純種和牛高效繁殖技術措施

佟桂芝，宋 斌，黃 紅，丁昕穎

(黑龍江省畜牧研究所 161005)

純種和牛高效繁殖技術措施

佟桂芝，宋 斌，黃 紅，丁昕穎

(黑龍江省畜牧研究所 161005)

日本和牛是當今世界公認的優秀肉牛品種之一。其肉大理石花紋明顯，由于其肉質細嫩多汁，肌肉脂肪中飽和脂肪酸含量很低，風味獨特，肉用價值極高，在日本被視為“國寶”，全球市場售價極其昂貴。快速擴繁純種和牛的繁育技術主要包括以下幾個方面。

1 同期發情與人工授精

人工授精技術自20世紀40年代問世以來，經過幾十年的不斷發展和完善，特別是精液冷凍保存技術的成熟，使人工授精技術成為肉牛育種中最重要的生物技術。該技術可以使優秀的種公牛得到更好的利用，精液冷凍保存技術使得優秀種公牛的使用范圍不再受時間和地區的限制。這就擴大了優秀種公牛在肉牛遺傳改良中的作用。精液冷凍保存技術還減少了種公牛的飼養量，提高了公牛的選擇強度，加快了群體的遺傳進展，更經濟可靠地實現肉牛品種資源保護。

使和牛母牛在同一時期內發情并排卵的技術，稱為同期發情。同期發情實質是誘導母牛在同一時期發情排卵的方法。定時輸精，是在近年發展起來的一種能使多頭母牛在短時間內集中發情和集中進行人工授精的技術。采用同期發情技術，對提高母牛繁殖率和養牛生產經濟效益具有重要意義。采取同期發情技術，減少空懷時間，確保和牛母牛1年1產，既節省飼料成本，又增加產犢收入；同期發情、配種、產犢，有利于犢牛的飼養管理和出售，符合養殖業規模化、集約化的發展趨勢；選擇配種時間，在最佳季節產犢，如避開寒冬、炎熱夏天以及枯草季節，既提高犢牛的成活率又能充分利用牧草資源，降低飼養成本；使不發情母牛發情配種，從而提高繁殖率；便于人工授精技術的推廣和普及，提高冷凍精液配種工作效率；容易操作，一般授精員經過培訓后都能夠掌握。因為操作簡單和成本低，同期發情和人工輸精是使用最廣泛的輔助生殖技術。

2 超數排卵與胚胎移植技術

牛是單胎動物，其繁殖力在很大程度上限制了生產力的發揮。隨著動物繁殖技術的發展，超數排卵從某種程度上解決了這一問題，即應用外源性促性腺激素誘發母牛卵巢發育并排出具有受精能力的卵子的方法，稱為超數排卵，簡稱“超排”。超數排卵是進行胚胎移植時，對供體母牛必須進行的程序，目的在于得到更多的胚胎。胚胎移植是對超數排卵處理的母牛(供體)，從其輸卵管或子宮內取出許多胚胎移植到另一群母牛(受體)的輸卵管或子宮內，以達到產生供體后代的目的。這是一種使少數優秀供體母牛產生較多的具有優良遺傳性狀的胚胎，使多數受體母牛妊娠、分娩而達到加快優秀供體母牛品種繁殖的一種先進繁殖技術。主要包括下列環節：①選擇生殖機能正常、具有優良遺傳特性的母牛作為供體，在發情周期的中后期，注射促性腺激素(有時需再注射前列腺素)，激發卵巢使之超數排卵。然后非手術方法(將專門的采卵管插入子宮)，用生理培養液將胚胎由子宮角沖出。②對采集的胚胎進行鑒定，選出正常者用于移植。也可以進行培養，或在零下196℃的液態氮中長期保存，待需要時再行移植。③在受體發情后的相應時間(一般和供體發情時間相差不能超過1天)，按上述采集胚胎的相同途徑，利用移植管將胚胎移植到受體子宮的一定部位內。為此，在供體發情時須選擇同時自然發情的母畜留作受體，或在對供體進行激素處理誘發超數排卵的同時，選擇若干適用的受體也注射激素，使之與供體同時發情，但不配種，留待移植之用。如使用冷凍保存的胚胎，應先選出受體母畜，待其自然發情后再根據胚胎的發育日齡進行移植。由于牛可以實現非手術采胚和移植，操作過程較易完成。通過MOET技術可以使優秀的和牛母牛能獲得更多的后代。

3 幼畜超排、活體采卵、體外受精

幼畜超排是根據性成熟前幼畜(1～2月齡)卵巢對生殖激素敏感，卵泡發育很少發生閉鎖的特殊生理特點而發明的一項高效率生產卵母細胞的新技術。誘導幼畜超數排卵技術可以充分挖掘和利用優良母畜的早期繁殖潛力，大大加快家畜育種及品種改良進程，同時也將解決種畜胚胎移植商業化所需胚胎來源匱乏及胚胎生產成本昂貴的問題，將大大促進胚胎生產的商業化應用，前景十分廣闊。但是，這種幼畜超排的卵，在體外受精后，發育到囊胚期的潛能比成年動物超排的卵發育潛能有所降低。

牛卵母細胞的活體采集技術是二十世紀90年代發展起來的一項新型獲得優秀種母牛卵母細胞技術，是繼牛體外受精、胚胎移植技術之后研究并推出的一項胚胎工程技術。該技術與體外胚胎生產(IVP)技術相結合，可以反復地從性成熟前母犢牛體內采集卵母細胞，結合體外受精(IVF)技術生產大量系譜明確的胚胎，使其繁殖后代，克服了超數排卵和屠宰取卵技術應用中需要等待母牛成熟的缺點，從而大大縮短了世代間隔，加快了育種進程。這種技術始于二十世紀80年代初期，至90年代中期實現生產性應用。目前在一些發達國家，如日本、加拿大、美國、荷蘭均實現商業化生產。采用活體采卵(LOPU)-卵母細胞體外受精(IVF)-胚胎移植(ET)配套技術。活體采卵的方法主要有盲采法、內窺鏡法和B型超聲波導引法三種。

體外受精技術也稱胚胎的體外生產技術(IVP)，包括以下幾個步驟：卵母細胞采集、卵母細胞的體外成熟、精液預處理、體外受精、胚胎體外培養、和胚胎移植。迄今為止體外受精在各個主要技術環節上的效率還不高，因此總體技術水平尚未達到應用水平的要求。

4 胚胎分割

胚胎分割是通過對胚胎進行顯微操作，人工制造和牛的同卵雙生或同卵多生的技術，是擴大胚胎來源的一條重要途徑，其理論依據是早期胚胎的每一個卵裂球都具有獨立發育成個體的全能性。母牛懷雙胎是一公一母時，會發生母犢的異性孿生不孕。而移植通過胚胎的分割技術生產的雙半胚胎，來使母牛懷雙胎，就可以避免異性雙胎現象，從而避免出生的母犢先天性不孕，失去母牛的利用價值現象。

5 性別控制

為了達到人為控制和牛群性比例，人為對胚胎性別鑒定進行了技術研究。對肉牛進行性別控制的實用技術目前有兩種，一種是利用性控精液(分離的X、Y精子)通過人工授精生產體內胚胎或通過體外受精生產體外胚胎；另一種是通過控制母牛的生殖道環境來控制胚胎的性別。而早期對胚胎進行性鑒別方法有兩種，即通過PCR法或LAMP法對體內外生產胚胎進行性鑒別，然后根據需要選擇移植方案，生產已知性別胚胎。

在肉牛良種擴繁方面，人工授精、胚胎移植等生物技術仍然發揮著重要作用；同期發情及定時輸精經技術在規模化牛場的應用加快了純種擴繁的步伐；胚胎分割、一胎雙犢研究，犢牛超排、犢牛的性別控制給和牛的純種擴繁提供無數的可能，希望在不遠的將來，該項技術達到應用推廣階段。