胃癌組織環指蛋白43表達變化及意義

于藝，趙瀅，劉嚴峰(大連醫科大學附屬第一醫院，遼寧大連60;中國醫科大學附屬盛京醫院)

胃癌組織環指蛋白43表達變化及意義

于藝1，趙瀅2，劉嚴峰1
(1大連醫科大學附屬第一醫院，遼寧大連116011;2中國醫科大學附屬盛京醫院)

摘要:目的探討環指蛋白43(RNF43)在胃癌發生、發展中的作用機制。方法取180例胃癌患者手術切除腫瘤組織及其癌旁組織標本。采用免疫組織化學方法檢測RNF43表達，分析RNF43表達水平與胃癌臨床病理特征及患者預后的關系。結果胃癌組織RNF43高表達率為46.1%(83/180)，癌旁組織為28.6%(51/180)，兩者比較P＜0.05。發生遠處轉移、淋巴結轉移及TNM分期高(Ⅲ+Ⅳ)的胃癌患者RNF43高表達率高(P均＜0.01)。RNF43蛋白高表達及低表達者總生存期分別為44.7個月(95%CI:39.5～49.9個月)、61.1個月(95%CI:55.6～66.6個月)，兩者比較P＜0.01。結論胃癌組織RNF43高表達可能是胃癌侵襲、轉移及不良預后的原因之一。

關鍵詞:胃腫瘤;環指蛋白43;侵襲;轉移;生存分析

Expression changes and significance of RNF43 in gastric cancer tissues

YU Yi，ZHAO Ying，LIU Yan-feng
(The First Affiliated Hospital ofdalianmedical University，Dalian 116011，China)

Abstract:Objective To investigate the effect of ring finger proteins 43(RNF43)in the occurrence anddevelopment of gastric cancer tissues.Methods The expression of RNF43 wasdetected in 180 gastric cancer tissues and corresponding adjacent tissues by immunohistochemistry.The correlations of RNF43 expression with the clinicopathological features and prognosis of patients were analyzed.Results The high expression rate of RNF43 in the gastric cancer tissues was 46.1%(83/180)，and 28.6%(51/180)in the adjacent tissues(P = 0.020).The high expression rate of RNF43 in gastric cancer patients withdistantmetastases，lymph nodemetastasis and TNM stage(Ⅲ+Ⅳ)was higher(all P＜0.01).The overall survival(OS)of RNF43 high protein expression and low expression were respectively 44.7months(95% CI: 39.5-49.9months)and 61.1months(95% CI: 55.6-66.6months)，and significantdifference was found(P =0.004).ConclusionThe high expression of RNF43 in gastric cancer tissuesmay be one of the reasons of invasion，metastasis and poor prognosis in gastric cancer.

Key words:stomach neoplasms; ring finger proteins 43; invasion;metastasis; survival analysis

環指蛋白(RNF)家族在生物體內通過泛素-蛋白酶作用降解特定的蛋白，參與細胞周期、凋亡、信號傳導以及DNA修復等生物過程。環指蛋白43(RNF43)是RNF家族新成員，其在直腸癌組織中高表達，促進直腸癌細胞增殖，抑制細胞凋亡［1～5］。近年來研究證實，RNF43是結直腸癌中最常見的突變基因之一，促進腫瘤的發生、發展［6］。但其與胃癌發生發展的關系鮮見報道。為此我們于2009年6月～2013年11月進行了如下研究。

1　資料與方法

1.1臨床資料選取2009～2013年大連醫科大學附屬第一醫院診治的胃癌患者180例，男101例、女79例，年齡29～72歲。180例患者均行手術治療，經組織病理學檢查確診。收集到有可用資料記錄的病例分別為:腫瘤大小144例、浸潤深度178例、腹水175例、遠處轉移117例、淋巴結轉移172例、TNM分期125例、總生存期(OS)117例。隨訪3～78個月，OS平均54.5個月。

1.2胃癌及其癌旁組織RNF43表達檢測取患者手術切除的腫瘤組織及其相應的癌旁組織標本，－80℃冰箱保存，采用免疫組織化學染色法檢測RNF43表達。具體步驟:取出凍存的組織樣本，室

溫解凍，4%多聚甲醛固定，常規制作石蠟包埋組織塊，4 μm連續切片，固定于多聚賴氨酸化防脫載玻片上，依次進行脫蠟、脫苯、水化，在pH 6.0檸檬酸鹽緩沖液中進行高壓修復(80 kPa)。修復后切片經過氧化氫、正常山羊血清處理后，滴加多克隆兔抗人RNF43抗體(ab129401，Abcam，UK，1∶200稀釋)于4℃孵育過夜;次日，切片依次滴加生物素標化二抗、親和去-辣根過氧化酶復合物后，進行DAB染色;經蘇木素復染后觀察。同步以PBS液代替RNF43抗體作為陰性對照。由兩位臨床病理醫生分別對染色結果進行盲法判讀。染色結果評價采用積分法，即染色強度與細胞著色百分率相乘得最終總積分。每張切片計數200個細胞，RNF43表達于細胞核。染色強度為無染色0分、弱強度1分、中等強度2分、高強度3分。總積分≤155%定義為低表達，＞155%定義為高表達。

1.3統計學方法采用SPSS11.5統計軟件。RNF43表達水平及其與胃癌臨床病理參數關系的分析采用Pearson χ2檢驗或Fisher確切概率法。P ＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1胃癌及其癌旁組織RNF43表達胃癌組織RNF43高表達率為46.1%(83/180)，癌旁組織為28.6%(51/180)，兩者比較P＜0.05。

2.2 RNF43表達與胃癌臨床病理特征的關系發生遠處轉移、淋巴結轉移及TNM分期高(Ⅲ+Ⅳ)的胃癌患者RNF43高表達率高(P均＜0.01)。見表1。

2.3RNF43表達對胃癌患者生存期的影響RNF43蛋白高表達者(62例)OS為44.7個月(95% CI: 39.5～49.9個月)，低表達者(55例)OS為61.1個月(95% CI: 55.6～66.6個月)，兩者比較P＜0.01。

3　討論

研究證實，RNF43參與了細胞周期、凋亡等生物學行為，對結直腸癌的發病、侵襲轉移有顯著影響。RNF43對不同腫瘤可能通過不同機制發揮不同作用。RNF43可通過與NEDL1基因結合，進而抑制其下游蛋白p53功能，從而引發促癌作用［5］; RNF43可作為負反饋調控因子抑制Wnt/β-catenin信號通路活性，從而抑制該通路促增殖作用，亦起到抑癌作用［7～9］; RNF43可與PSF/p54nrb與HAP95等結合形成復合體發揮其生物學作用［10］。本研究結果顯示，胃癌組織中RNF43表達水平顯著高于癌旁正常組織，且發生遠處轉移、淋巴結轉移及TNM分期高者RNF43高表達率更高。由此可見，RNF43可能參與了胃癌的發病、侵襲及轉移。

表1　RNF43高表達與胃癌臨床病理特征的關系［例(%)］

本研究中RNF43蛋白高表達的胃癌患者OS較低表達患者顯著縮短，說明RNF43高表達預示胃癌患者預后不良，在大腸癌的研究中也得到類似結果［11］;但是，Xi等［12］對神經膠質瘤的研究卻得到相反的結果，RNF43低表達與神經膠質瘤患者不良預后相關。這也驗證了RNF43對不同腫瘤可能通過不同機制發揮不同作用。

近年的研究認為，RNF43有望作為惡性腫瘤的標志物之一，可為腫瘤的治療提供新的靶點［4～7］。鑒于本研究的發現，可以預見，進一步深入研究RNF43蛋白在胃癌發生、發展過程中的作用及機制將能夠為胃癌的治療提供新的思路。

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收稿日期:( 2015-07-02)

通信作者:劉嚴峰，E-mail:dlliuyf@126.com

基金項目:遼寧省科學計劃項目(2013225021)。

文章編號:1002-266X(2015)36-0032-03

文獻標志碼:B

中圖分類號:R735.2

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.36.011