艾灸對運動訓練小鼠耐缺氧的影響

★ 顧任鈞 李忠仁 顧一煌

(1.南京中醫藥大學基礎醫學院 南京 210023；2.南京中醫藥大學第二臨床醫學院 南京 210023)

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艾灸對運動訓練小鼠耐缺氧的影響

★ 顧任鈞1李忠仁2顧一煌2

(1.南京中醫藥大學基礎醫學院 南京 210023；2.南京中醫藥大學第二臨床醫學院 南京 210023)

目的：觀察艾灸對運動訓練小鼠耐缺氧時間的影響。方法： 將小鼠分為空白對照組、運動對照組、艾灸組，每組均為20只。運動對照組、艾灸組每日進行運動訓練，艾灸組于運動訓練后進行艾灸關元和腎俞穴，檢測運動訓練后小鼠的血乳酸和肌酸激酶、耐缺氧時間。結果：艾灸后，小鼠的耐缺氧時間由24.8±1.7提高到32.8±2.7(P<0.01)。結論：艾灸可以防止小鼠骨骼肌微細結構在運動訓練中的損傷，從而提高耐缺氧時間。

艾灸；運動訓練；耐缺氧

灸法是中醫學的重要外治法之一，有通十二經，走三陰，理氣血，逐寒濕，暖子宮，透諸經而除百病的作用。在中醫療法中，艾灸以療效確切、無副作用，操作簡便等優勢而受到廣泛應用。機體耐缺氧是衡量人體機能的重要指標之一，也是決定運動成績的一個重要因素，如何提高運動員在日常的訓練中機體耐缺氧的研究，已經成為運動醫學研究的熱點。本研究通過使用灸法，觀察小鼠運動訓練后耐缺氧狀態，探討了艾灸對機體耐缺氧的影響作用。

1 材料與方法

1.1 實驗小鼠及分組 體重為18～22g 的1月齡健康昆明種雄性小鼠(南京中醫藥大學實驗動物中心，合格證11400700043392)。在室溫(23±2)℃、濕度60%～70%的實驗室、光照自然的環境中以籠飼養，每籠10只，小鼠自由進食、飲水。

分組：篩選出60只會游泳雄性昆明種小鼠，進行正常實驗室環境中適應性飼養3天后，用數字隨機法隨機分為3個組，分別為空白對照組、運動對照組、艾灸組，仍以每籠10只正常飼養，每組均為20只。

1.2 主要儀器與試劑 自制游泳箱(100cm×50cm×50cm玻璃水箱)；全自動生化分析儀(上海醫療器械廠)；UV--1100型分光光度計(北京瑞利分析儀器公司)；乳酸酶法試劑盒、肌酸肌酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)。光學讀數分析天平，廣口瓶、試管、計時器等。

1.3 實驗方法 小鼠以每籠10只飼養，每日觀察并記錄小鼠的生長和進食情況。

空白對照組：不做任何運動，正常飼養，每日按時抓起放入無水的游泳箱中，在游泳箱中停留時間與運動對照組相同。

運動對照組：游泳箱水深約40 cm, 水溫約(25±2)℃，每日按時做游泳運動，第1周游泳30min/d，第2周游泳60 min/d，第3周游泳90min/d，第4、5周游泳120min/d[1]。每箱10只小鼠，對浮于水面不動的小鼠用棒驅趕，促使小鼠維持在運動狀態。完成游泳后，撈出小鼠，迅速電吹風吹干。

艾灸組：游泳后的第4周第1天開始，小鼠完成游泳訓練時間后，撈出吹干后進行艾灸治療，每穴艾灸2min，灸2周。采用《實驗針灸學》[2]取穴方法定位，取關元、腎俞(雙側)。于臍下正中線約5mm處和第二腰椎兩旁去鼠毛，手持自制直徑約2mm、長20cm艾條進行懸灸。

1.4 檢測指標

1.4.1 生化指標 于第5周游泳結束后，撈起運動對照組和艾灸組小鼠，擦干頭部，每只小鼠眼球取血2mL抗凝, 以3000 r/min離心20 min，取上清,分別以乳酸氧化酶法檢測血清乳酸、酶偶聯法測定血清肌酸激酶。操作嚴格按照試劑盒要求進行?？瞻讓φ战M眼球取血抗凝后同上處理。

1.4.2 小鼠耐缺氧時間測定 于未次游泳后的次日，將小鼠放入盛有40g鈉石灰(鈉石灰用以吸收二氧化碳，鈉石灰上墊有濾紙，用以吸收尿液)的廣口瓶中，用凡士林涂廣口瓶口、用木塞蓋嚴不漏氣，并開始計時，以小鼠呼吸停止為指標，記錄小鼠死亡時間( 即耐缺氧時間)[3]。

2 實驗結果

2.1 各組小鼠的耐缺氧時間 見表1。

表1 小鼠的耐缺氧時間比較

注：運動對照組和艾灸組在游泳中分別有3只和1只小鼠死亡；與空白對照組相比△P<0.05，與空白對照組相比※P<0.01，與運動對照組相比△P<0.05。

2.2 各組小鼠的血乳酸和肌酸激酶水平 見表2。

表2 各組小鼠的血乳酸和肌酸激酶的比較

注：艾灸組、運動對照組與空白對照組相比，艾灸組與運動對照組相比△P<0.05；運動對照組、艾灸組與空白對照組相比※P<0.01。

3 討論

在本研究中，運動對照組與空白對照組相比有差異(P<0.05)，艾灸組與空白對照組相比有顯著差異(P<0.01)，與運動對照組相比有差異(P<0.05)。說明通過運動訓練可以提高小鼠的耐缺氧時間，而在運動訓練的同時進行艾灸，則對小鼠耐缺氧時間的提高更為明顯。

血清肌酸激酶(CK)參與了骨骼肌細胞能量的代謝，在肌肉收縮過程中起到十分重要的作用，正常情況下,肌細胞膜結構完整, CK極少能透過細胞膜進入血液中，但無論是高強度還是低強度的運動都會促使細胞內CK釋放并透過細胞膜進入血液，使血清中CK濃度升高，因此，血清CK活性的變化可以作為評定機體運動、了解骨骼肌微細結構損傷程度的重要敏感生化指標，在本研究中，艾灸組與運動對照組相比，CK有差異(P<0.05)；運動對照組、艾灸組與空白對照組相比，有顯著差異(P<0.01)，提示艾灸能有效地減少運動訓練中小鼠骨骼肌微細結構的損傷。

乳酸是運動醫學上常用的指標，有“訓練的標尺”之稱，一般認為乳酸在血液中含量高低可以作為評價機體疲勞程度的重要標志之一[4]，在本實驗中可以看出：小鼠運動訓練后，血清乳酸與空白組對照有差異(P<0.05)，提示小鼠游泳時血清乳酸含量會增高。而運動對照組與艾灸組相比并沒有明顯的變化，與顧氏[5]、史氏[6]的報道不一致，這可能與小鼠的運動并沒有達到最大量有關，我們將在今后進一步深入研究。艾灸能有效地提高小鼠的耐缺氧能力，其機理是多途徑的，多環節的，與艾灸能有效地減少運動訓練中小鼠骨骼肌微細結構的損傷是密切相關的，其機理值得進一步研究。

[1]李儀奎.中藥藥理實驗方法學[M].上海：上海科學技術出版社.第一版，1991∶149

[2]李忠仁．實驗針灸學[M].北京：中國中醫藥出版社.第一版，2003：314

[3]高允生，齊永秀，李珂，等．小鼠耗氧量動態變化測定裝置的建立與應用[J].中國藥理學通報，2004，20(9)：1070-1072.

[4]賈天奇,常立云,宋佳霖,等 中醫艾灸療法促進運動性疲勞恢復的研究[J].北京體育大學學報,2006,29(11)：1529.

[5]顧一煌，任建寧，金宏柱,等.艾灸對小鼠力竭運動后血乳酸影響的觀察[J].中醫藥信息,2008,25(6)：48-49.

[6]史曙生.艾灸對運動時血乳酸的影響[J].上海針灸雜志,2002,21(1)：20-21.

江蘇省高等學校大學生實踐創新訓練項目。

顧一煌。

R285.5

A

2014-03-05)編輯：曾文雪