齒瓣石斛最新研究進展

陳玲玲，楊發建，王洪云，李 蔚，李 銘

(保山中醫藥高等專科學校，云南 保山 678000)

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齒瓣石斛最新研究進展

陳玲玲，楊發建，王洪云，李 蔚，李 銘*

(保山中醫藥高等專科學校，云南 保山 678000)

石斛是我國傳統名貴中藥材。近年來，云南各地學者通過調查、研究和挖掘，發現齒瓣石斛(紫皮)野生資源及栽培量較大，有很大發展空間。綜述近20年齒瓣石斛的組織快繁、化學成分和藥理作用等方面的研究進展，旨在為齒瓣石斛的深入研究及其在醫藥和食品工業方面的開發應用提供參考。

齒瓣石斛；研究進展；開發應用

齒瓣石斛(DendrobiumdevonianumPam)又名香棍草、大黃草，為藥用石斛中的佳品[1]，在云南省德宏、保山龍陵等地區均有分布，是我國重要的藥用植物資源。據調查，齒瓣石斛以往沒有藥用的記載，云南省于20世紀80年代末90年代初開始大量收購齒瓣石斛，最早由吉占和[2]于1980年報道該品種作為藥用黃草石斛使用。鄭博仁[3]將新鮮齒瓣石斛加工成細黃草，經干燥后成為“香棍草”。齒瓣石斛的性狀及功效與鐵皮石斛很相近，均具有益胃生津、滋陰清熱、潤肺止咳、潤喉明目、延年益壽的功效，成為云南等產區重點發展的藥用資源。近年來其價格不斷上漲，鮮品價格已達180元/kg，紫皮楓斗的價格也達到2 000～4 000元/kg。目前保山市龍陵縣正大力開發石斛種植產業，“龍陵紫皮石斛”已獲得國家工商行政管理總局頒發的《地理標志證明商標注冊》證書，2011年當年實現產品營業收入1億余元。齒瓣石斛的研究已取得較大進展，筆者就近20年來其組織快繁、化學成分和藥理作用等方面的研究進展進行綜述。

1 組織快繁

齒瓣石斛的種子是缺乏胚乳營養的粉末，必須在非常適宜的環境與真菌共生才能萌發，自然繁殖率很低。為保護和利用齒瓣石斛資源，近年來，科研人員開始對齒瓣石斛人工栽培技術進行研究，而組織培養是實現快速繁殖和人工栽培的最佳技術手段。李涵等[4]采用多倍體育種技術，對云南野生齒瓣石斛進行多倍體誘導實驗，以0.03%秋水仙素作為誘導劑，在短期內培育出植株粗壯、葉片增厚等性狀優良的多倍體植株。丁長春等[5]對齒瓣石斛種子進行離體培養和快速繁殖，采用不開裂的果莢，以便于消毒，以1/4 MS、vw、改良KC、改良N6作為培養基 ，附加10%椰乳，繼代培養基則添加10%香蕉汁。在光照時間12～16h/天、溫度為23～27℃、光照強度1 500～3 000lx的培養條件下獲得了大量齒瓣石斛過渡苗。王蘭新等[6]研究了齒瓣石斛的最適萌發胚齡、最佳萌芽、增殖培養基以及不同激素、天然提取物對胚培養的影響。其首先選擇I/2MS+香蕉5%的培養基，增殖、生根、壯苗培養基為MS+香蕉5%，各種培養基內均加入0.6%瓊脂、2%蔗糖，pH5.5～6.0。培養溫度為(25.0±1.0)℃ ，每天光照9～10h，光照強度為1 500～2 000lx。結果表明，種子成熟時(8～10個月)胚芽達到最大萌發率、最短萌發期和最高成苗率。在I/2MS培養基上，加入濃度為2mg·L-1的激素6-BA，并附加0.2mg·L-1NAA、10%椰乳、5%香蕉汁時，齒瓣石斛胚的萌發率和成苗率最高。高燕等[7]以齒瓣石斛的蒴果為外植體進行組培研究，建立了齒瓣石斛胚組織培養技術體系：初始萌發培養基為1/2MS，原球莖萌發培養基為3/4MS+10%馬鈴薯汁+5%香蕉+0.2mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA+0.05%AC；壯苗生根培養基為1/2MS+10%香蕉汁+5%馬鈴薯汁+0.2mg·L-16-BA+1.0mg·L-1NAA+0.1%AC；繼代增殖培養基為MS+10%馬鈴薯汁+10%香蕉汁+0.5mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA+0.1%AC，生根誘導率達100%，成活率達90%以上。

從上述研究可以看出，組織培養技術是目前齒瓣石斛研究的集中點，主要包括種子萌發、原球莖分化、生根與壯苗、原球莖增殖等方面，其中培養基組成、激素及組培的影響因素是齒瓣石斛組織培養的研究重點。

2 人工移栽

隨著齒瓣石斛的開發利用日趨產業化，種苗需求量逐漸增大，造成種苗價格日益升高，因此開展并推廣石斛無性扦插繁殖育苗對石斛產業的發展具有重要作用。任國敏等[8]研究了齒瓣石斛快速扦插育苗技術，認為其育苗一般在熱帶與亞熱帶，海拔為800～1 800m，年平均氣溫為20℃左右，應選擇比較潮濕的地帶，苗床離地面高度為50～80cm，寬1.0～1.2m、長10～20m，頂棚需搭建遮蔭網，高度為2.0～2.5m；基質一般選擇鋸木灰和刨花，鋸木灰放在上層，厚度為3cm，刨花墊在底層，厚度為5cm。基質應先曬干再用0.1%～0.2%高錳酸鉀消毒后方可放入育苗床。在上述條件下進行扦插育苗，出苗率為80%～85%。李桂琳等[9]認為應選擇無病蟲害、生長健壯、節間粗短、飽滿的1～2年生成熟莖節作為插條，以河沙為扦插基質，且在立春時插苗。

3 化學成分研究

齒瓣石斛是藥食兩用藥材，但關于其化學成分的研究還很少，極大制約其發展前景。近年研究表明，齒瓣石斛含有石斛多糖、生物堿、酚類、菲類、倍半萜類及香豆素等成分。李滿飛等[10]采用比色法測定出齒瓣石斛中多糖含量為21.09%，高于鐵皮石斛的18.24%。吳剛等[11]檢測出云南文山產齒瓣石斛的多糖含量為37.05%。鄭志新等[12]研究表明齒瓣石斛含有石斛多糖、礦質元素、氨基酸等有效成分。沈妍等[13]采用硅膠、Sephadex LH-20反復柱層析純化，從齒瓣石斛莖中首次分離得到7個化合物，分別鑒定為新甘草苷、蘆丁、3，5-二羥基黃酮-7-O-葡萄糖醛酸苷、β-胡蘿卜苷和β-谷甾醇、芹菜素-7-O-蕓香糖苷和芹菜素-7-O-葡萄糖苷。孟志霞等[14]對人工栽培齒瓣石斛進行了較為詳細的化學成分研究，從中分離得到25個化合物，其結構類型涉及聯芐類、二氫菲類、酰胺類、二氫黃酮類、酚酸類、苯丙素類、木脂素類及甾醇類。張愛蓮等[15]采用硅膠、Rp-18(十八烷基硅烷)和凝膠柱色譜法從齒瓣石斛乙醇提取物中分離得到2，3，4，9-四氫-1H-吡啶駢[3，4-b]吲哚-3-甲酸、脫氧胸腺嘧啶核苷、腺苷、N-反-對香豆酰酪胺、N-反-對阿魏酰酪胺、4-羥基-3-甲氧基苯甲醛、對羥基苯甲醛、3，4-二羥基苯甲酸甲酯和4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲酸9個化合物。金鵬程等[16]采用濕法消化-原子吸收光譜法(AAS)測定齒瓣石斛中8種微量元素含量，其中Mg含量最高，Cu含量最低，依次為Mg>K>Ca>Fe>Na>Zn>Mn>Cu。

4 提取工藝

關于齒瓣石斛提取工藝的研究較少。趙俊凌等[17]采用正交試驗法對齒瓣石斛多糖的提取工藝、脫蛋白條件進行優化，結果表明：提取溫度為100℃，提取2h，加水200mL，提取2次，醇沉濃度為80%，醇沉30h為齒瓣石斛多糖的最佳提取條件；樣品/萃取劑(v/v)為4∶1，氯仿/正丁醇(v/v)為4∶1，萃取30min為多糖脫蛋白的最佳條件。

5 藥理作用

黎英等[18]研究表明齒瓣石斛具有清除活性氧的作用。王琳等[19]采用齒瓣石斛無水甲醇和水提取物對11種臨床常見病原菌進行了體外抗菌作用的初步研究，結果表明齒瓣石斛無水甲醇和水提取物對7種細菌有不同程度的抑制作用，其中對白色葡萄球菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用最強，對痢疾志賀菌、傷寒沙門茵、甲型副傷寒沙門菌和乙型副傷寒沙門菌無明顯作用。張愛蓮等[20]首次從齒瓣石斛中分離出9種化合物，其中N-阿魏酰酪胺和4-羥基-3，5-二甲氧基苯甲酸具有一定的抗氧化活性。李光等[21]觀察齒瓣石斛多糖成分對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響，結果表明齒瓣石斛多糖具有增強脾臟免疫的作用。龔曉敏[22]首次對云南齒瓣石斛抗肝損傷藥理作用的機制進行了研究，結果表明，齒瓣石斛榨汁液預防性給藥能有效抑制AST升高，表明其對亞急性酒精性肝損傷有良好的防治作用。

6 結語

近年來，齒瓣石斛組織快繁、人工栽培、化學成分、多糖提取工藝和藥理作用等方面的研究有了諸多進展，但由于其開發較晚， 栽培技術研究亦相對滯后，目前無法進行大規模種植。此外，目前對齒瓣石斛提取工藝和藥理作用的研究還很少，尚未形成較為科學的體系。

筆者認為，未來齒瓣石斛的研究方向主要包括兩個方面，其一是齒瓣石斛的生物學特性、組織培育、煉苗、移栽、病蟲防治及施肥管理等，為擴大其種植規模奠定基礎；其二是齒瓣石斛的化學成分、藥理活性和臨床研究，確定其活性成分，并制定相應的質量標準，為研發新藥提供科學依據。

[1] 包雪聲,順慶生,陳立鉆.中國藥用石斛[M].上海:上海醫科大學出版社,2001:511-513.

[2] 吉占和.中國石斛屬的初步研究[J].植物分類學報,1980,18(4):427-429.

[3] 鄭博仁.云南石斛屬藥材現狀及其原植物[J].中國中藥雜志,1990,15(1):9-12.

[4] 李涵,鄭思鄉,龍春林.齒瓣石斛多倍體的誘導初報[J].云南植物研究,2005,27(5):552-556.

[5] 丁長春.齒瓣石斛的胚培養技術及其快速繁殖研究[J].云南農業科技,2004(6):20.

[6] 王蘭新,曾彩云.林業調查規劃[J].林業調查規劃,2006,31(5):128-130.

[7] 高燕,李守嶺,白燕冰,等.齒瓣石斛組織培養技術研究[J].熱帶農業科技,2011,33(2):23-31.

[8] 任國敏,楊新良,周平陽,等.齒瓣石斛快速扦插育苗技術[J].現代農業技術,2013(13):113-114.

[9] 李桂琳,白燕冰,胡永亮,等.齒瓣石斛扦插育苗技術研究[J].中國熱帶農業,2012(44):70-72.

[10] 李滿飛,徐國鈞,平田義正,等.重要石斛類多糖的含量測定[J].中草藥,1990,21(10):10.

[11] 吳剛,季祥彪,康冀川,等.石斛中多糖和生物堿的含量測定[J].山地農業生物學報,2008,27(3):274.

[12] 鄭志新,李昆,張晶順,等.云南龍陵齒瓣石斛化學成分分析測定及栽培方式選擇[J].安徽農業科學,2008.36(4):1426.

[13] 沈妍,周志宏,楊耀文,等.齒瓣石斛化學成分的研究[J].天然產物研究與開發,2012,24(3): 339-341.

[14] 孟志霞,董海玲,王春蘭,等.齒瓣石斛化學成分研究[J].中國藥學志,2013,48(11):855-859.

[15] 張愛蓮,于敏,徐宏化,等.齒瓣石斛的化學成分及其抗氧化活性[J].中國中藥雜志,2013, 38(6):844-847.

[16] 金鵬程,丁永麗.齒瓣石斛中微量元素含量及浸出特性[J].江蘇農業科學,2012,40(4): 292-293.

[17] 趙俊凌,馬潔,李戈,等.齒瓣石斛多糖提取及脫蛋白工藝研究[J].時珍國醫國藥,2010,21(11): 2841-2843.

[18] 黎英,趙亞平,陳蓓怡,等.5種石斛水提物對活性氧的清除作用[J].中草藥,2004,35(11): 1240-1242.

[19] 王琳,王濤,楊敏,等.齒瓣石斛提取物體外抗菌作用的初步研究[J].安徽農業科學,2012,40(17):9338-9339.

[20] 張愛蓮,于敏,徐宏化,等.齒瓣石斛的化學成分及其抗氧化活性[J].中國中藥雜志,2013, 38(6):844-847.

[21] 李光,宋美芳,李宜航,等.不同種類石斛多糖成分對小鼠脾臟免疫功能的影響[J].中國臨床藥理學與治療學,2012,17(10):1108-1111.

[22] 龔曉敏.云南齒瓣石斛抗肝損傷的藥理作用研究[J].醫學信息,2014,27(2):119.

(責任編輯：尹晨茹)

Latest Research Progress on Dendrobium Lobe

Chen Lingling,Yang Fajian,Wang Hongyun,Li Wei,Li Ming*

(Baoshan College of Traditional Chinese Medicine, Baoshan 678000,China)

Dendrobium is rare traditional Chinese herbal medicine. Being studied and dug in yunnan province in recent years, people found that lobe Dendrobium (purple skin) is grow wildly and planted in large amount. There is a big space of developmentwith it. The authors reviewed the 20-year-research process of lobe Dendrobium’s plant identification, planting cultivation, tissue culture, the main component and pharmacological etc. And in hope that could provide reference for further research on the development and application of pharmaceutical and food industry of Dendrobium lobe.

Dendrobium Lobe;Research;Development and Application

2015-03-19

云南省科技計劃項目(2013FZ0951)；云南省教育廳科學研究基金項目(2013Y533)

陳玲玲(1974-)，女，云南省保山中醫藥高等專科學校教授，研究方向為中藥制劑。

李銘(1967-)，男，云南省保山中醫藥高等專科學校教授，研究方向為中醫學。

R284；R285

A

1673-2197(2015)14-0031-02

10.11954/ytctyy.201514013