朝陽地區海產品副溶血性弧菌污染情況檢測

冀 威

(遼寧省朝陽市動物疫病預防控制中心 122000)

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朝陽地區海產品副溶血性弧菌污染情況檢測

冀 威

(遼寧省朝陽市動物疫病預防控制中心 122000)

為了解朝陽市鮮凍水產品副溶血性弧菌污染狀況，為預防副溶血性弧菌食物中毒提供科學依據。結果從3類140份鮮凍水產品中檢出75株副溶血性弧菌，檢出率為53.6%。在朝陽市售水產品中存在副溶血性弧菌污染，建議加大對水產品的監督檢查，提示在細菌性食物中毒的調查中，如食用了水產品，應考慮副溶血性弧菌污染。

水產品；副溶血性弧菌；檢測

1 生物學特性

副溶血性弧菌(VP)屬弧菌科，是一種嗜鹽革蘭陰性致病菌，常存在于近海岸的海水、海底沉積物、魚蝦貝殼類海產品中。海產品副溶血性弧菌帶菌率的種系差異主要取決于寄主的生活習性和攝食方式。溫度也是VP繁殖的重要影響因子，直接影響海產品中VP的生長繁殖。

2 副溶血性弧菌的危害

副溶血性弧菌于1950年從日本一次暴發性食物中毒中分離發現。該菌為海產品中常見菌，主要引起食物中毒和急性腹瀉，尤以日本、東南亞、美國及我國臺北地區多見，也是我國大陸沿海地區食物中毒中最常見的致病菌。

3 材料與方法

3.1 樣品采集

樣品來源本次調查于2009年進行。用隨機抽樣的方法采集朝陽市各市場和大型超市零售的新鮮魚蝦貝，共采樣3次，采樣時間分別為8月、9月、10月，每次分別隨機采取海水魚、蝦、貝類。樣品采集后1～2h內送實驗室檢驗。所采集的海水魚包括鯧魚、小黃魚、梅魚、白菇魚、黃菇魚、帶魚6種魚，各取樣10份。海水蝦包括南美白對蝦、日本對蝦、斑節對蝦、紅蝦和刀額新對蝦5種蝦，各取樣10份。貝類包括扇貝、蠣子、蜆子3種貝，各取樣10份。3類共140份鮮凍水產品。

3.2 試劑

試劑有3%的氯化鈉堿性蛋白胨水、TCBS瓊脂、3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI)、3.5%氯化鈉胰酪胨大豆瓊脂(TSA)、嗜鹽性胰酪胨肉湯，均由北京路橋有限責任公司提供。弧菌顯色培養基由法國科瑪嘉公司生產生化試劑由法國梅里埃公司生產。

3.3 主要儀器

主要儀器有均質器及無菌均質袋、電熱恒溫培養箱。

3.4 方法

3.4.1 增菌

魚類以無菌操作秤取表面組織、腸、鰓、貝殼類先在符合生活飲用水標準的流水下洗刷外殼并甩干，無菌操作打開外殼，取全部內容物，均無菌剪碎。

蝦類：取樣部位為腹部內的肌肉。將蝦在流水下沖洗，摘去頭胸節，用滅菌剪子剪除腹節與頭胸節連接處的肌肉，然后擠出腹節內的肌肉。秤取25g樣品，加入225mL的堿性蛋白胨水中，混勻，置37℃恒溫箱培養18h。

3.4.2 分離培養

用接種環取上述培養后的堿性蛋白胨水增菌液，劃線接種于TCBS選擇性瓊脂平板,置37℃培養24h 。

3.4.3 鑒定

每板挑取2～3個可疑菌落，分別劃線科瑪嘉顯色瓊脂平板上，置37℃培養24h。在科瑪嘉顯色瓊脂平板上，副溶血性弧菌為中等大小紫紅色圓形隆起，混濁不透明的菌落。將科瑪嘉顯色瓊脂平板上可疑菌落穿刺接種TSI，37℃培養24h，副溶血性弧菌在TSI上產生堿性斜面(紅色)、酸性底部(黃色)，不產氣，有動力，不產H2S，瓊脂內輕微混濁。同時進行氧化酶試驗，劃線TSA，置42℃培養24h，副溶血性弧菌生長。副溶血性弧菌為氧化酶陽性。將TSA培養物進行耐鹽試驗，結果符合在無鹽和10%鹽胨水中不生長，7%鹽胨水中生長特征。

涂片鏡檢：將可疑菌落涂片，進行革蘭氏染色，鏡檢觀察形態。副溶血性弧菌為革蘭氏陰性，成棒狀、弧狀、卵圓狀等多形態，無芽孢，有鞭毛。

4 實驗結果

本實驗共采集3類140份樣品，檢出副溶血性弧菌75株， 檢出率為53.6%。魚類檢測份數各10份，鯧魚、小黃魚、梅魚、白菇魚、黃菇魚、帶魚檢測菌株數分別為5份、7份、6份、8份、7份、7份。平均檢出率66.7%，3類樣品中檢出率最高。貝類產品監測份數各10份，扇貝、蠣子、蜆子檢測菌株數分別為3份、1份、1份，平均檢出率16.7%，相對較低。蝦類檢測份數各10份南美白對蝦、日本對蝦、斑節對蝦、紅蝦、刀額新對蝦檢測菌株數分別為5份、6份、7份、8份、4份，平均檢出率60%。

由此可見，受檢的海產品的副溶血性弧菌污染較嚴重。從不同種類看魚類、蝦類污染較貝類高，從不同標本整體污染情況看，魚類、蝦類樣品比貝類高。說明抽檢的海產品均存在不同程度的副溶血性弧菌污染，提示應加強衛生監測，加強科學食用海產品的衛生安全宣傳。

5 結論

副溶血性弧菌是海產品中常帶菌種，常存在于近海岸的海水、海底沉積物、魚蝦貝殼類海產品中。本地海產品副溶血性弧菌帶菌含量較高，以魚類污染最為嚴重。溫度是副溶血性弧菌繁殖的重要影響因子，直接影響海產品中副溶血性弧菌的生長繁殖。