枇杷化學成分研究概況

蘇加樂，潘為高，羅 彭

(廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530001)

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枇杷化學成分研究概況

蘇加樂，潘為高，羅 彭*

(廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530001)

枇杷葉、花、核均可入藥。目前眾多學者分別對枇杷各植株部位化學成分進行了研究，枇杷葉、花、核均含有皂苷類、三萜酸類、揮發油類及黃酮類等多種化學成分。對枇杷葉、花、核的化學成分研究情況、枇杷葉化學成分影響因素及提取工藝等研究情況進行綜述，以供研究者學習及查閱。

枇杷；化學成分；研究綜述

枇杷在醫療保健方面具有廣泛的應用價值，因此已有植物化學工作者對枇杷的主要功能成分進行了相關研究。枇杷葉、花、果實、種子中含有的多種重要化學成分，決定了枇杷的藥用價值。目前，主要分離出皂苷類化合物、三萜類化合物和黃酮類等成分。

1 枇杷化學成分

1.1 枇杷葉化學成分

目前，已從枇杷葉中分離出皂苷類、三萜酸類、揮發油類、黃酮類等成分。

1.1.1 皂苷類化合物 洪燕萍等[1]采用香草醛-高氯酸法直接測定枇杷葉皂苷含量，實驗結果表明：香草醛-高氯酸法直接測定枇杷葉中皂苷含量適于樣品中糖雜質含量較低的樣品，而系數倍率法適于測定樣品中糖雜質含量較高的樣品。

1.1.2 三萜類化合物 呂寒等[2]采用硅膠柱、ODS柱、制備薄層、制備液相等方法分離枇杷葉中化學成分，運用化學及有機波譜分析方法鑒定化合物結構。從枇杷葉中分離得到 9種三萜類化合物，通過鑒定分別確定為白樺脂酸甲酯、齊墩果酸、烏蘇酸、2α-羥基齊墩果酸甲酯、科羅索酸甲酯、2α-羥基齊墩果酸、科羅索酸、委陵菜酸、薔薇酸等。化合物白樺脂酸甲酯、齊墩果酸均為首次從該植物及其屬植物中分離得到。

鞠建華等[3]進行中藥枇杷葉的化學和藥效學研究，利用溶劑提取、萃取、柱色譜和化學衍生化等方法進行分離純化，根據化合物的光譜數據(IR，MS，1H-NMR，13C-NMR)和理化性質進行結構鑒定。該研究從正丁醇萃取物中分離并鑒定得到6種三萜酸類化合物，即齊墩果酸(oleanolic acid)、2α-羥基齊墩果酸(maslinic acid)、烏蘇酸(ursolic acid)、2α-羥基烏蘇酸(2α-hydrox yursolic acid)、坡模酸(pomo licacid)和薔薇酸(euscaphic acid)，首次從該植物中分離得到坡模酸。

李邇娜等[4]采用多種色譜技術對枇杷葉化學成分進行分離，并根據化合物的理化性質和光譜數據鑒定結構，從枇杷葉中分離得到齊墩果酸(oleanolic acid)、熊果酸(ursolic acid)、2α羥基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid)、2α-羥基齊墩果酸(maslinicacid)等14種化合物。

鞠建華等[5]采用高效液相色譜法測定中藥枇杷葉中熊果酸的含量，并建立了中藥枇杷葉中抗炎鎮咳有效成分熊果酸的含量測定方法。

韓小龍等[6]運用薄層掃描法測定枇杷葉中熊果酸，試驗結果表明，枇杷葉中熊果酸含量較高。

1.1.3 黃酮類化合物 陳劍等[7]取干燥枇杷葉，粉碎，用75%工業乙醇回流提取，減壓濃縮得浸膏。浸膏用適量體積蒸餾水混懸，依次采用石油醚、醋酸乙酯及正丁醇萃取，得到極性不同的3個部分。各部分反復用硅膠柱層析、RP-18反相硅膠柱層析、Sephaex LH-20柱層析處理，得到10種化合物，其中3種經結構鑒定為黃酮類成分(山柰酚、金絲桃苷、枇杷甲素)，枇杷甲素(5-羥基-4’-甲氧基-O-7-β-O-D-吡喃葡萄糖基-(6→1)-α-L-吡喃鼠李黃酮苷)為首次在枇杷葉中發現。

呂寒等[8]用高效液相色譜與多級質譜聯用法(HPLC-MSN)從枇杷葉中檢測并鑒定出3種黃酮類物質，其中 1 種為黃酮苷類成分。該研究表明，HPLC-MSN法可迅速鑒定黃酮類化合物。

1.1.4 揮發油成分 臺琪瑞等[9]采用同時蒸餾萃取法從枇杷葉中提取揮發油，對分離物質采用氣相色譜—質譜(GC-MS)鑒定，采用歸一法確定其相對百分含量，共鑒定出77種成分，占總離子流圖峰面積的73.15%，其中主要成分為： A-紅沒藥醇(1.93%)、十六酸 (13.79%)、 (E)-橙花叔醇(10.95%)、亞麻醇( 5.45% )、(+)-香芹酮(2.56%)、欖香素(2.4%)、2-己酰呋喃(2.23%)、二氫獼猴桃內酯(2.37%)、金合歡醇(1.82%)、醋酸法呢基酯(3.09%)。

王義潮等[10]用水蒸氣蒸餾法提取揮發油，運用 GC-MS技術，結合計算機檢索對其化學成分進行了分析和鑒定，采用峰面積歸一化法計算各組分的相對含量。其中已鑒定組分共 47種，占流出組分總量的86.33%，含量較高的組分包括：β-倍半水芹烯(4.14%)、環己酮(5.25%)順-3 -己烯-1-醇(5.30%)、異桉葉油(5.0 7%)、香葉烯 D(5.35%)、10，10 -二甲基-2，6二(亞甲基)-雙環[7.2.0]十一烷 (7.95%)、水楊酸甲酯(11.72%)等。

1.2 去毛枇杷葉及其絨毛化學成分分析

俞長芳等[11]研究去毛枇杷葉及其絨毛，結果表明去毛枇杷葉及其絨毛所含化學成分基本相同，且絨毛中不含其他致咳或產生副作用的特異化學成分，但葉中所含皂苷明顯高于絨毛中含量。

1.3 枇杷花化學成分

1.3.1 揮發性成分 宋艷麗等[12]采用頂空固相微萃取法技術抽取枇杷花揮發油，使用氣相色譜/質譜法結合保留指數法對其化學成分進行分析鑒定，使用面積歸一化法確定相對質量百分含量，分別從枇杷花的花蕾和花中鑒定出10種和13種化合物，各占總峰面積的98.63%和97.18%，結果表明枇杷花花蕾和花的主要成分相同，均為苯甲醛，為枇杷花的賦香成分。

張麗華等[13]利用固相微萃取技術富集枇杷花的香氣成分，并結合GC-MS法對香氣成分進行分離和鑒定；采用氣相色譜-質譜共分離出64個色譜峰，其中確定化合物49種，峰面積占總揮發性成分峰面積的93.34%，相對含量最高成分為苯乙醇(8.84%)，其次為苯甲醛(7.00%)、大茴香醛(6.84%)、乙酸(5.41%)、4-甲氧基苯甲酸甲酯(4.36%)、辛酸(4.21%)等成分。

1.3.2 總黃酮、三萜皂苷成分 成麗等[14]通過化學方法從枇杷花中提取分離得到4種三萜皂甙元類成分，并通過波譜分析手段(IR，MS，1HNM R，13CNMR)確定化學結構分別為：齊墩果酸(oleanolic acid)、熊果酸(ursolic acid)、2α，3α，19α-三羥基熊果-5，12-二烯-28-酸、2β，3β，23α-三羥基齊墩果-12-烯-28-酸。

李琪等[15]采用紫外分光光度法及高效液相色譜法對枇杷花中總黃酮、齊墩果酸、熊果酸含量進行測定，研究不同產地、不同年份枇杷花總黃酮和三萜化合物的含量差異，以確定其含量較高的產地及年際變化情況。結果表明：同一產地不同年份樣品中總黃酮和三萜化合物含量變化較小；根據地理、氣候因子相關性分析，表明齊墩果酸與緯度、經度等具有一定相關性，而其他成分的相關性不大。

1.4 枇杷核化學成分

翁愛彬等[16]采用膠束電動毛細管色譜法測定枇杷核中苦杏仁苷、綠原酸、阿魏酸、山奈酚、槲皮素和熊果酸等6種有效成分的含量，研究表明：枇杷核中6種物質可完全分離，采用大體積樣品堆積的富集方法，富集電壓為-20kV，富集時間為3min，綠原酸、阿魏酸、山奈酚、槲皮素和熊果酸等具有較好的富集效果。

林國榮等[17]通過提取枇杷核淀粉，對枇杷核淀粉的顆粒形貌、晶體結構、直鏈淀粉含量、糊化溫度、溶解度和膨脹度等特性進行評價；研究表明：枇杷核淀粉顆粒大小為5.2～13.9μm，平均粒徑為9.3μm，具有典型的偏光十字。

2 枇杷葉化學成分提取方法研究

主要包括枇杷葉中三萜類、總黃酮及多糖等成分的提取。

2.1 超聲-微波協同萃取枇杷葉多糖工藝研究

王志高等[18]經單因素和正交組合實驗，研究超聲-微波協同作用提取多糖最佳工藝，當料水比為1∶15、提取溫度為85℃、提取時間90min時，提取效果較好。超聲-微波協同萃取法相較于微波提取法、水提醇沉法，具有提取率高、提取時間短等特點，是一種枇杷葉多糖提取優選的新型方法。

2.2 超聲波提取枇杷葉總黃酮及鑒別

黃鎖義等[19]采用超聲波乙醇浸提法從枇杷葉中提取黃酮類物質，并對提取的黃酮類物質進行驗證，采用紫外分光光度法測定含量；測得樣品中總黃酮的含量C=0.909 0mg/mL，回收率為 100.9%，純度和產率均較高。研究表明，該方法為枇杷葉黃酮類物質的有效提取工藝。

2.3 超聲波與回流技術對枇杷葉中烏索酸提取效果

李開泉等[20]研究超聲波和回流提取方法對烏索酸的提取效果：采用相同原料、相同介質，分別采用超聲波和回流兩種方式進行提取，經濾過、定容、離心和微孔濾膜過濾后測定，用外標法計算質量分數；研究結果表明，超聲波提取效率為熱回流法的2.63 倍。

2.4 枇杷葉齊墩果酸超聲波輔助提取效果

李開泉[21]利用超聲波輔助提取枇杷葉有效成分齊墩果酸，并用HPLC法測定提取液中齊墩果酸的含量。結果表明，超聲波可作為枇杷葉齊墩果酸提取的有效輔助手段，而傳統乙醇回流提取效果不理想，提取率僅為50%，且提取次數多，提取效率亦無明顯提高，加酸水解也不能提高收率。

2.5 枇杷葉中熊果酸的提取、分離工藝研究

李躍中等[22]采用正交試驗法篩選其有效成分熊果酸的最佳提取及精制工藝條件，使用90%乙醇進行超聲提取2次，每次提取20min，將提取物采用石油醚除雜3次，可除去脂溶性雜質，每次加入量為沉淀的 15～20倍。采用活性炭脫色，活性炭用量為3g/100mL，70℃下脫色30min；脫色后采用薄層分離，展開劑為氯仿∶丙酮(V/V)= 4∶1，收集得到熊果酸樣品，經HPLC 測定純度達到95.8%。

2.6 正交試驗法優選枇杷葉中科羅索酸提取工藝

陳龍勝等[23]以科羅索酸提取率為指標，通過正交試驗考察枇杷葉中4種三萜酸成分提取效果的影響因素，研究最佳提取工藝條件為：80%乙醇，溫度80℃，回流提取2次，提取3h，科羅索酸得率為0.984%。

3 枇杷活性成分影響因素研究

3.1 不同干燥方法對枇杷葉化學成分的影響

在實際加工中，枇杷葉需進行干燥處理，有學者針對不同干燥方法對枇杷葉中功能性成分的影響因素進行研究。縱偉等[24]分別采用冷凍干燥、真空干燥、熱風干燥和自然干燥等方法對枇杷樣品進行干燥處理，測定枇杷葉中總黃酮含量(采用比色法)及枇杷葉中熊果酸含量(采用RP-HPLC法)，分析經不同干燥方法處理樣品的羥基清除作用。結果表明：冷凍干燥和真空干燥對枇杷葉中總黃酮含量影響較小，且不會破壞其抗氧化作用，4種干燥方法對枇杷葉中熊果酸的影響不顯著。

3.2 不同采收季節枇杷葉藥材化學成分的變化規律

韓秀奇等[25]采用高效液相法測定不同采收季節枇杷葉中槲皮素和山柰酚的含量，研究發現枇杷葉中槲皮素與山柰酚的含量隨季節變化而有所不同。槲皮素含量的變化趨勢大致與總黃酮含量相同，其中以4月份采收樣品最高；山柰酚的含量總體波動較小，其中5月份含量最高，3月份含量最低。不同季節采收的枇杷葉中總黃酮類成分及槲皮素、山柰酚的含量變化有一定規律。

3.3 不同產地枇杷葉中化學成分含量比較

呂寒等[26]采用高效液相色譜法，測定不同產地枇杷葉中齊墩果酸、熊果酸、科羅索酸、山楂酸等成分含量。不同產地的枇杷葉山楂含量變化為0.244%～0.571%，齊墩果酸含量為0.146%～0.192%，科羅索酸含量為0.352%～0.808%，熊果酸含量為0.548%～0.834%。研究指出，不同產地枇杷葉中各種三萜酸類成分的含量有顯著差異。

3.4 不同提取方法對枇杷化學成分的影響

賢景春[27]采用超聲提取法對枇杷核中黃酮類物質進行提取，通過正交試驗對總黃酮的超聲提取工藝進行全面優化，研究乙醇的濃度、提取的時間、溫度等因素對提取率的影響，確定了超聲提取最佳工藝條件。

3.5 炮制方法對枇杷化學成分的影響

魯湘鄂等[28]通過水蒸汽蒸餾法分別從枇杷葉生品和炮制品中提取揮發油，并用歸一化法測定各組分的質量分數，采用GC法對其化學成分進行鑒定。結果顯示：炮制前后揮發油成分的含量變化較大。該研究為枇杷葉飲片的質量評價及炮制品的規范化提供了依據。

4 展望

枇杷在食品、中醫藥開發、植物有效成分研究和種植業等方面具有較好的經濟效益。枇杷的臨床應用價值較大，隨著對枇杷化學成分研究的不斷深入，使用將會更科學、更廣泛。

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(責任編輯：李嵐春)

2014-11-24

廣西壯族自治區教育廳科研項目(2013YB125)；廣西高等學校高水平創新團隊及卓越學者計劃資助項目(桂教人[2014]7號)；廣西高校重點實驗室(桂教科研[2014]6號)

蘇加樂(1987-)，男，廣西中醫藥大學碩士研究生，研究方向為中草藥；潘為高(1977-)，男，瑤族，廣西中醫藥大學教授，碩士生導師，研究方向為中草藥。

羅彭(1982-)，女，廣西中醫藥大學講師，研究方向為民族藥學。E-mail：luopeng3399@sina.com

R284

A

1673-2197(2015)04-0048-03

10.11954/ytctyy.201504022