白細胞介素10、白細胞介素17及γ干擾素在川崎病患兒血清中的表達及臨床意義

劉志國, 王華春, 陳　健, 劉風穎, 王　振, 王慶然,王　剛

(河北省故城縣醫院 兒二科, 河北故城, 253800)

白細胞介素10、白細胞介素17及γ干擾素在川崎病患兒血清中的表達及臨床意義

劉志國, 王華春, 陳健, 劉風穎, 王振, 王慶然,王剛

(河北省故城縣醫院 兒二科, 河北故城, 253800)

摘要:目的探討白細胞介素(IL)-10、IL-17及γ干擾素(IFN-γ)在川崎病(KD)患兒血清中的表達及臨床意義。方法選取本院收治的31例KD患兒為觀察組，另選取健康體檢患兒30例為對照組。記錄觀察組患兒急性期、亞急性期和恢復期的血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表達，并分析與冠狀動脈損傷的相關性。結果觀察組血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平隨治療時間的延長不斷下降，但仍顯著高于對照組(P<0.05, P<0.01)。Spearman等級相關分析結果顯示，血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平與疾病改善程度呈顯著負相關(r=-0.938, -0.515, -0.922, P=0.000)。血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平在損傷組和未損傷組中均隨著治療時間的延長而顯著下降(P<0.05, P<0.01)，損傷組各指標水平顯著高于同期未損傷組(P<0.05, P<0.01)。結論血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平檢測可以反映KD患兒的病情進展，并可作為預測冠脈損傷發生的參考指標。

關鍵詞:白細胞介素-10; 白細胞介素-17; γ干擾素; 川崎病; 冠狀動脈損傷

川崎病(KD)是一種好發于嬰兒的發熱性疾病，其主要病理改變為全身血管性血管炎，對冠狀動脈的損害較為明顯，其中>80%的患兒年齡小于5歲[1]。KD的發病機制目前仍不完全清楚，預測其與異常免疫反應和感染相關。有研究認為，免疫細胞可以激活并產生多種細胞因子及其介導的免疫反應，其與KD冠狀動脈的損傷具有顯著相關性，其中，白細胞介素(IL)-10、IL-17和干擾素(IFN)-γ起主要作用[2-4]。本文主要通過雙抗體夾心酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測KD患者血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表達，分析其與相關臨床指標的相關性，并探討其在KD并發冠狀動脈損傷的診斷和預防中的可能作用。

1資料與方法

選擇2013年1月—2014年10月收治的KD患者31例，設為觀察組，均符合第七次世界兒童川崎病研討會制定的KD診斷標準[5]，起病均<1周。其中男25例，女6例；年齡10個月～6歲，中位年齡3.5歲。通過彩色多普勒檢測，根據患兒是否并發冠脈損傷分為損傷組(n=19)和未損傷組(n=12)。另選取健康體檢兒童30例為對照組，其中男24例，女6例；年齡1～5歲，中位年齡3.3歲；排除感染性疾病患兒。2組年齡、性別等一般資料差異無統計學意義(P>0.05), 具有可比性。

治療方法：觀察組患者均在患病10 d內給予靜脈滴注丙球治療, 2 g/kg; 阿司匹林80 mg/(kg·d), 分三次口服。

標本采集：觀察組患兒分別在治療前(急性期)、治療1周(亞急性期)和治療2周(恢復期)后清晨抽取空腹靜脈血5 mL, 4 ℃下以2 000 r/min速度離心20 min，分離血清，取上清液保存于-70 ℃冰箱中。對照組均抽取空腹靜脈血3 mL備檢。采用ELISA法檢測檢測血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平，試劑盒均購自北方邦定泰克生物技術公司。

2結果

2.1　觀察組和對照組患兒血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表達

觀察組患兒血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平與對照組比較，差異均有統計學意義(P<0.05或P<0.01)。隨著治療時間的延長，以上指標均顯著降低(P<0.05或P<0.01), 而IL-17和IFN-γ在亞急性期與急性期差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。Spearman等級相關分析結果顯示，血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平與病情分期呈顯著負相關(r=-0.938, -0.515, -0.922,P=0.000)。

ng/L

與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01; 與恢復期比較，#P<0.05, ##P<0.01; 與亞急性期比較, △△P<0.01。

2.2　冠狀動脈損傷對血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平表達的影響

血清IL-10、IL-17和IFN-γ水平在損傷組和未損傷組中均隨著治療時間的延長而顯著下降(P<0.05或P<0.01)，損傷組各指標水平均顯著高于同期未損傷組(P<0.05或P<0.01)。見表2。

ng/L

與未損傷組比較，*P<0.05，**P<0.01; 與恢復期比較, #P<0.05, ##P<0.01;

與亞急性期比較，△P<0.05, △△P<0.01。

3討論

大量研究[6]表明, KD可能是感染引起的急性自身免疫性血管炎綜合征。雖然KD的發病機制至今尚不清楚，但細胞因子在自身免疫性疾病中的作用仍引起了學者們的注意。研究[7-9]認為，活化的免疫活性細胞分泌的炎性介質，可參與KD的發生發展。Th17細胞在KD急性期患者血清中急速升高，且Th17細胞比例和IL-17的表達水平均顯著上調，推測IL-17可能作為急性炎癥的啟動因素，導致KD免疫紊亂的發生[10-11]。IL-10由Th12細胞分泌，是一種可以調節T細胞、B細胞和NK細胞的產生的多能細胞因子，還具有抑制細胞黏附分子的產生、阻滯炎癥細胞因子的分泌以及免疫活性細胞因子的表達，從而預防血栓形成的作用。研究[12-13]發現, IL-10水平在KD各治療期均顯著高于對照組，治療后顯著下降，表明IL-10可能參與了KD免疫性血管損傷以及血管炎的發生和發展過程。IFN-γ是一種特征性細胞因子，由Th1細胞分泌，具有激活中性粒細胞并促進其釋放炎癥介質和炎癥蛋白的作用。有研究[14-15]結果顯示，KD患兒治療前IFN-γ水平異常升高，治療后有顯著降低，說明IFN-γ水平變化可能可作為預測兒童是否患KD的重要指標。本研究結果顯示，KD患兒急性期、亞急性期和恢復期, IL-10、IL-17及IFN-γ水平均有顯著下降，觀察組顯著高于對照組，且Spearman等級相關分析顯示, 3種指標與KD改善程度呈顯著負相關，表明3種指標水平越高, KD患兒癥狀越嚴重。

KD所致冠脈損傷的機制較為復雜，而免疫炎癥因子是主要原因之一。血液循環系統及內皮細胞中的免疫活性細胞的相互聚集和黏附是導致炎癥反應浸潤深層血管的關鍵性原因，說明KD患兒的免疫效應細胞可向血管局部浸潤，對血管損傷的生理和病理機制有重要影響[16]。有研究認為，IL-10在KD的全身系統中起負反饋調節，其水平偏低則不足以拮抗其他炎癥因子(如IL-17、IFN-γ等)的作用引起冠脈損傷，且IL-10水平在急性期顯著高于亞急性期和對照組，提示IL-10水平可能與KD是否引起冠脈損傷以及損傷程度有關[12]。本研究中，IL-10、IL-17及IFN-γ水平在冠狀動脈損傷組和未損傷組各治療期均有顯著下降，損傷組各指標水平顯著高于未損傷組，表明冠脈損傷患兒IL-10、IL-17及IFN-γ水平均可能有助于預測和預后KD患兒冠狀動脈損傷。但由于本研究病例數較少，指標分析有局限性，后期需更多大型試驗進一步研究。

參考文獻

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Expression and clinical significance of IL-10, IL-17

and IFN-γ in infants with Kawasaki disease

LIU Zhiguo, WANG Huachun, CHEN Jian, LIU Fengying, WANG Zhen,

WANG Qingran, WANG Gang

(SecondDepartmentofPediatrics,GuchengHospital,Gucheng,Hebei, 253800)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expression and clinical significance of interleukin (IL)-10, IL-17 and γ interferon (IFN-γ) in infants with Kawasaki disease (KD). MethodsA total of 31 KD infants were selected as observation group, while another 30 healthy infants were selected as control group. The expression of IL-10, IL-17 and IFN-γ in the acute, sub-acute and recovery stages of both groups were observed and their relationships with coronary artery damage were analyzed. ResultsSerum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels decreased continuously along with the treatment in the observation group, but were still significantly higher than the control group (P<0.05 or P<0.01). Spearman rank correlation analysis results showed that serum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels were in negative association with disease progression (r=-0.938, -0.515, -0.922, P=0.000). Serum IL-10, IL-17 and IFN-γ levels decreased significantly in damage group and non-damage group along with the treatment (P<0.05 or P<0.01), which were also markedly higher in damage group than in non-damage group (P<0.05 or P<0.01). ConclusionSerum IL-10, IL-17 and IFN-γ level detection can reflect the disease progression of KD infants, which can be used as the reference indexes for the predication of coronary artery damage.

KEYWORDS:interleukin-10; interleukin-17; γ interferon; kawasaki disease; coronary artery damage

基金項目:中國高校醫學期刊臨床專項資金(11520969)

收稿日期:2015-03-09

中圖分類號:R 725.9

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)11-064-03

DOI:10.7619/jcmp.201511019