病理切片制作過程中常見問題及處理對策

郭海燕　王志生　王亦飛　吳巍

病理切片制作過程中常見問題及處理對策

郭海燕王志生王亦飛吳巍

目的 探討病理切片制作過程中常見問題及處理對策。方法 選取我院病理切片壞片512件，分析其相關(guān)因素及處理對策。結(jié)果 病理切片制作過程中包埋切片、標(biāo)本固定、染色固封三個過程導(dǎo)致壞片幾率較高。試劑試藥、器械原因、環(huán)境原因是導(dǎo)致壞片的主要因素。結(jié)論 嚴(yán)格規(guī)范病理切片制作過程中的各項(xiàng)操作是降低壞片率的關(guān)鍵。

病理切片；常見問題；原因分析

病理組織切片技術(shù)在病理實(shí)驗(yàn)室中是較為基本的一種方法，在臨床外科病理中是最為基本的一種形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)[1]。病理組織切片制作質(zhì)量是否符合標(biāo)準(zhǔn)，對于病理診斷準(zhǔn)確性具有一定影響。本文選取病理切片壞片512件，分析其相關(guān)因素及處理對策，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我院2012年1月～2014年3月病理切片壞片512件。

1.2方法

統(tǒng)計(jì)分析在病理切片制作過程中出現(xiàn)壞片環(huán)節(jié)及引發(fā)此情況發(fā)生的相關(guān)原因，并總結(jié)其相應(yīng)對策。

2　結(jié)果

在本文所選取的512例壞片病理切片中，包埋切片、標(biāo)本固定、染色固封三個過程造成的壞片比例較高，其所占比率分別為34.18%（175/512）、21.48%（110/512）、19.53%（100/512）；其次為取材與添加試劑試藥，分別占14.26%（73/512）、10.55%（54/512）；造成壞片主要原因?yàn)椴僮鞑划?dāng)306例（59.77%），試劑試藥54例（10.55%），器械原因143例（27.93%），環(huán)境原因9例（1.76%）。

3　討論

3.1組織標(biāo)本固定

當(dāng)臨床醫(yī)生獲得病理標(biāo)本后，需及時將標(biāo)本放置到有充足固定液的容器中，固定液量通常為標(biāo)本體積的4～5倍，也可在15～20倍范圍[2]。大標(biāo)本或存在包膜標(biāo)本需切開固定，在切開時間距保持1 cm左右，且注意不將其完全斷開，需保留標(biāo)本原本形狀。所用固定時間需根據(jù)標(biāo)本大小進(jìn)行確定，小標(biāo)本通常需≥4 h，大標(biāo)本通常≥8 h，盡量避免出現(xiàn)固定未及時或無充分性的情況發(fā)生，造成標(biāo)本干涸或腐敗情況導(dǎo)致無法順利制片。

3.2標(biāo)本取材規(guī)范化

將標(biāo)本完全固定后進(jìn)行取材。取材過程需盡可能去掉多余或無相關(guān)性組織，切面需保持平整性。小標(biāo)本通常全部進(jìn)行制片，大標(biāo)本則需在病變位置、病變與正常組織交界位置多處進(jìn)行取材。取得的組織塊需注意形狀具有規(guī)則性，大小合理，薄厚保持一致性，通常為1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm[3]。有的組織在取材時則具有較高靈活性，組織質(zhì)硬韌時則取薄一些，組織具有一定疏松性時則適當(dāng)取厚，當(dāng)全喉切除時則制作大切片。在對骨組織進(jìn)行取材時則需經(jīng)充分脫鈣后實(shí)施，以大頭針輕扎骨組織能夠穿入則可。在取材過程中避免用力擠壓，防止組織因受壓而出現(xiàn)變形情況。

3.3及時更換試劑

切片過程若試劑濃度出現(xiàn)變化，則往往對組織脫水、透明、浸蠟效果造成一定影響，有的試劑由于揮發(fā)而混至其他試劑中，甚至使得病理組織受到一定污染，由此出現(xiàn)誤診現(xiàn)象。所以在制片過程中需觀察試劑變化，按照標(biāo)本量大小立即更換試劑，保證組織處理具有合理性。

3.4嚴(yán)格執(zhí)行包埋及切片操作

對于碎小組織需包埋到同一個平面上，在包埋時經(jīng)熱鑷子處理使得預(yù)制好蠟塊表面進(jìn)行熔化，從而使得碎組織完全包埋到同一平面，在表面發(fā)生初凝時，及時以平滑金屬板對其進(jìn)行片刻輕壓。小塊組織需進(jìn)行線狀包埋，大塊組織則需在包埋時進(jìn)行壓平處理。對于囊壁、管壁組織或操作突起組織需及時進(jìn)行包埋或沿突起縱切面進(jìn)行包埋，注意觀察各個層次。在進(jìn)行切片前需確保刀具有鋒利性，避免切片出現(xiàn)斷裂、破碎情況[4]。蠟塊切片機(jī)需進(jìn)行良好固定，避免對切片刀及組織塊造成損傷。切片確保完整性，需將每塊組織完全切出，且需切至最大面，避免出現(xiàn)漏診情況。蠟片出現(xiàn)彎曲極有可能因刀鋒不均勻，切片刀并未磨直，切片刀與蠟塊無平行性。切片發(fā)生裂痕極有可能是切片刀存在缺口，石蠟中出現(xiàn)雜質(zhì)，組織中存在鈣化、骨片或線結(jié)，或是棉紙纖維等。當(dāng)切片存在不連片現(xiàn)象，切不下片，切片較厚或切片后蠟塊呈現(xiàn)白色，內(nèi)陷組織無良好脫水，一般需將蠟塊進(jìn)行溶解，取出組織，置入加熱水浴的丙酮內(nèi)（80℃），持續(xù)30～60 min，然后予以透明浸蠟包埋切片。

3.5合理染色封固

注意把握烤片條件，通常60℃烤片持續(xù)0.5～1 h；加強(qiáng)對脫蠟的重視，避免因脫蠟不干凈而對著色造成影響；且應(yīng)加強(qiáng)對鹽酸乙醇分化的重視避免因分化效果不佳而導(dǎo)致染色失敗[5]。且樹膠稠度需保持適度，避免溢膠或封片不完全、空泡現(xiàn)象發(fā)生。將切片固封后，需立即貼標(biāo)簽，避免發(fā)生混淆情況。

[1] 張中海. 病理切片制作過程中常見問題及原因探析[J]. 吉林醫(yī)學(xué)，2011，32（27）：5761.

[2] 孫巖. 病理組織切片染色中的常見問題及解決方法[J]. 中國醫(yī)藥指南，2013，11（28）：578-579.

[3] 王曉鴻，曹婉維. 制作優(yōu)質(zhì)HE病理組織切片的要素[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥，2011，6（6）：135-136.

[4] 陳順平，朱育連，鄭云，等. HE染色常規(guī)石蠟病理組織切片烘烤溫度與時間關(guān)系的探討[J]. 診斷病理學(xué)雜志，2013，20（2）：12.

[5] 辛英，朱兆霞，胡麗，等. 土豆片外敷在抽血外滲中的應(yīng)用[J].中國療養(yǎng)醫(yī)學(xué)，2013，22（4）：350-351.

The Common Problems in the Process of Making Pathological Slices and Countermeasures

GUO Haiyan WANG Zhisheng WANG Yifei WU Wei, The Tumor Hospital of Jilin Province, Changchun 130021, China

Objective To explore the common problems in the process of making pathological section and countermeasures. Methods In our hospital pathological bad piece 512, analyze the related factors and treatment measures. Results The pathological process of making embedded sections, specimens were fixed, stained solid three processes lead to bad piece of higher probability. Reagents reagent, instrument reason, environmental reasons are the main factors which lead to bad film. Conclusion Strictly regulate the operation pathological production process is key to reduce the rate of bad piece.

Pathological, Common problem, Reason analysis

R35

B

1674-9308（2015）09-0184-01

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.158

130021 長春，吉林省腫瘤醫(yī)院

吳巍，E-mail：wuwei666@163.com