用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質量評價指標探討臨床用藥的安全

安敬美273400山東省費縣人民醫院

用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質量評價指標探討臨床用藥的安全

安敬美
273400山東省費縣人民醫院

目的：以鹽酸小檗堿為對照依據，探討中藥質量確定控制指標的科學性，同時作為臨床安全用藥的憑據。方法：以HPLC對鹽酸小檗堿在黃連中的含量進行檢測，然后通過對其在飲片、藥對以及復方制劑3種不同藥品中的含量、用藥合理性與療效對比，研究其在臨床用藥中的可靠性與有效性。結果：黃連及其藥對以及復方制劑中含鹽酸小檗堿（5.49±0.067）％～（0.12±0.007）％，而黃柏及其藥對以及復方制劑中含鹽酸小檗堿（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％。結論：中藥藥效得以發揚主要依靠的是藥效組分物質，本次研究中，鹽酸小檗堿在黃連、黃柏與其藥對還有復方制劑的含量遠遠小于臨床用藥標準。

鹽酸小檗堿；黃連、黃柏及其藥對以及復方制劑；含量及安全性研究

本文以HPLC對鹽酸小檗堿在黃連中的含量進行檢測，然后通過對其在飲片、藥對以及復方制劑3種不同藥品中含量情況以及各個藥物的療效情況進行統計，同時展開對比，現報告如下。

資料與方法

藥品選擇：鹽酸小檗堿對照樣品（中檢所，110713-200911）、黃連、黃柏、木香、梔子和蒼術。所有藥品均與《中國藥典》標準相符，復方劑：白頭翁湯，黃柏蒼術湯、葛根芩連湯以及黃連解毒湯。

儀器選擇：色譜儀（紫外線檢測儀器規格：SPD-15C；四元泵規格：LC-SC；自動進樣器規格：SIL-1OAF，電子天平（規格：BP110S與BT25S），冷凍干燥器（規格：NB4X Scientz1ON）。

實驗方法：首先進行溶液配制，可以分為對照組與試驗組的溶液配制。即前者可以采用甲醇對鹽酸小檗堿進行溶解，配比0.1g/L的溶液；后者需要配比醇提取物以及水提取物，醇提取物配比方法：以40mg的黃連以及黃柏粉溶解在甲醇鹽酸混合液中（比例100：1），過超聲半小時，待冷卻后取10mL放在量瓶中定容（采用甲醇）；水提取物的配比方法：取定量的黃連、黃柏與其藥對、復方制劑，加入10倍量的水以電熱套煎煮20min，濾掉殘渣，對濾液進行低壓濃縮，同時把握壓縮溫度60℃左右，當體積達到標準后停止濃縮，取兩種提取物溶液再次以甲醇進行定容，完成以上所有步驟后，將定容完的溶液轉移至50mL大量瓶中。

條件和方法：①色譜柱：C18（4.6 mm×250mm×5μm），波長：345 nm；流動相：乙腈與0.05mol/L磷酸二氫鉀進行（50：50）配比，此外每100mL配比溶液配比0.4 g十二烷基磺酸鈉，pH以磷酸調整為4.0左右，進樣10μL。②測定與含量計算：分別取對照溶液、配比的醇、水提取物作為測定對象，進樣后測定數據，再以外標法進行計算，結果顯示鹽酸小檗堿色譜的峰值時間12min，而鹽酸小檗堿色譜和鄰近色譜的譜峰有明顯區分，符合相關規定標準。③重復步驟2的測定與計算，同時得出結果，鹽酸小檗堿含量RSD 1.09％。④線性分析：取鹽酸小檗堿對照品，配比成五種不同濃度的溶液，濃度分別為0.0404 g/L、0.0606 g/L、0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，過濾進樣，通過計算峰面積，可得結果分別為：1559516、2255120、2888724、3777364以及4457654，由此推算 線 性 方 程 ：Y=36230297.0297X+60267.6（R2=0.9973）。⑤回收率實驗：去6份黃連進行分組，然后在其中加入稱量好的鹽酸小巢堿對照品，根據流程1的步驟完成溶液配比，同時獲取配比好的溶液1mL，在其中加入甲醇鹽酸混合液（比例100∶1），將溶液二次配比成10mL的3份不同濃度的溶液，濃度分別為0.0808 g/L、0.1010 g/L以及0.1212 g/L，依然遵循步驟2的進樣過濾流程，最后獲得平均回收率100.01％，RSD值2.07％。⑥多次操作稀釋以上對照組溶液，過濾進樣（標準：0.45μm），可測譜峰高是基線噪聲的10倍左右，定量限1.8mg。⑦用以上測量法分別測量對照組與實驗組配比的溶液，統計鹽酸小檗堿含量。

結果

含量動態分析：根據檢測結果，對于黃連、黃柏水提取物而言，鹽酸小檗堿溶出率分別為58.91％與34.78％，而兩者藥物的水提取物方面，溶出率分別為2.28％～14.93％與3.72％～13.60％；兩者混合的水提取物方面，溶出率27.06％；復方劑方面，兩者水提取物的鹽酸小檗堿溶出率分別為15.42％與5.95％，而混合復方劑方面，則為7.86％～24.18％。

中藥質量評價的合理性：傳統鹽酸小檗堿用量300～600mg/次，日用量不得超過3次。而黃連的日用量2～5 g，即包含61.4～153.5mg的鹽酸小檗堿（含水的提取率）；黃柏的日用量3～12 g，其中含35.4～141.6mg的鹽酸小檗堿。而本次研究結果表明：黃連、黃柏及其藥對以及復方制劑中的劑量僅為《中國藥典》標準的20％～50％左右，明顯低于用藥標準。

各類中藥中鹽酸小檗堿的藥效對比：以上檢測結果表明，黃連、黃柏及其飲片、藥對和復方制劑的鹽酸小檗堿的成分含量較低，而黃連及其藥對以及復方制劑中鹽酸小檗堿含量要低于目前規定用藥標準（有效成分5.5％以上）的5.1～45.8倍不等，若計算中考慮提取液的差異誤差，根據水提取率，預估其鹽酸小檗堿含量應低于用藥標準含量的2.8～25.6倍；而對于黃柏及其藥對以及復方制劑中鹽酸小檗堿含量而言，也低于目前規定用藥標準，若計算中考慮提取液的差異誤差，根據水提取率[1]，預估其鹽酸小檗堿含量低于標準含量的1.2～9.07倍不等。此外，如果與單一藥物日服用標準量進行對比，兩者的含量僅為該標準量的25％～83.33％。

鹽酸小檗堿的用量與中藥標準的關聯性分析：對于藥劑質量控制來說，《中國藥典》雖然有明確指出于黃連的質量由鹽酸小檗堿、表小檗堿、黃連堿、巴馬汀4種指標影響，而黃柏則是由鹽酸小檗堿與黃柏堿進行影響，但依舊已經包含了藥效成本，而且檢測統計中顯示，黃連與黃柏兩種中藥及其藥對以及復方制劑中鹽酸小檗堿含量遠低于《中國藥典》中的要求標準，而且也要對于臨床單一用藥的規定標準。

討論

作為生物堿的一種，鹽酸小檗堿可以有效治療腸炎、痢疾等嚴重病癥，而且其可以減少細菌的菌毛，減低其附著力，同時也可以作為鈣通道的拮抗劑。本次研究的側重點是以中藥傳統的黃連、黃柏及其飲片、藥對和復方制劑為標準[2]，通過研究其中鹽酸小檗堿的含量數據，并且與現今規定標準數據進行對比，作為整體臨床安全用藥的依據，同時也是對于目前的臨床的有效性和安全性提供指導和提示依據，從而保證臨床用藥的規范性和有效性。

[1] 師永清,康淑荷,王愛軍.HPLC法同時測定黃連雙清丸中梔子、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿和大黃素的含量[J].藥物分析雜志,2013,9（9）：1612-1615.

[2] 侯藝輝,張貴君,徐蓓蕾.用鹽酸小檗堿作為黃連等中藥質量評價指標探討臨床用藥的安全性和有效性[J],中國實驗方劑學雜志,2012,9（18）：129-132.

To discuss the safety of clinicalmedication with the quality evaluation index of berberine hydrochloride for Chinese goldthread and other Chinesemedicine

An Jingmei
The People'sHospitalofFeiCounty,Shandong Province 273400

Objective：Taking berberine hydrochloride as the reference,to explore the scientific nature of quality control index of Chinese medicine,at the same time,to provide the evidence of clinical safety medication.Methods：The content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread was detected with HPLC,then,we compared the content,rationality and efficacy ofmedicine of it in pieces,coupletmedicines and compound preparation,to study the reliability and validity of the clinicalmedication.Results：The contentof berberine hydrochloride in Chinese goldthread and its coupletmedicines and compound preparation were（5.49± 0.067）％～（0.007±0.12）％.The content of berberine hydrochloride in golden cypress and its coupletmedicines and compound preparation were（3.37±0.064）％～（0.13±0.005）％.Conclusion：Chinesemedicine can carry forward.Itmainly depended on the drug substance,the content of berberine hydrochloride in Chinese goldthread and golden cypress and its coupletmedicines and compound preparationweremuch less than the standard ofclinicalmedication in this study.

Berberine hydrochloride；Chinese goldthread and golden cypress and its couplet medicines and compound preparation；Contentand safety studies

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.28.6