任彩虹
SOX9與NM 23基因在前列腺癌中的表達
任彩虹
目的 探討SOX9、NM 23基因在前列腺癌中的表達。方法 選取16例前列腺癌患者與24例前列腺良性增生患者,取其病理組織采用實時熒光定量PCR測定其mRNA表達量。結果 前列腺癌組患者NM 23、SOX 9 mRNA表達量與前列腺增生組患者比較明顯更高,差異均有統計學意義(P<0.05)。結論 通過對NM 23、SOX9 mRNA表達量進行測定可為前列腺癌臨床診斷提供可靠依據。
前列腺癌;NM 23基因;SOX 9基因;表達
前列腺癌是一種老年男性非常多見的惡性腫瘤疾病,根據美國調查數據顯示,前列腺癌在惡性腫瘤發病率中排首位,死亡率則排第二位[1]。伴隨著中國經濟的快速發展,醫療水平的提升,人們的壽命普遍延長,但因飲食結構和生活習慣等變化,使得我國的前列腺癌患者的發病率也呈現為逐年遞增的趨勢,并發展成為了我國男性泌尿系統常見腫瘤疾病。目前,在前列腺癌的臨床診斷中,主要采用血清PSA、直腸指診、經直腸前列腺超聲等手段,但這些方法的誤診率和漏診率相對較高。隨著基因檢測技術的進步,不少學者紛紛指出通過對SOX9與NM23基因進行測定,可有效掌握前列腺癌的病變進程,為臨床診斷提供客觀的依據。現結合我院前列腺癌患者SOX9與NM23基因表達,對其用于前列腺癌診斷價值進行探討。有關情況報道如下。
1.1 一般資料
收集我院2014年1月~2015年6月泌尿外科接診的24例前列腺良性增生患者與16例前列腺癌患者,所有病理組織均來自經尿道前列腺電切術或者前列腺根治術等。所有樣本均在獲得后置于存有液氮的瓶內速凍保存。其中PCa患者平均年齡(71.5±1.54)歲;BPH患者平均年齡(63.6±2.54)歲。并根據石蠟切片診斷結果Gleason分級。
1.2 SOX9與NM23基因mRNA定量檢測
1.2.1 儀器與試劑 (1)儀器:運用熒光定量PCR儀(ABI 7500)與配套分析軟件。(2)試劑:10×PCR Buffer、熱啟動Taq酶、Rox Dye Reference等。
1.2.2 測定方法 (1)提取RNA:向速凍瓶中加入Trizol液,并放置于勻漿機行勻漿處理獲得RNA;(2)采用Takara Taq HS試劑;(3)通過熒光定量PCR儀與熒光定量PCR分析軟件;(4)對mRNA進行提取;(5)經NCBI的gene bank,對NM23以及SOX9基因的相關資料進行檢索,獲取NM23以及SOX9基因的相關uniSTS 和Normal mRNA序列。通過Vextor NT6.0軟件對NM23以及SOX9基因的相關uniSTS擴增片段中Normal mRNA位置進行定位,長度選取為100~300 bp。再通過NCBI中的e-PCR軟件與Blast軟件對該片段的特異性進行分析,排除重復引物與特異性較差的引物。按照KLK11基因與TMPPSS2基因中的相關uniSTS和mRNA序列,按照反轉錄標記與雜交的要求及ePCR結果,對特異性較佳的序列進行篩選,同時完成NM23以及SOX9基因的uniSTS引物序列與探針序列的制作;(6)采用實時熒光定量PCR對RNA樣本進行測定;(7)完成標準曲線的制作;(8)采用相對定量法對數據進行處理。
1.3 統計學處理
應用SPSS軟件處理數據,分別對良性前列腺增生癥和前列腺癌患者的NM23以及SOX9 mRNA表達量進行獨立樣本t檢驗。P <0.05為差異具有統計學意義。
通過對前列腺癌患者與前列腺增生患者NM23、SOX9基因進行測定。結果顯示,前列腺癌組NM23 mRNA表達量為(4.38±0.75),SOX9 mRNA表達量為(9.18±0.99);前列腺增生組NM23 mRNA表達量為(3.01±0.76),SOX9 mRNA表達量為(4.06±0.82)。前列腺癌組患者NM23、SOX9 mRNA表達量均高于前列腺增生組患者,對比差異均有統計學意義(t1=11.294,t2=34.795,P<0.05)。
近幾年來,在前列腺癌臨床診斷中,主要采用血清PSA進行篩查、診斷與預后判斷,但因前列腺炎、前列腺增生等均可致使血清PSA水平因此上升,致使其診斷灰區,導致前列腺增生與前列腺癌經常出現誤診、漏診等現象。為此,選取一種有效的分子標記物來對前列腺癌的診斷進行指導具有非常重要的作用。SOX9 是SOX家族基因中非常重要的一名成員。有研究該基因與多種惡性腫瘤的病變和發展均有直接聯系[2]。有研究者通過實驗發現,SOX9不僅在正常前列腺的發育中有重要作用[3-4],同時在腫瘤的侵襲力和腫瘤生長中也發揮了重要作用[5]。NM23基因的表達與失活可引起組織器官出現腫瘤轉移和畸形分化。根據本研究結果來看,通過對前列腺癌與前列腺增生患者NM23、SOX9基因表達進行測定,結果發現,前列腺癌組的NM23、SOX9 nRNA均高于前
列腺增生組(P<0.05)。
綜上所述,在對前列腺癌診斷中,以NM23、SOX9基因為分子標記物,可充分掌握組織中其表達量,并根據表達量的不同來作為病情診斷、預后的判斷指標。參考文獻
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Expression of SOX9 and NM23 Gene in Prostate Cancer
REN Caihong, Pathology Department, the First Hospital Affiliated to Fujian Medical University, Fuzhou 350005, China
ObjectiveTo investigate the expression of SOX9 and NM 23 gene in prostate cancer.Methods16 patients w ith prostate cancer and 24 patients w ith benign prostatic hyperplasia, take the pathological tissue, the expression of mRNA was measured by real-time fluorescence quantitative PCR.ResultsThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 in prostate cancer group was significantly higher compared w ith that in patients w ith benign prostatic hyperplasia(P<0.05).ConclusionThe expression of SOX9 and mRNA NM 23 can be measured, and it can provide reliable basis for clinical diagnosis of prostate cancer.
Prostate cancer, NM 23 gene, SOX9 gene, Expression
R 737.25
B
1674-9308(2015)28-0042-02
10.3969/j.issn.1674-9308.2015.28.030
350005 福建省福州市福建醫科大學附屬第一醫院病理科