兩種膽紅素測定方法在生化分析儀上的比較

李偉 林鵬277400山東省棗莊市臺兒莊區(qū)人民醫(yī)院

兩種膽紅素測定方法在生化分析儀上的比較

李偉 林鵬
277400山東省棗莊市臺兒莊區(qū)人民醫(yī)院

目的：探討改良J-G法和釩酸鹽氧化法測定血清總膽紅素和直接膽紅素的效果。方法：收集患者的血液標(biāo)本，采用改良J-G法和釩酸鹽氧化法測定血清總膽紅素和直接膽紅素，比較測定結(jié)果。結(jié)果：兩種測定方法的測定結(jié)果無顯著性差異。結(jié)論：釩酸鹽氧化法與改良J-G法相比，測定直接膽紅素和總膽紅素具有檢測范圍大，抗干擾能力強等特點，更適合臨床常規(guī)檢測。

血清總膽紅素；血清直接膽紅素；測定

膽紅素是我們在臨床工作中最常測定的指標(biāo)之一，其能夠較好地反映被檢測者的肝功能，對疾病的診治具有重要的意義。目前，多數(shù)檢驗科室都使用改良J-G法測定膽紅素，但是，該種檢測方法容易受到其他一些因素的影響，從而使得檢測結(jié)果具有較大的誤差，對臨床的診治產(chǎn)生一定的影響。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，醫(yī)療設(shè)備也正在快速的進步和發(fā)展，臨床中測定血清膽紅素方法也越來越多，選擇一種更為合適的檢測方法變得越來越重要。為此，本研究用改良J-G法和釩酸鹽氧化法分別對血清總膽紅素（TBI）和血清直接膽紅素（DBI）進行測定，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

材料：①儀器：日立-7600全自動生化分析儀。②試劑：改良J-G法試劑，濰坊3V生產(chǎn)。釩酸鹽氧化法試劑，上海科華生產(chǎn)。③標(biāo)準(zhǔn)：朗道校準(zhǔn)液，朗道質(zhì)控液，各試劑盒配套標(biāo)準(zhǔn)液。④對象：我院門診患者以釩酸鹽法測定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分為5組：總膽紅素（2.5～366.2mmol/L）50例；總膽紅素正常、直接膽紅素＜7.0mmol/L 50例；總膽紅素正常、直接膽紅素＞7.0mmol/L 50例；其中脂血標(biāo)本在50例，總膽固醇（TC）＞7.76 mmol/L，甘油三酯（TG）正常者20例，TC正常，TG＞4.5 mmol/L 10例，TC＞7.76 mmol/L，TG＞4.5 mmol/L 10例，溶血標(biāo)本20例，輕度溶血標(biāo)本10例。

方法：在日立-7600全自動生化分析儀上根據(jù)各試劑要示設(shè)置通道和參數(shù)。用釩酸鹽法和改良J-G法進行測定。并進行統(tǒng)計學(xué)分析。

結(jié)果

對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)處理，回歸方程Y=0.993χ-0.363，相關(guān)系數(shù)γ=0.9989，配對t檢驗，t=0.602，P＞0.05，兩法結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

討論

當(dāng)Hb＜4.5 g/L時，對改良TG法測定結(jié)果無明顯干擾，但是當(dāng)Hb＞6 g/L時，則會對測定結(jié)果形成較為嚴重的影響。當(dāng)TC 6mmol/L時，則幾乎不會影響到檢測結(jié)果，改良TG法膽紅素與重氮試劑反應(yīng)后，加入堿性酒石酸鈉，使反應(yīng)液堿化到pH 13左右，測定產(chǎn)物吸光度，顯色十分穩(wěn)定，靈敏度增高，盡管Hb與重氮試劑反應(yīng)產(chǎn)物可破壞偶氮膽紅素或被亞硝酸氧化成高鐵血紅蛋白可能對測定產(chǎn)生負向干擾，但其干擾程度較輕，一般溶血對測定結(jié)果影響不大。

釩酸鹽氧化法對總膽紅素測定的準(zhǔn)確性，在684mmol/L范圍內(nèi)線性較好，對直接膽紅素測定準(zhǔn)確度在＞205mmol/L時，線性較差，當(dāng)血紅蛋白40 g/L時，對釩酸氧化法測定無干擾。釩酸鹽氧化法測定總膽紅素和直接膽紅素不僅能有效抵抗溶血和脂血標(biāo)本的干擾，其統(tǒng)計數(shù)據(jù)均位于各種方法的前列，符合統(tǒng)計學(xué)以及臨床要求，而且穩(wěn)定時間長開啟保存15d，適合大批量標(biāo)本的自動化檢測，綜合性能較好。其重復(fù)性、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性、線性范圍都能滿足臨床要求，試劑成本低廉，容易被患者接受。據(jù)此我們推薦釩酸鹽氧化法測定血清總膽紅素和血清直接膽紅素，它將為臨床提供更準(zhǔn)確，更穩(wěn)定的測定結(jié)果。

研究結(jié)果顯示，兩種檢測手段在臨床中都可被使用，但是兩種方法相比較后可發(fā)現(xiàn)，其各有優(yōu)劣勢，重氮法的檢測雖然更加簡便，但干擾因素多。在本研究中，我們通過使用雙試劑法消除了血清色澤和脂血混濁度對檢測結(jié)果的影響，此外，也在很大程度上降低了直接膽紅素的假性升高。但是，一些其他的因素，如嚴重溶血、黃疸標(biāo)本等還是會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大的影響，從而影響其檢測的精確度。而采用膽紅素氧化酶法檢測，雖然可能受到的干擾因素較少，但是檢測時線性范圍狹窄，并且在檢測的過程中其所使用的酶對檢測結(jié)果有著重要的影響，其保存時間較短，一般在開啟后只能保存7d，價格也相對較高，會大大增加患者的看病負擔(dān)，使得其在臨床使用中受到一定的限制。釩酸鹽法測定總膽紅素和直接膽紅素，除了可以在很大程度上降低標(biāo)本對檢測結(jié)果的影響外，并且其統(tǒng)計數(shù)據(jù)均位于各種方法的前列，試劑的保存時間也相對較長，一般可以在開啟后保存15d，從而使其在臨床使用中具有明顯的優(yōu)勢，適合大量標(biāo)本的檢測，并且檢測結(jié)果更為準(zhǔn)確，穩(wěn)定性良好，此外，其價格也相對較低，不會增加患者的看病負擔(dān)，容易被多數(shù)患者所接受。所以，我們更加傾向于在臨床工作中使用釩酸鹽氧化法測定血清總膽紅素和直接膽紅素。但是，怎樣有效地降低其檢測結(jié)果的影響值得我們在今后的研究中進一步探討和解決。

Com parison of tw o m ethods form easuring bilirubin in biochem ical analyzer

LiWei,Lin Peng
The People's HospitalofTaierzhuang District,Zaozhuang City,Shandong Province 277400

Objective：To investigate the effect of themodified J-G method and the vanadium oxide oxidation method for the determination of total bilirubin and direct bilirubin.Methods：Blood samples of patients were collected.Serum total bilirubin and directbilirubin were determined by using themodified J-Gmethod and the vanadium oxidemethod.We compared the results of the assay.Results：There was no significant difference between the two methods.Conclusion：Compared with the modified J-G method,the vanadium oxide oxidation method for the determination of total bilirubin and direct bilirubin had many advantages, such as large detection range,stronganti-interferenceability and so on,itwasmore suitable for routine clinicaldetection.

Serum totalbilirubin；Serum directbilirubin；Determination

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.65