云南省部分地區稻瘟病菌對三環唑的敏感性研究

番華彩， 白亭亭， 楊佩文， 郭志祥， 曾 莉

(云南省農業科學院農業環境資源研究所，云南昆明 650205)

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云南省部分地區稻瘟病菌對三環唑的敏感性研究

番華彩， 白亭亭， 楊佩文， 郭志祥， 曾 莉*

(云南省農業科學院農業環境資源研究所，云南昆明 650205)

[目的]了解云南省部分稻區稻瘟病菌對三環唑的敏感性，為三環唑的科學使用及抗藥性監測提供理論依據。[方法]采用菌絲生長速率法測定了云南省部分稻區的稻瘟病菌對三環唑的敏感性。[結果]供試稻瘟病菌對三環唑的抑制中濃度(EC50值)在41.284 9～72.722 4 mg/L，不同地區菌株敏感性存在差異，其中最敏感的是大理地區菌株，其EC50平均值為49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地區菌株，其EC50平均值為65.000 4 mg/L，二者相差1.33倍。[結論]大多數菌株對三環唑表現敏感，但也出現低水平抗藥性的群體，采用三環唑防治稻瘟病具有一定的風險性。

稻瘟病菌；三環唑；敏感性

稻瘟病(M.grisea)是我國水稻的三大主要病害之一。20世紀90年代以來，我國稻瘟病的年發生面積均在380萬hm2以上，年損失稻谷達數億千克[1-2]。在云南省，稻瘟病主要發生在優質稻區和高海拔水稻種植區以及山區，常年發生面積23萬hm2左右，約占水稻種植面積的24%。每年因稻瘟病發生而造成的水稻產量損失在10萬t以上。近年來，稻瘟病在云南各水稻產區均呈現出中等偏重發生趨勢，嚴重制約了水稻產量的增加和品質的提高[3-4]。稻瘟病的防治措施主要包括抗病育種、藥劑防治和栽培管理。其中抗病品種多是基于“基因對基因”學說的垂直抗性品種, 抗病性易喪失。化學防治具有經濟、高效、方便、迅速等優點，一直是稻瘟病綜合治理體系中不可缺少的部分，在病害大流行或品種抗病性喪失期間更是最主要的、不可替代的防治手段[5]。

目前，用于防治稻瘟病的化學藥劑主要有三環唑、富士一號、稻瘟凈、異稻瘟凈、克瘟散、嘧菌酯、苯氧菌酯和烯丙異噻唑等。三環唑是一類黑色素合成抑制劑，屬間接作用化合物。該藥劑由于對病原菌沒有直接的殺菌或抑菌作用，其獨特的作用機制使得化合物具有高效、低毒和低抗藥性風險的特點，是未來殺菌劑發展的重要方向之一。在我國，三環唑是目前防治稻瘟病的主要藥劑，其內吸性強，能迅速被水稻各部位吸收，持效期長，藥效穩定，用量低并且抗雨水沖刷[5-7]，可用于浸根或葉面噴霧處理。筆者用毒力測定方法測定了云南省部分地區稻瘟病菌對三環唑的敏感性，旨在為三環唑的科學使用及抗藥性監測提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試菌株。供試稻瘟病菌菌株分別采自云南省宜良縣、紅河州、保山市、大理市和江川縣(表1)。

1.1.2供試藥劑。75%三環唑可濕性粉劑由四川省化學工業研究設計院生產。

表1 試驗菌株編號和采集地點

1.2 方法

1.2.1含藥培養基的制備。在無菌條件下，將三環唑配制成一定濃度的稀釋液，按一定比例加入到滅菌培養基中，配制成藥劑濃度分別為60、70、80、90、100、110、120 mg/L的含藥培養基，將含藥培養基混合均勻后倒入直徑為9 cm的培養皿中，制成不同濃度的含藥平板，備用。

1.2.2敏感性測定。采用生長速率法。在PDA平板培養基中培養各菌株7 d后，用滅菌的打孔器從各菌株菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌絲塊，用接菌針取菌苔，菌面向下，分別接種到含不同濃度三環唑的PDA培養基平板上, 每處理3次重復，以加入無菌水的培養基平板為對照。28 ℃下恒溫培養，7 d后用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，計算藥劑對菌絲生長的抑制百分率。通過各處理濃度的對數(X) 和菌絲生長抑制率的幾率值(Y) 進行回歸分析，計算出三環唑對各參試菌株的抑制中濃度EC50。

菌絲生長抑制率=[1-(藥劑處理菌落直徑-5 mm)/(對照處理菌落直徑-5 mm)]×100%

2 結果與分析

2.1 三環唑對稻瘟病菌毒力測定結果由表2可知，三環唑對稻瘟菌菌絲生長有一定的抑制作用，隨藥劑濃度升高，菌絲生長抑制率依次增加。當藥劑濃度為60 mg/L時，云南保山菌株的平均菌絲抑制率達45.51%；云南昆明宜良菌株的平均菌絲抑制率達43.24%；云南玉溪江川菌株的平均菌絲抑制率達51.60%；云南大理菌株的平均菌絲抑制率達54.07%；云南紅河菌株的平均菌絲抑制率達50.95%；供試菌株的平均菌絲抑制率達49.36%。當藥劑濃度為120 mg/L時，云南保山菌株的平均菌絲抑制率達84.81%；云南昆明宜良菌株的平均菌絲抑制率達77.89%；云南玉溪江川菌株的平均菌絲抑制率達78.84%；云南大理菌株的平均菌絲抑制率達79.48%；云南紅河菌株的平均菌絲抑制率達79.97%；供試菌株的平均菌絲抑制率達80.20%。

表2 不同濃度三環唑對稻瘟病菌菌絲抑制率 %

2.2 不同地區稻瘟病菌對三環唑敏感性檢測結果由表3可知，不同菌株對三環唑敏感性不同。最敏感菌株是08HH-3菌株，最不敏感的菌株是08BS-5菌株，其EC50分別為37.920 3、68.895 5 mg/L，相差1.33 倍。供試菌株中，采自保山的平均EC50值為63.248 1 mg/L，宜良的平均EC50值為65.000 4 mg/L，江川的平均EC50值為54.732 0 mg/L，大理的平均EC50值為49.004 3 mg/L，紅河的平均EC50值為53.808 1 mg/L。

表3 云南省不同地區稻瘟病菌對三環唑的敏感性

3 結論與討論

該研究結果表明，來自云南不同地區的稻瘟病菌菌株對三環唑的敏感性存在一定差異。最敏感的是大理地區菌株，其EC50值為49.004 3 mg/L，最不敏感的是宜良地區菌株，其EC50值為65.000 4 mg/L，相差1.33倍，相差倍數不大。其原因可能是由菌株個體差異引起的或者由于抗藥性問題所致，還需進一步研究。

黃星等[8-10]研究報道，廣西、廣東、安徽、江蘇和遼寧等稻區的稻瘟病菌對三環唑仍屬于低抗藥性風險，關于云南稻瘟病菌是否對三環唑產生了抗藥性，需進一步研究。三環唑與其他防治稻瘟病藥劑的作用機理不同，稻瘟凈和異稻瘟凈屬于單作用位點殺菌劑，易產生抗藥性，而三環唑則屬于雙位點作用殺菌劑，主要作用于合成黑色素生物途徑中的三羥基奈酚還原酶和四羥基奈酚還原酶，不易產生抗藥性，屬于低抗性風險類農藥[11]。該藥劑除了具有抗侵入的作用機制外，還具有誘導抗病反應、抑制孢子黏液分泌等多種作用。

[1] 陳利鋒,徐敬友.農業植物病理學[M].北京:中國農業出版社,2005.

[2] 周光召.面向21世紀的科技進步與社會經濟發展[M].北京:中國科技出版社,1999.

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[4] 呂建平. 2005年云南省病蟲害發生趨勢預報[J].山東農藥信息,2005(7): 31.

[5] 張傳清,周明國,朱國念.稻瘟病化學防治藥劑的歷史沿革與研究現狀[J].農藥學學報,2009,11(1): 72-80.

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[7] 馬秀云.三環唑防治稻瘟病小竅門[J].南方農業,2008,2(2): 49.

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[10] 張傳清,周明國,薛娜.稻瘟病菌對三環唑的敏感性檢測技術與抗藥性風險評估[J].中國水稻科學,2005,19(1):79-84.

[11] 楊榮明,周明國,葉鐘音.三環唑防治稻瘟病的作用機制[J].南京農業大學學報,1998,21(2): 34-37.

Sensitivity Detection ofMagnaporthegriseafrom Parts of Yunnan Province to Tricyclazole

FAN Hua-cai, BAI Ting-ting, YANG Pei-wen, ZENG Li*et al

(Institute of Agriculture Environment and Resource, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming, Yunnan 650205)

[Objective] The sensitivity ofM.griseafrom parts of Yunnan Province to Tricyclazole was understood to provide theoretical basis for use and resistance monitoring of Tricyclazole. [Method] The sensitivity of rice blast fungi isolates to Tricyclazole in parts of Yunnan Province was measured by mycelium growth rate method. [Result] TheEC50of strains was dispersive from 41.284 9 mg/L to 72.722 4 mg/L. The sensitivity of different strains to Tricyclazole had difference. The most sensitive strains was Dali strains, and the average ofEC50was 49.004 3 mg/L. The least sensitive strains were Yiliang strains, and the average ofEC50was 65.000 4 mg/L. The sensitivity difference between them was 1.33 times. [Conclusion] Most of the strains were still higher sensitivity. Some low-level resistance sub-groups were appeared. Using Tricyclazole to control rice blast had some risks.

M.grisea; Tricyclezole; Sensitivity

國家香蕉產業技術體系專項(CARS-32)；云南省農業科學院農業環境資源研究所所長青年基金項目(hz2012001)；云南省自然科學基金項目(2011FB119)。

番華彩(1980- )，女，云南德宏人，助理研究員，碩士，從事植物病理學、香蕉病害等研究。*通訊作者，研究員，碩士，從事植物病理學、香蕉病蟲害及綜合防控技術等研究。

2014-11-26

S 435.111.4+1

A

0517-6611(2015)02-142-02