藏藥螃蟹甲化學成分研究(Ⅱ)

劉 敬，謝朝良，王 瓊，趙 斌,3

(1.中山火炬職業技術學院 生物醫藥系，廣東 中山 528436；2.中山市中醫院，廣東 中山 528436；3.國家中藥現代化工程技術研究中心 中山健康產品分中心，廣東 中山 528436)

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藏藥螃蟹甲化學成分研究(Ⅱ)

劉 敬1,2，謝朝良1，王 瓊1，趙 斌1,3

(1.中山火炬職業技術學院 生物醫藥系，廣東 中山 528436；2.中山市中醫院，廣東 中山 528436；3.國家中藥現代化工程技術研究中心 中山健康產品分中心，廣東 中山 528436)

目的：研究藏藥螃蟹甲的化學成分。方法：采用多種柱層析方法對螃蟹甲浸膏進行分離純化，根據波譜數據和理化性質鑒定化合物的結構。結果：從螃蟹甲乙酸乙酯提取部位分離鑒定出4個化合物，分別為Phlomisoside Ⅲ (Ⅰ)、β-胡蘿卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)。結論：化合物Ⅲ和Ⅳ為首次從該植物中分離得到，為螃蟹甲藥理作用的研究奠定了基礎。

藏藥；螃蟹甲；化學成分

螃蟹甲藥材收載于衛生部藥品標準藏藥第一冊(1995版)，為唇形科糙蘇屬植物螃蟹甲PhlomisyounghusbandiiMukerjee的干燥塊根，主產于青海、西藏等省，藏醫又稱之為“露木爾”。該藥具有疏風清熱、散寒潤喉、止咳化痰等功效，臨床上常用于治療咳嗽痰多、支氣管炎等疾病[1]。筆者對螃蟹甲具有止咳平喘抗炎作用的乙酸乙酯提取部位進行了系統研究，共分離鑒定得到4個化合物，分別為Phlomisoside Ⅲ(Ⅰ)、β-胡蘿卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)，其中化合物Ⅲ和Ⅳ為首次從該植物中分離得到，現報道如下。

1 儀器、試劑與藥材

SGW X-4型顯微熔點測定儀(南京科捷)；Nicolet is 10 型傅里葉變換紅外光譜儀(美國Thermo Nicolet 公司)；Bruker BioTOF-Q型質譜儀(德國Bruker公司)；Bruker Avance 600 核磁共振儀(德國Bruker公司)。

柱層析用硅膠(200～300目)、薄層層析用硅膠GF254、薄層層析用硅膠H(青島海洋化工廠)；RP-18反相硅膠(德國Merck)；Sephadex LH-20(日本Amersham Biosciences)。

螃蟹甲藥材采自西藏昌都地區，經中山火炬職業技術學院謝朝良教授鑒定為唇形科植物螃蟹甲PhlomisyounghusbandiiMukerjee的干燥塊根，標本存于中山火炬職業技術學院生物醫藥系。

2 提取與分離

稱取螃蟹約10kg，粗粉碎后，采用乙醇回流提取并濃縮成浸膏，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，減壓回收溶劑后得到乙酸乙酯部分136g。乙酸乙酯部位經重結晶后得化合物Ⅱ(1.2g)，再經反復硅膠柱層析、RP-18反相柱色譜和Sephadex LH-20柱分離得到化合物Ⅰ(41mg)、化合物Ⅲ(31mg)和化合物Ⅳ(29mg)。

3 結構鑒定

3.1 化合物Ⅰ

白色粉末，易溶于三氯甲烷、甲醇，mp132～134℃。分子式為C31H46O12；ESI-MS提示 m/z：633[M+Na]+，不飽合度為9；IR(cm-1)：3406,2931,1737,1602,1500,1078, 1024；1H-NMR(600MHz,CD3OD)δppm：6.26 (1H,br s,14-H), 7.35 (1H,br s,15-H), 7.23 (1H,brs, 16-H)， 1.65 (3H,s,17-CH3), 1.24 (3H,s,18-CH3), 0.89 (3H,s,20-CH3), 5.45 (1H,d,J =8.0Hz,1′-H), 5.67(1H,d, J=7.6 Hz, 1″-H)。13C-NMR(150MHz,CD3OD)δppm：36.4(C-1)，19.1(C-2)，37.8(C-3)，44.0(C-4)，52.6(C-5)，22.6(C-6)，35.2(C-7)，128.6(C-8)，138.9(C-9)，41.4(C-10)，30.1(C-11)，25.5(C-12)，125.4(C-13)，110.7(C-14)，143.3(C-15)，138.6(C-16)，19.4(C-17)，28.6(C-18)，175.8(C-19)，19.0(C-20)，94.0(C-1′)，80.5(C-2′)，78.3(C-3′)，69.4(C-4′)，78.9(C-5′)，61.6(C-6′), 104.7(C-1″)，77.2(C-2″)，78.3(C-3″)，70.6(C-4″)，67.9(C-5″)。上述波譜數據與文獻[2-3]報道基本一致，故確定為phlomisoside Ⅲ。

3.2 化合物Ⅱ

白色顆粒，易溶于氯仿、甲醇，mp289～290℃。Liebermann- Burchard反應呈陽性；薄層色譜中其Rf值與β-胡蘿卜苷標準品基本一致，與其混合后熔點不下降，故確定為β-胡蘿卜苷(β-daucosterol)。

3.3 化合物Ⅲ

黃色固體粉末，HCl-Mg反應呈陽性，分子式為C15H10O6。ESI-MS(m/z): 309[M+Na]+。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ：12.45(1H,s,5-OH)，10.73(1H,s,2-OH)，10.06(1H,s,7-OH)，9.33(1H,s,3′-OH),8.03(2H,d,J=8.9Hz,H-2′,6′), 6.92(2H,d, J =8.9Hz,H-3′,5′),6.40(1H,d,J =2.0Hz,H-8), 6.18 (1H,d,J=2.0Hz,H-6)。13C-NMR(150MHz, DMSOd6) δ：176.3(C-4)，164.5(C-7)， 161.3(C- 5)，159.8(C-4′)，156.6 (C-9)，147.2(C-2)，136.1(C-3)，130.0(2C,C-2′, 6′)，122.1(C-1′)，115.9(2C,C-3′, 5′)，103.4(C-10)，98.7(C-6)，93.9(C-8)。該化合物的理化性質及波譜數據與文獻[4]報道基本一致，故確定為山柰素(kaempferol)。

3.4 化合物Ⅳ

白色粉末，mp279～282℃。1H-NMR(600MHz，CDCl3)δ：0.85(3H，d，J=6.4Hz，H-29)，0.94(3H,d,J=6.2Hz,H-30)，0.77(3H,s,H-24)，0.80(3H,s,H-25)，0.93(3H,s,H-27)，0.99(3H,s,H-23)，1.07 (3H,s,H-26)，5.25(1H,t,H-12)；13C-NMR(150MHz,CDCl3)：179.6(C-28)，138.9(C-13)，125.4(C-12)，78.8(C-3)，55.0(C-18)，52.8(C-5)，47.9(C-17)，47.3(C-9)，42.0(C-14)，39.2(C-8)，39.1(C-19)，38.7(C-4)，38.5(C-1)，36.9(C-22)，36.8(C-10)，32.8(C-7)，30.5(C-21)，28.0(C-23)，27.9(C-15)，26.7(C-2)，24.2(C-16)，23.3(C-11)，23.1(C-27)，21.0(C-30)，18.1(C-6)，17.0(C-26)，16.8(C-29)，15.4(C-24)，15.2(C-25)。該化合物上述數據與文獻[5]報道的數據基本一致，故確定為熊果酸(ursolic acid)。

4 結論

本研究采用多種柱層析方法結合波譜數據和理化性質鑒定從螃蟹甲乙酸乙酯部位分離鑒定出4個化合物，分別為Phlomisoside Ⅲ (Ⅰ)、β-胡蘿卜苷(Ⅱ)、山柰素(Ⅲ)、熊果酸(Ⅳ)，其中化合物Ⅲ和Ⅳ為首次從該植物中分離得到，為螃蟹甲藥理作用的研究奠定基礎。

[1] 中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準·藏藥分冊[S].1995:126.

[2] KATAGIRI M, OHTANI K, KASAI R,et al. Diterpenoid glycosyl esters from Phlomi younghusbandii and P.medicinalis roots[J]. Phytochemistry,1994,35(2):439-442.

[3] 余振喜,王鋼力,邊巴次仁,等.蘿卜秦艽化學成分的研究Ⅰ[J].中國中藥雜志,2006,31(8): 656-658.

[4] 陳改敏,張建業,張向沛,等.馬鞭草黃酮類化學成分的研究[J].中藥材,2006,29(7):677-678.

[5] 陳德昌.中藥化學對照品工作手冊[M].北京:中國醫藥科技出版社, 2000:168.

(責任編輯：尹晨茹)

2015-03-09

劉敬(1980-)，女，博士，中山火炬職業技術學院講師，研究方向為中藥藥效及作用機理。

R284.1

A

1673-2197(2015)14-0015-01

10.11954/ytctyy.201514006