不同色譜條件下測定奧美拉唑含量方法的比較研究

【摘要】目的　比較2種不同色譜條件下用高效液相色譜法檢測奧美拉唑含量的差異。方法 建立C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系，并分別測定3個不同廠家奧美拉唑的含量，對含量測定結果進行統計學分析。結果C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系測定三家不同廠家奧美拉唑的含量，差異均無統計學意義（P>0.05）。結論 2種不同色譜條件下對奧美拉唑進行含量測定，其測定方法無統計學差異。

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.13.137

作者單位：473000 河南省南陽市食品藥品檢驗所

Comparative Study on the Different Chromatographic Conditions of Determining Omeprazole Content

LI Yadong Nanyang Institute for food and drug control， Nanyang 473000， China

【Abstract】Objective To compare the content of omeprazole under differences chromatographic conditions for HPLC between two different methods. Methods The C18-methanol system and C8-acetonitrile system were established， and then used the systems to determinate the contents of omeprazole from 3 different manufacturers. Results The content determination of omeprazole from three different manufacturers were determined by C18-methanol methanol and C8-acetonitrile system. There were no significant differences between them（P>0.05）. Conclusion The two kinds of different chromatographic conditions for determining omeprazole have no significant difference.

【Key words】 Omeprazole， HPLC， Determination

奧美拉唑為《中國藥典》2010版收載的藥品，屬于第一代質子泵抑制劑，具有良好的抑制胃酸分泌的作用，臨床上主要用于治療胃潰瘍、十二指腸潰瘍、應激性潰瘍、反流性食管炎和胃泌素瘤等疾病。藥理學上關于奧美拉唑的測定方法主要是高效液相色譜法（HPLC法） ［1］，然而，目前關于不同色譜條件下測定的奧美拉唑含量是否相同的研究報道較少。因此，本研究通過比較不同色譜條件下測定奧美拉唑含量的變化，探討不同色譜條件對測定結果的影響。5 μm）；流動相：甲醇-水-磷酸-三乙胺（160:40:0.12:0.3）；流速：0.8 ml/min；檢測波長：320 nm；柱溫為室溫，迸樣量20 μl。

2.1.2　C 8-乙腈體系 色譜柱：TIANHERC 8柱（200 min×46 mm，5 μm）；流動相：0.01 mol/LNa 2HP0 4-乙腈（65:35），用稀磷酸調pH至7.8；流速：0.8 ml/min；檢測波長：320 nm；柱溫為室溫，迸樣量20 μl。

2.2　對照品溶液的制備

精密稱取奧美拉唑對照品20 mg，置于100 ml量瓶中，加甲醇稀釋定容，搖勻，得到奧美拉唑儲備液200 μg/ml。量取儲備液l ml加入10 ml量瓶中，分別在2個體系下加流動相稀釋至刻度，得到對照品溶液20 μg/ml。

2.3　供試品溶液制備

精密稱取奧美拉唑腸溶片，研細稱取適量加入50 ml量瓶中，用流動相超聲10 min溶解，稀釋至刻度，取適量3 000 r/min離心5 min，取上清液5 ml置于10 ml量瓶中定容備用。

2.4　標準曲線的制備

分別精密吸取混合對照品溶液1、2、4、10、15 μl，注入液相色譜儀中，測定兩種對照品的色譜峰面積。縱坐標Y為峰面積，橫坐標X為含量，繪制標準曲線，結果表明進樣量與峰面積呈良好的直線性關系。

2.5　穩定性試驗

取各供試品溶液，分別于配制后0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、

1　實驗儀器與試劑

1.1　實驗儀器

Agilent高效液相色譜儀，CX-250型超聲波清洗儀器，Spectra Focus紫外檢測器，輸液泵，Anstar色譜工作站，BS30110型電子天平。

1.2　試劑

奧美拉唑對照品（海口奇力制藥有限公司提供，批號：1050618）。廠家甲：奧美拉唑腸溶膠囊（阿斯利康制藥有限公司，每粒20 mg，10950086）。廠家乙：奧美拉唑腸溶片（辰欣藥業股份有限公司，每片20 mg，20083815）。廠家丙：奧美拉唑腸溶片（哈藥集團三精制藥諾捷有限責任公司，每片20 mg，20059393）。甲醇和乙腈為色譜純，其余試劑為分析純。

2　方法

2.1　色譜條件

2.1.1　C 18-甲醇體系 色譜柱：TIANHERC 18柱（200 min×4.6 mm，8.0、10.0、12.0 小時，按樣品含量測定各對照品含量。

2.6　測定方法

分別在兩種色譜條件下，將配制好的供試品溶液，分別測定3批，在上述兩種色譜條件測定，計算RSD，對結果進行統計學分析，比較兩種分析方法是否存在顯著性差異。

2.7　統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件包進行統計分析，不同色譜條件下奧美拉唑含量測定結果比較采用t檢驗， P＜0.05為差異有統計學意義。

3　結果

3.1　穩定性測定

2種不同方法體系下分別于0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0后進樣，C 18-甲醇體系和C 8-乙腈體系下RSD分別為1.08%、1.11%，表明在兩種不同體系下，奧美拉唑溶液24 h內均穩定。

3.2　不同色譜條件下奧美拉唑含量測定結果比較

C 18-甲醇體系（廠家甲95.24/93.31，廠家乙105.22/106.57，廠家丙108.19/107.64）與C 8-乙腈體系（廠家甲96.17/ 94.28，廠家乙106.37/104.98，廠家丙108.13/106.94）在測定三家不同廠家奧美拉唑的含量，經過t檢驗，差異均無統計學意義（ P＞0.05）.

4　討論

目前，《中國藥典)和國家藥品監督管理局《新藥轉正標準》中關于奧美拉唑的測定方法分別為C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系。另外，也有研究結合試劑的毒性和試驗成本等問題二確定C 8-甲醇體系。王旭等人 ［2］研究結果表明，采用C 18-甲醇體系、C 8-乙腈體系與C 8-甲醇體系測定奧美拉唑含量，結果顯示三種方法測定奧美拉唑的含量差異無統計學意義。本研究結果表明，C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系在測定三家不同廠家奧美拉唑的含量，經過t檢驗，差異均無統計學意義（ P＞0.05），與上述研究結果一致。在進行制劑含量測定試驗時，相同廠家同一批號的奧美拉唑制劑在C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系中的測定結果也是一致的，無顯著性差異，表明C 18-甲醇體系與C 8-乙腈體系下測定奧美拉唑無顯著性差異。而對于不同廠家上述兩種方法測定奧美拉唑的含量略有不同，但無統計學差異。本研究中甲廠家的含量測定結果稍低于乙、丙兩廠家，可能由于不同廠家使用藥物原料藥來源不同，也可能與生產過程中使用的輔料、配方、生產工藝等因素存在差異有關。