市售不同產(chǎn)地單葉蔓荊子揮發(fā)油成分分析

★ 陳宇帆 李志強(qiáng) 劉明貴

(1.贛州市人民醫(yī)院 江西 贛州 341000；2.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 330004；3.景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院 江西 景德鎮(zhèn) 333000)

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市售不同產(chǎn)地單葉蔓荊子揮發(fā)油成分分析

★ 陳宇帆1李志強(qiáng)3劉明貴2

(1.贛州市人民醫(yī)院 江西 贛州 341000；2.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 330004；3.景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院 江西 景德鎮(zhèn) 333000)

目的：對(duì)市售單葉蔓荊子揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行分析比較。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取單葉蔓荊子揮發(fā)油；測(cè)定揮發(fā)油的含量、折光率、旋光度及相對(duì)密度，并運(yùn)用GC-MS對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分析。結(jié)果：市售的單葉蔓荊子揮發(fā)油得率為0.156%～0.222%，相對(duì)密度為0.924～0.980，折光率為1.472～1.505，旋光度為-40.8°～-13.7°；廣西玉林產(chǎn)單葉蔓荊子分離鑒定出32種化合物，江西產(chǎn)分離鑒定出28種化合物，共有成分13種；共有成分占各自揮發(fā)油總量的55.67%、69.39%。結(jié)論：市售不同產(chǎn)地的單葉蔓荊子揮發(fā)油的物理性質(zhì)及化學(xué)成分組成存在差異。

蔓荊子；揮發(fā)油；含量；折光率；旋光度；GC-MS

蔓荊子為馬鞭草科植物單葉蔓荊VitextrifoliaL. var.simplicifoliaCham.或蔓荊VitextrifoliaL.的干燥成熟果實(shí)，具有疏散風(fēng)熱、清利頭目的功效，常用治風(fēng)熱感冒頭疼、齒齦腫痛、目赤多淚、目暗不明、頭暈?zāi)垦1]。單葉蔓荊子主產(chǎn)于我國(guó)江西、廣西、廣東、福建、山東和江蘇等地[2-3]。揮發(fā)油是單葉蔓荊子的主要活性物質(zhì)之一[4]，本實(shí)驗(yàn)擬選用江西省市售的單葉蔓荊子為研究對(duì)象，對(duì)揮發(fā)油成分進(jìn)行比較分析，為評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地單葉蔓荊子質(zhì)量提供了一定的參考。

1 儀器與試藥

Agilent6890N氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent公司)。蔓荊子購(gòu)于江西南昌市不同的藥店，分別為廣西玉林產(chǎn)、亳州蜀中藥業(yè)公司和亳州興和藥業(yè)公司，后兩者產(chǎn)地均為江西。所購(gòu)蔓荊子呈圓球形，表面灰黑色或黑褐色，被灰白色粉霜狀茸毛，有縱向淺溝4條，頂端微凹，基部有灰白色宿萼及短果梗，體輕，質(zhì)堅(jiān)韌，種仁白色，有油性，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源學(xué)科組賴學(xué)文副教授鑒定均為馬鞭草科植物單葉蔓荊VitextrifoliaL. var.simplicifoliaCham.的干燥成熟果實(shí)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 揮發(fā)油提取 根據(jù)2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄 XD[1]揮發(fā)油測(cè)定法甲法操作。取市售的三種單葉蔓荊子適量，搗碎，并稱取一定量置于圓底燒瓶中，加5倍量的水及數(shù)粒玻璃珠，振搖均勻，浸泡2h，進(jìn)行揮發(fā)油提取，回流6h，收集揮發(fā)油。

2.2 GC-MS條件 色譜條件：HP-5MS彈性石英

毛細(xì)管柱(30 m ×250 μm×0.25 μm)。載氣為氦氣；流速是1mL/min；進(jìn)樣量為1μL；進(jìn)樣口溫度250℃；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比20：1；恒流模式；傳輸線溫度：280℃；升溫程序：色譜柱初始溫度60℃(保持3min)，以8℃/min升溫速率升至250℃(最后保持15min)。

質(zhì)譜條件：電離方式為EI；電子轟擊能量為70eV；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；掃描范圍：35～500amu；溶劑延遲時(shí)間：5min。

3 結(jié)果

3.1 揮發(fā)油得率與物理常數(shù)測(cè)定 測(cè)定揮發(fā)油體積并計(jì)算出油率，然后測(cè)定揮發(fā)油的相對(duì)密度、折光率、旋光度。結(jié)果見(jiàn)表1。

3.2 揮發(fā)油GC-MS成分分析 取蔓荊子揮發(fā)油乙酸乙酯溶液各1μL，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析鑒定，得到總離子流圖，經(jīng)過(guò)NIST2.0質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索，結(jié)合人工圖譜解析，并查對(duì)有關(guān)質(zhì)譜文獻(xiàn)[5-8]，從而鑒定出各樣品揮發(fā)油的化學(xué)成分，并用峰面積歸一化法測(cè)定了各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)圖1和表2。

表1 市售單葉蔓荊子揮發(fā)油的得率及其物理常數(shù)(n=3)

4 討論

4.1 市售單葉蔓荊子揮發(fā)油含量江西產(chǎn)者平均為0.208%，廣西玉林產(chǎn)者為0.156%；江西產(chǎn)揮發(fā)油明顯高于廣西玉林，此外，從外觀性狀、旋光度、折光率也存在一定差異。

4.2 GC-MS結(jié)果表明市售不同產(chǎn)地的單葉蔓荊子揮發(fā)油化學(xué)成分存在差異。兩個(gè)產(chǎn)地單葉蔓荊子揮發(fā)油中共鑒定出47個(gè)化合物，廣西玉林產(chǎn)者鑒定出32個(gè)化合物，江西產(chǎn)者鑒定出28個(gè)化合物，兩者共有的化合物僅有13種，即桉樹(shù)腦、6,6-二甲基庚烷-2,4-二烯、3,3-二甲基-2-(3-丁二烯)-環(huán)戊酮、7-異丙基-1,1,4a-三甲基-1,2,3,4,4a,9,10,10a-八氫化菲、4-氨基-6,7-二甲基-1H-吡咯[3,4-c]吡啶-1,3,(2H)-二酮、雌酚酮、7-(2-羥苯基)(7H)三唑[e]苯并呋喃、[4aS-(4aS,4bR,7R,10aR)]-1,1,4a,7-四甲基-7-乙烯基-1,2,3,4,4a,4b,5,6,7,8,10,10a-十二氫化菲、[4aS-(4aS,5S,8aR)]-1,1,4a-三甲基-6-亞甲基-5-(3-甲基-2,4-戊二烯)-十氫化萘、4-乙?；?2(1H)-喹啉酮、2-(4-氟代苯甲基)-N-苯基-乙酰胺、7-甲基-1,2,3,5,8,8a-六氫化萘、4-氨基-6-羥基吡唑-(3,4-d)嘧啶。共有組分的含量分別占各自揮發(fā)油總量的55.67%、69.39%。

4-氨基-6,7-二甲基-1H-吡咯[3,4-c]吡啶-1,3,(2H)-二酮、3,3-二甲基-2-(3-丁二烯)-環(huán)戊酮、7-異丙基-1,1,4a-三甲基-1,2,3,4,4a,9,10,10a-八氫化菲、4-乙?；?2(1H)-喹啉酮等在兩產(chǎn)地單葉蔓荊子揮發(fā)油成分中相對(duì)含量較高，質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在5.00%以上。

在非共有成分中，廣西玉林產(chǎn)單葉蔓荊子揮發(fā)油成分1,5-二苯基-2H-1,2,4-三唑啉-3-硫酮(9.87%)含量較高；江西產(chǎn)則揮發(fā)油成分1-(4-乙氧苯基)-苯并咪唑-5-胺(10.35%)含量較高。此外，江西產(chǎn)單葉蔓荊子揮發(fā)油成分含α-蒎烯(1.07%)、β-蒎烯(0.28%)、4-蒈烯(2.29%)等；廣西玉林產(chǎn)者含崁烯(0.17%)、1-石竹烯(2.65%)、α-石竹烯(0.12%)等。

4.3 關(guān)于單葉蔓荊子揮發(fā)油成分，楊再波等[9]報(bào)道主要成分中α-蒎烯含量為4.26 %，莰烯含量為4.89 %，張治國(guó)等[10]報(bào)道主要成分中α-蒎烯含量為8.93 %，莰烯含量為6.65 %。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，市售廣西蔓荊子揮發(fā)油中并未檢測(cè)出這兩者成分，可能與銷售過(guò)程中包裝是否嚴(yán)密、貯藏時(shí)間[11]等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)首次比較了江西市售單葉蔓荊子揮發(fā)油成分的異同，可為不同產(chǎn)地蔓荊子的選擇使用提供一定參考。此外本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除產(chǎn)地不同的單葉蔓荊子揮發(fā)油質(zhì)量存在差異外，不同飲片生產(chǎn)企業(yè)提供的產(chǎn)地同為江西的單葉蔓荊子揮發(fā)油的含量及物理性質(zhì)差異亦顯著，是否和以上因素有關(guān)，有待進(jìn)一步研究探討。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典·一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:340-341.

[2]中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所.中藥志[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1984：679.

[3]中國(guó)植物志編委會(huì).中國(guó)植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1982：138-140.

[4]楊云.天然藥物化學(xué)成分提取分離手冊(cè)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2003.

[5]林啟壽. 中草藥成分化學(xué)[M]. 北京：科學(xué)出版社，1977.

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[7]從浦珠，蘇克曼. 分析化學(xué)手冊(cè).第九冊(cè)[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000.

[8]中國(guó)質(zhì)譜學(xué)會(huì)有機(jī)專業(yè)委員會(huì).香料質(zhì)譜圖集[M].北京：科學(xué)出版社，1992：6，41.

[9]楊再波, 趙 超.固相微萃取 /氣相色譜-質(zhì)譜法分析蔓荊子揮發(fā)性化學(xué)成分[J] .河南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版, 2006, 25(4):6-19.

[10]張治國(guó), 王仁卿, 梁頌春.單葉蔓荊果實(shí)揮發(fā)油成分與性質(zhì)和黃酮含量的研究[J] .河南科學(xué), 1999, 17(S0):50-54.

[11]劉小芬，楊成梓，范世明，等.福建省市售蔓荊子質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].亞熱帶植物科學(xué)，2011,40(1)：74.

張金蓮，碩士，教授。研究方向：中藥學(xué)。Tel: 07918-7118995，E-mail: jxjzzjl@163.com。

江西省衛(wèi)生廳中醫(yī)藥科研計(jì)劃項(xiàng)目(2013Z003)；江西省教育廳科技計(jì)劃項(xiàng)目(GJJ13617)；江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(20114BAB205075)。

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2015-04- 05)編輯：曾文雪