叉枝斑鳩菊低極性GC-MS分析及抗氧化活性測試

楊 丹，劉賢賢，張 業(yè)，王 凱，徐莉莉，程忠泉*

(1.桂林師范高等專科學(xué)校化學(xué)與藥學(xué)系，廣西桂林 541001；2.云南大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院，云南昆明 650091)

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叉枝斑鳩菊低極性GC-MS分析及抗氧化活性測試

楊 丹1，2，劉賢賢1，張 業(yè)1，王 凱1，徐莉莉1，程忠泉1*

(1.桂林師范高等?？茖W(xué)?；瘜W(xué)與藥學(xué)系，廣西桂林 541001；2.云南大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院，云南昆明 650091)

[目的]研究叉枝斑鳩菊中低極性成分及不同萃取部分的抗氧化活性。[方法]經(jīng)溶劑提取后，以面積歸一化法計(jì)算各組分含量。叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，并測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進(jìn)行對比。[結(jié)果]鑒定了29個(gè)化合物的，其含量占總檢出峰的88.30%，并證實(shí)正丁醇萃取部分具有一定的抗氧化活性。[結(jié)論]通過對叉枝斑鳩菊低極性部分進(jìn)行GC-MS分析及抗氧化活性測試，該植物有進(jìn)一步研究的價(jià)值。

叉枝斑鳩菊；低極性成分；GC-MS；抗氧化活性

叉枝斑鳩菊(Vernoniadivergens(DC.)Edgew.)為菊科(Compositae)斑鳩菊屬(Vernonia)植物，該屬植物超過1 000種，多數(shù)為草本、木本植物或樹木，廣泛分布于熱帶地區(qū)[1]。斑鳩菊屬化學(xué)成分類型豐富，如黃酮、萜類、生物堿等。這些化合物往往具有比較廣泛的生物活性，如抗腫瘤、抗感染，治療瘧疾等[2-5]。為進(jìn)一步研究叉枝斑鳩菊的藥理活性，筆者在此對采于廣西柳州的該植物的低極性部分進(jìn)行了氣質(zhì)聯(lián)用分析及不同萃取物部分的抗氧化活性試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 植物來源叉枝斑鳩菊于2012年9月采自廣西柳州，經(jīng)黃德青博土鑒定為菊科(Compositae)斑鳩菊屬(Vernonia)植物叉枝斑鳩菊(Vernoniadivergens(DC.) Edgew.)。植物樣本存放于桂林師范高等?？茖W(xué)?；瘜W(xué)系與藥學(xué)系博士科研室，新鮮樣品經(jīng)自然晾干后備用。

1.2 主要儀器氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀(島津QP2010，日本島津公司)，北京普析TU-1901雙波長紫外可見分光光度計(jì)。

1.3 試劑DPPH(1，1-二苯基-2-三硝基苯肼)、維生素C、1，10-鄰菲啰啉、鄰苯三酚、Na2HPO4、NaH2PO4、硫酸亞鐵銨(FeSO4(NH4)2SO4)、H2O2、鐵氰化鈉、三氯乙酸、FeCl3、三羥甲基氨基甲烷(Tris)、鹽酸、乙醇等，以上試劑均為分析純。

1.4 GC-MS 分析

1.4.1色譜條件。石英毛細(xì)管柱Rtx-1MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm。升溫程序從40 ℃開始，保持1 min，以10 ℃/min升至250 ℃，保持35 min，進(jìn)樣量1 μl，分流比1∶40，載氣為He，柱流量1.0 ml/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃。

1.4.2質(zhì)譜條件。EI源，電離電壓70 eV，離子源溫度200 ℃，掃描范圍20～500 amu，質(zhì)譜庫NIST27和NIST147。

1.4.3樣品定性、定量分析方法。對得到的總離子流圖中各峰進(jìn)行質(zhì)譜掃描，得到相應(yīng)各峰質(zhì)譜圖，與Nist 27、Nist 147數(shù)據(jù)庫標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行對比分析，確認(rèn)叉枝斑鳩菊揮發(fā)油中各組分化學(xué)結(jié)構(gòu)，用峰面積歸一化法計(jì)算出各組分在揮發(fā)油中的相對百分含量。

1.5 樣品前處理方法取叉枝斑鳩菊粉碎后樣品20 g，置于250 ml索氏提取器中，丙酮提取3 h，提取液濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，乙醚萃取2次，每次30 ml，乙醚層用無水碳酸鈉干燥，濃縮得浸膏0.5 g。浸膏用1 ml正己烷溶解，溶液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾作為樣品供試液。

1.6 抗氧化活性分析粉碎后的叉枝斑鳩菊樣品20 g，置于250 ml索氏提取器中，丙酮提取3 h，真空濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，先后用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得到正己烷提取物(EO)、乙酸乙酯提取物(EE)、正丁醇萃取物(BE)。以上3種萃取物以維生素C作對比進(jìn)行抗氧化活性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 GC-MS分析從叉枝斑鳩菊低極性成分的相對百分含量和總離子流圖(表1和圖1)可看出，已鑒定的29個(gè)化合物占總含量的88.30%，其中脂肪類及其脂類占已鑒定化合物的74.91%；含量較多的包括棕櫚酸(13.46%)、棕櫚酸甲酯(13.49%)、(Z)-十八烯酸甲酯(7.87%)、13，16-十八碳二烯酸甲酯(4.49%)、棕櫚酸丁基酯(5.23%)、(正)十七烷(4.07%)。

表1 叉枝斑鳩菊低極性化學(xué)成分

2.2 抗氧化活性分析按“1.6”項(xiàng)方法，叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，并測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進(jìn)行對比。結(jié)果顯示(圖2)，正丁醇萃取部分對DPPH及還原能力比乙酸乙酯萃取部分及正己烷萃取部分有較強(qiáng)的活性。

3 結(jié)論

筆者對叉枝斑鳩菊中低極性成分進(jìn)行了GC-MS分析及不同萃取部分的抗氧化活性的研究，GC-MS檢出的各成分與Nist 27、Nist 147數(shù)據(jù)庫標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行對比分析，確認(rèn)了29個(gè)化合物，其含量占總檢出峰的88.30%。叉枝斑鳩菊以丙酮提取后分別以正己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，測定各提取部分對DPPH、還原能力，并與Vc進(jìn)行對比，證實(shí)了正丁醇萃取部分具有一定的抗氧化活性。通過對叉枝斑鳩菊低極性部分進(jìn)行GC-MS分析及抗氧化活性測試，發(fā)現(xiàn)該植物有進(jìn)一步研究的價(jià)值。

[1] 中國植物志編委會.中國植物志第74卷[M].北京：科學(xué)出版社，1985：30.

[2] 孫力，巴玉蘭，于魯海，等.斑鳩菊屬植物藥理活性研究進(jìn)展[J].新疆中醫(yī)藥，2009，27(6)：82-85.

[3] 劉清華，楊峻山，索茂榮.斑鳩菊屬的倍半萜內(nèi)酯類及甾體皂苷類化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2007，32(1)：10-17.

[4] 李蓉濤，丁智慧，丁靖塏.滇緬斑鳩菊的化學(xué)成分[J].云南植物研究，1997，19(4)：443-445.

[5] 劉靜，丁廣治，庾石山.毒根斑鳩菊莖皮的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2010，35(11)：1421-1424.

GC-MS Analysis of Low-polar Compounds and Antioxidant Activity Test ofVernoniadivergens

YANG Dan1,2, LIU Xian-xian1, ZHANG Ye1, CHENG Zhong-quan1*et al

(1. Department of Chemistry and Pharmaceutical Sciences, Guilin Normal College, Guilin, Guangxi 541001; 2. School of Chemical Science and Technology, Yunnan University, Kunming, Yunnan 650091)

[Objective] To analyze the low-polarity chemical constituents and antioxidant activity of V. divergens. [Method]V.divergenswere extracted with acetone and were isolated and identified by GC-MS method. The relative contents of the chemical constituents were determined by area normalization method. [Result] 29 compounds were detected and identified which accounted for 88.30 % of total low-polarity chemical constituents.V.divergenswere extracted and concentrated successively with n-hexane, EtOAc, n-butanol to yield essential oils (EO), EtOAc extracts (EE) and n-butanol extracts (BE). The antioxidant activities of different parts were evaluated and compared with Vc as standard antioxidant in vitro against DPPH to give the results of antioxidant activity ofV.divergens. [Conclusion]V.divergenshas further research value based on the GC-MS analysis and antioxidant activity research.

Vernoniadivergens; Low-polarity components; GC-MS; Antioxidant activity

廣西自然科學(xué)基金(2014GXNSFBA118050)；化學(xué)與分子工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(CMEMR2014-B)

楊丹(1984- )，女，四川眉山人，講師，博士，從事天然藥物化學(xué)成分及活性研究。*通訊作者，教授，博士，從事天然藥物化學(xué)成分及活性研究。

2014-11-28

S 567

A

0517-6611(2015)02-097-03