不同術式輸精管結扎術術后對象外周靜脈血以及精漿中8-羥基脫氧鳥苷的臨床研究

吳 翔 倪少義▲ 鄭厚斌 鄭少敏 姚曉濤 陳育娟陳俊鵬 王榕生 林細佳 方培群 何潔壁 吳獻章

1.廣東省揭陽市揭東縣（區）計劃生育服務站，廣東揭陽 515500；2.廣東省計劃生育科學技術研究所，廣東廣州510631；3.廣東省佛山市南海區里水鎮人口和計劃生育服務所，廣東佛山 528244；4.廣東省人口發展研究院，廣東廣州 510631；5.廣東省揭陽市人民醫院，廣東揭陽 522000；6.廣東省普寧市計劃生育服務中心，廣東普寧 515300；7.廣東省汕頭市金平區計劃生育服務站，廣東汕頭 515041

輸精管結扎術（簡稱男扎術）具有安全、有效、簡單、經濟等優點[1]，目前常用手術方式主要有兩種：經陰囊的傳統輸精管低位結扎術（本文簡稱為低位結扎）和經腹股溝的輸精管高位結扎術（本文簡稱為高位結扎）。男性參與計劃生育不僅有利于控制家庭規模和降低生育率水平，而且有利于保障育齡婦女生殖健康，進一步改善和提高婦女的社會地位，對家庭和諧、社會穩定及發展有重要作用[2]。本課題通過研究不同術式輸精管結扎術術后對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG 水平，試圖探討其與并發癥發生之間的相互關系，從DNA 氧化損傷水平進行研究，期望完善對不同術式輸精管結扎術的臨床應用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機收集2007 年3 月～2015 年3 在揭東縣計劃生育服務站和廣東省計劃生育科學技術研究所經陰囊的傳統輸精管低位結扎術和經腹股溝的輸精管高位結扎術術后各60 例，年齡25 ～41 歲，平均29 歲，手術至今最長時間8 年，最短時間2 年，根據相關的標準和暴露因素在課題組成員單位中隨機收集入組對象，分為經陰囊的傳統輸精管結扎術和經腹股溝的輸精管高位結扎術術后對象。將經陰囊的傳統輸精管低位結扎術術后對象定為低位結扎組，經腹股溝的輸精管高位結扎術術后對象定為高位結扎組。

1.2 納入條件

輸精管結扎術術后患者：（1）施行手術二年（含二年）以上；（2）排除性傳播性疾病；（3）排除性功能、射精功能障礙。

1.3 設備

ELX-800 酶標儀、8-羥基脫氧鳥苷（8-OhdG）特異性單克隆抗體試劑盒。

1.4 方法

用ELX-800 酶標儀通過標準曲線計算樣品中8-OhdG 濃度。本課題通過臨床實驗研究對經陰囊的傳統輸精管結扎術和經腹股溝的輸精管高位結扎術術后對象，隨機收集各60 例，空腹抽取外周靜脈血及手淫取精，2000r/min 離心10min，留取血清及精漿，-80℃冰箱保存，進行臨床試驗研究，獲得各組人群中的外周靜脈血以及精漿中8-OHdG相關水平的參數，了解不同術式輸精管結扎術術后對象8-OHdG 與并發癥的相互關系，從而探索導致男性不育的可能機理。試圖探討其與并發癥發生之間的相互關系，從DNA 氧化損傷水平進行研究，期望完善對不同術式輸精管結扎術的臨床應用。

對不同術式輸精管結扎術術后對象進行外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 檢測的研究，期望獲得相關人群的外周靜脈血以及精漿中8-OHdG 的相關水平。從分子生物學水平探討不同術式減少輸精管結扎術術后并發癥的相關機制。

1.5 統計學處理

數據整理后采用雙人雙機錄入，所有數據采用SPSS13.0 統計軟件進行統計學分析，計數資料進行x2檢驗，計量資料采用t 檢驗，P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 精液常規

所有對象精液常規均顯示無精子存在，證明輸精管結扎手術成功。

2.2 外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較

高位結扎術術后對象外周靜脈血中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于低位結扎術術后對象，差異比較具有統計學意義（P ＜0.05）；高位結扎術術后對象精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于低位結扎術術后對象，比較差異具有統計學意義；外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 水平比較，見表1。

表1 兩組對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較（

表1 兩組對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較（

組別 8-OhdG（ng/mL）血清 精漿高位結扎 324.16±102.71 129.12±213.24低位結扎 422.86±197.67 314.78±168.43 t 7.86 8.39 P ＜0.05 ＜0.05

2.3 兩組術后并發癥比較

高位結扎術術后對象術后并發癥的發生低于低位結扎術術后對象，差異具有統計學意義（P ＜0.05）,兩見表2。

表2 兩組對象術后并發癥的比較[n（%）]

3 討論

分子生物學的研究發現，人類DNA 分子中的鳥嘌呤堿基受到活性氧自由基如羥自由基、單線態氧等攻擊后，其第8 位C 原子容易結合-OH 而產生一種氧化性加合物8_羥基脫氧鳥苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanine，8-OHdG），這種DNA 氧化損傷產物能夠被DNA 修復酶剪切清除而經腎臟隨尿排泄。在已知的大約20 種DNA 氧化產物中，8-OHdG 生成量相對較高，且不受飲食影響，能用靈敏度較高的分析方法檢測，易于檢出。由于其與突變明顯相關，其含量可以反映機體的DNA 氧化損傷程度，已成為目前國際上公認的一種新型的評價機體的DNA 氧化損傷和機體氧化應激狀態的敏感指標和生物標志物[3]。另外，8-OHdG 如果不被機體有效清除，會進而引起DNA 復制過程的G-C/A-T 型堿基對配對錯誤而引起基因的點突變以至癌變。

本研究同時使用外周靜脈血以及精漿檢測8-OHdG 水平，結果顯示：經腹股溝的輸精管高位結扎術術后對象外周靜脈血以及精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平均低于經陰囊的傳統輸精管低位結扎術術后對象，同時輸精管結扎高位術后并發癥也低于經陰囊的傳統輸精管低位結扎術術后對象，表明8-OHdG 水平升高確實影響術后并發癥的發生；兩組不同術式術后對象精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于外周靜脈血中的水平，顯示外周靜脈血中8-OHdG 水平敏感于精漿。

國內外許多資料表明[4-14]，機體8-OHdG 含量與癌癥、衰老的發生、發展具有一定相關關系。因此，從降低8-OHdG 水平出發，建議采用經腹股溝的輸精管高位結扎術的手術方法落實男性采取避孕機制，這與本課題組成員之前完成的輸精管高位結扎術可以減少輸精管結扎術后并發癥相一致[15]。但是，近年來國內外有關專家學者研究認為8-OHdG水平亦與年齡、性別以及日照、劇烈運動、吸煙、飲酒、輻射等生活方式有關，而且與年齡、紫外線照射時間、吸煙、飲酒、輻射呈現正相關性關系[16-25]。加之，采用經腹股溝的輸精管高位結扎術需要在腹部兩側腹股溝處出現兩個切口，日后萬一需要行輸精管吻合術難度大、成功率低。此外日本Seino T[26]、Tamura H[27]等還發現在體外受精-胚胎移植輔助生殖技術中精液中的8-OHdG 水平與卵母細胞受孕率成反比。因此研究外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 水平在對輸精管結扎術術后對象的評估和臨床治療中有著重要意義。因此，建議輸精管結扎術采用距離睪丸、附睪較高的位置，不必要一味采用經腹股溝的，完全可以選擇經陰囊的距離睪丸、附睪有足夠高的位置作為手術入口，這樣子可以減少機體8-OHdG 含量，同時降低輸精管結扎術術后并發癥的發生。

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