伽瑪刀治療對原發性肝癌患者外周血Th17淋巴細胞的影響

侯繼院 張松 劉興安 單國用

伽瑪刀治療對原發性肝癌患者外周血Th17淋巴細胞的影響

侯繼院 張松 劉興安 單國用

目的 觀察原發性肝癌患者伽瑪刀治療前后Th17細胞的變化。方法 43例接受伽瑪刀治療的原發性肝癌患者作為研究組；43例健康體檢者作為正常對照組；采用流式細胞儀檢測其外周血T細胞、T細胞、T細胞、Th17細胞水平及比值。結果 原發性肝癌患者細胞、T細胞及比值均顯著低于對照組(P＜0.05)；細胞和Th17細胞分別高于對照組(P＜0.05)；放療后1個月,T細胞、T細胞及比值均較治療前上升, 而細胞和Th17細胞比例下降, 差異均有統計學意義(P＜0.05)。結論 原發性肝癌患者處于免疫抑制狀態, 伽瑪刀治療可降低其外周血Th17細胞水平, 調節T細胞亞群平衡, 增強機體免疫功能。

肝腫瘤；伽瑪刀；流式細胞術；T淋巴細胞亞群；Th17細胞

原發性肝癌是我國常見的惡性腫瘤, 致死率在所有惡性腫瘤中占第三位, 70%的患者就診時為中晚期無手術機會,且術后復發、轉移率高。Th17細胞是一種新的CD4+T淋巴細胞亞群, 在多種腫瘤組織中高表達, 抑制細胞免疫, 使腫瘤細胞發生免疫逃逸, 促進腫瘤復發、轉移［1］。體部伽瑪刀是一種新型的立體定向三維適形放療技術, 多項臨床研究證實原發性肝癌伽瑪刀治療后局部控制率高, 并發癥少［2］。臨床上已觀察到伽馬刀治療后, 肝癌患者免疫能力增強甚至使遠處的轉移灶縮小或消失, 但這種免疫增強的具體機制仍不清楚, 本研究通過檢測肝癌患者伽瑪刀治療前后外周血Th17細胞數量及T淋巴細胞亞群的變化, 探討伽瑪刀對肝癌免疫功能的影響及可能機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月~2014年6月在本院接受體部伽瑪刀治療的43例原發性肝癌患者為研究對象(研究組), 所有患者均符合2001年第八屆全國肝癌學術會議通過的原發性肝癌診斷標準, 臨床診斷為原發性肝癌或行肝穿活檢病理學明確診斷。其中男25例, 女18例；年齡27~65歲,平均年齡(49.5±6.28)歲, 肝功能Child-Pugh分級A級31例, B級12例；甲胎蛋白(AFP) >20 μg/L者33例；有肝區疼痛者21例, 門靜脈癌栓者11例, 少量腹水者9例。病例選擇排除合并有影響機體免疫功能疾病的患者, 且未使用影響機體免疫功能的藥物。同時選43例健康體檢者作為正常對照組,男28例, 女15例, 年齡25~60歲, 平均年齡(47.3±5.1)歲。

1.2 治療方法 采用OUR-QGD型三維立體定向伽瑪射線體部治療系統。治療的總劑量及時間分割根據腫瘤大小、部位、全身狀況、周圍組織放射敏感性決定, 采用50%~70%等劑量曲線包繞靶區, 通過劑量-體積直方圖進行評估, 靶區周邊總劑量4000~6000 cGy, 單次劑量260~600 cGy, 分割10~18次, 每周照射3~5次。

1.3 檢測方法 伽瑪刀治療前1 d、放療后1周、1個月分別抽空腹外周血送檢, 采用流式細胞計數儀( XL/XL-MCL, 美國貝克曼公司)檢測細胞、T細胞、T細胞及比值、比值；放療期間觀察患者疼痛及胃腸道癥狀變化, 每周復查血常規、肝腎功能；治療后4周行腹部增強CT、AFP檢查, 評價療效。

1.4 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差表示, 采用t檢驗；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 T細胞亞群、Th17細胞免疫功能變化比較。見表1。

表1 體部伽瑪刀治療前后T細胞亞群、Th17細胞免疫功能變化比較s, %)

注：與研究組治療前比較,aP＜0.05,bP>0.05

組別例數CD3Th17對照組43 73.7±17.3a49.8±10.9a26.4±9.8a1.9±0.7a1.1±0.2a研究組治療前4361.3±15.735.1±8.630.8±7.31.4±0.42.4±0.6研究組治療后1周43 64.5±13.4b37.3±8.8b28.9±6.7b1.5±0.5b1.9±0.4a研究組治療后1個月43 70.1±15.0a45.2±9.1a26.1±5.4a1.8±0.5a1.3±0.5a+ CD4+CD8+CD4+/CD8+

2.2 臨床療效及并發癥 治療后4周行腹部增強CT檢查,腫瘤明顯縮小者32例, 近期有效率74.4%；AFP均有不同程度下降, <20 μg/L者19例；21例肝區疼痛患者中, 完全消失13例, 減輕8例；11例門脈癌栓患者中, 4例癌栓消失。

治療后, 13例出現了Ⅲ度骨髓抑制, 以白細胞、血小板下降為主, 予以細胞白介素(IL)-11、粒細胞集落刺激因子等治療恢復正常；26例治療后谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)一過性輕中度升高, 血清白蛋白下降,予以保肝、補充人血白蛋白后1~2周恢復正常；17例出現低熱、輕中度惡心、嘔吐, 經抗炎、補液、保護胃黏膜及止吐等對癥處理好轉。

3 討論

伽瑪刀作為一種立體定向三維適形放療技術, 在不增加正常組織照射劑量的情況下提高了腫瘤有效生物劑量, 取得良好的臨床療效。本研究對43例原發性肝癌患者采用伽瑪刀治療, 近期有效率為74.4%, 并發癥少, 與孫全新等［8］的報道相近, 近年來伽瑪刀治療原發性肝癌已被多家腫瘤中心采用［2］。有關肝癌患者伽瑪刀治療后免疫功能變化的報道較少, 該研究發現伽瑪刀治療后1周細胞數量及比值升高, 與治療前相比差異無統計學意義(P>0.05), 而Th17細胞數量下降明顯, 差異有統計學意義(P<0.05), 提示伽瑪刀治療后, 機體細胞免疫功能未受抑制, 而作為促癌效應的Th17細胞下降明顯；伽瑪刀治療后1月細胞數量及比值升高明顯, Th17細胞數量持續下降, 與治療前相比差異均有統計學意義(P<0.05), 提示伽瑪刀治療后患者細胞免疫功能是逐漸增強的, 與免疫抑制細胞Th17的下降, T淋巴細胞亞群趨向平衡有關。推測其可能機制為：短療程, 高分割劑量的伽瑪刀治療,在腫瘤局部造成炎性環境, 首先使免疫抑制T淋巴細胞及其分泌的免疫抑制因子下降, 抑制腫瘤血管的生成, 動物試驗證實IL-17-/-鼠在MCA誘導的致癌模型中, 降低了血管生成,成瘤率低；隨著放療后瘤細胞的增殖性死亡、抗原決定簇暴露,有利于抗原提呈細胞識別、提取、加工腫瘤抗原, 促進前體T細胞向細胞分化, 打破免疫耐受, 從而提高機體細胞免疫功能。

腫瘤細胞與各免疫細胞之間的相互作用復雜, Th17細胞在肝癌發生、發展中如何抑制免疫, 促腫瘤逃逸及伽瑪刀對肝癌患者免疫功能影響的具體機制還需更深入研究。

［1］ Wang J, Xu K, Wu J, et al.The changes of Th17 cells and the related cytokines in the progression of human colorectal cancers.BMC cancer, 2012(12):418.

［2］ 張江靈, 陳少誼, 陳運萍.伽瑪刀治療原發性肝癌對肝功能的影響.四川醫學, 2011, 32(8):1214-1216.

［3］ Huber M, Heink S, Grothe H, et al.A Th17-like developmental process lead to CD8+Tc17 cells with reduced cytotoxic activity.Eur J Immmunol, 2009, 39(7):1716-1725.

［4］ Wakita D, Sumida K, Iwakura Y, et al.Tumorinfiltrating IL-17 producing T cells support progression of tumor by promoting angiogenesis.J Immunol, 2010, 1(7):1927-1937.

［5］ 王平, 武傳星, 呂凌, 等.IL-17在原發性肝癌組織中的表達及其臨床意義.中國腫瘤生物治療雜志, 2011, 18(2):216-219.

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［7］ 鄧俊, 陳衛, 陸忠華, 等.原發性肝癌患者射頻消融治療前后外周血T細胞亞群及NK細胞的變化.實用腫瘤雜志, 2013, 16(5):416-418.

［8］ 孫全新, 張業嵩.56例原發性肝癌的伽瑪刀治療分析.現代診斷與治療, 2013, 24(3):612-613.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.059

2015-01-04］

450000 鄭州人民醫院放療科