司試劑盒。TPPA檢測采用日本富士瑞比歐株式會社試劑盒。

1.3檢測方法。TRUST：將50 μL患者血清與1滴TRUST試劑混合，按每分鐘100轉搖動8 min，肉眼觀察結果，可見紅色凝聚物為陽性；TPPA：試劑中的致敏顆粒與患者血清中的梅毒螺旋體抗體（TP）進行反應發生凝集，由此可檢測出TP抗體。

1.4統計方法：TRUST和TPPA陽性檢出率用χ2檢驗分析。

2　結 果

TRUST和TPPA陽性檢出率有顯著性差異，有統計學意義。χ20.005（1）=7.88，χ2=10.51，P＜0.005。梅毒陽性檢出者的性別、年齡段和科室分布無特殊可比性。69份TPPA陽性檢出者，用TRUST作療效隨訪檢測，其中TRUST轉陰者48份（69.56%），隨訪一次TRUST仍為陽性者9份（13.04%），隨訪二次TRUST均為陽性者2份（2.89%），失訪10份（14.49%）。

3　討 論

人體感染梅毒螺旋體后，發生一系列血清免疫學反應，產生并釋放出兩種抗體。一種是磷脂類物質，黏附在螺旋體上，形成新的復合抗原。此種抗原可刺激機體6周后產的抗磷脂類的自身免疫性抗體，即非特異性抗體，也稱反應素。另一種是直接針對梅毒螺旋體特異抗原的梅毒特異性抗體，主要成分是IgM和IgG，大約在感染4周后形成。

TRUST試驗用于檢測反應素，是VDRL試驗的一種改良方法。用炭顆料作為指示物，用特制的白紙卡替代玻璃反應板。所用的抗原是標準牛心肌脂抗原。血清不需要加熱滅活，節省了操作時間。肉眼可觀察試驗結果，并可以保存。TRUST試驗操作簡單快捷。經治療后患者的TRUST滴度隨著病情好轉而下降或因療效不佳而反復。抗類脂質抗體效價的消長曲線與臨床病情癥狀的變化相關性較好［2］。因此，用TRUST檢測梅毒，不但可作為梅毒的篩查，還可以用于療效的隨訪觀察，判斷復發或再次感染。TRUST試驗比ELISA和TPPA有更長的檢測觀察窗口期。缺點是某些自身免疫性疾病也有磷脂類物質產生和消失，導致假陽性發生［3］。當一至三期梅毒患者治療后，抗體隨之變化。有時TRUST陽性檢出率下降，又可以出現假陰性［4］。所以TRUST檢測要用TPPA檢測進行復核確診。

TPPA試驗用于檢測梅毒特異性抗體。該試驗是TPHA試驗的改良方法，可取代TPHA。在梅毒血細胞凝集試驗基礎上，以明膠顆粒為載體，吸附TP-Nichols株菌體抗原，克服了血細胞易自溶而造成的漏檢出弊端。TPPA檢測結果的穩定性好，不易出現假陽性［5］。檢測結果準確可靠，可作為臨床標準化的確診方法之一。已在國際上廣泛使用。患者抗梅毒治療后，梅毒抗原消失后很長時間內IgG仍可通過記憶細胞作用繼續產生，甚至終身可在血清中檢出TPPA持續陽性。TPPA滴度變化與病情變化不一致表明TPPA試驗不能作為評價療效或判斷復發或次感染的指標。

ELISA是一種基于基因工程的特異性檢測技術［6］。采用雙抗原夾心法，同時檢測梅毒IgM和IgG混合特異抗體。用基因重組工程技術，在體外表達得到了梅毒相應特異抗原，提高了ELISA檢測的靈敏度和特異度。在梅毒潛伏期產生的特異性抗體可被檢出。雖然對梅毒的早期診斷較好，但只能說明正在感染或曾經感染。ELISA成本低，效率高，操作簡單，但陽性時不能判斷梅毒的活動性程度，也有假陽性發生［7］。因而不能作為現癥梅毒確診指標，還須用TPPA檢測作確診。許多報告指出ELISA和TPPA二者相比較無統計學差異。二者均為高特異性，高敏感性的梅毒血清學診斷方法。

TPPA相對成本高，操作較復雜，耗時較長。但準確可靠，對早期梅毒檢出率也高，優于ELISA，有較高的臨床應用價值。本文認為TRUST和TPPA是理想的檢測組合，二者的顯著性差異由此得到取長補短。二者聯用對梅毒的篩查，診斷準確可靠，同時達到跟蹤療效，判斷復發或再次感染的多項目的。上述臨床應用范圍的復蓋，對梅毒的有效防治，隨訪監測有很大的實用價值。

［1］王華，張洪為，李代渝，等.綜合醫院住院患者梅毒感染檢出情況分析［J］.中華皮膚性病學雜志，2011，25（8）：618.

［2］王光超.皮膚性病學［M］.3版.北京：人民衛生出版社，1993：128.

［3］尹躍平.快速梅毒螺旋體抗體檢測試驗的實驗室初步評價［J］.嶺南皮膚性病雜志，2009，16（1）：11-14.

［4］林耀堂.3種梅毒血清學檢測方法臨床應用結果的比較［J］.中國傷殘醫學，2013，21（9）：301-302.

［5］程艷杰.梅毒螺旋體血清學檢測方法的實驗室評價［J］.中國皮膚性病學雜志，2005，19（8）：503-504.

［6］吳先玉.ELISA和TRUST兩種方法檢測梅毒結果分析［J］.中外醫學研究，2009，7（9）：176-179.

［7］張建平.三種梅毒血清試驗方法學評價［J］.現代檢驗醫學雜志，2010，25（6）：14-15.

R759.1

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1671-8194（2015）012-0096-02