浦城縣高致病性禽流感疫苗免疫效果監測分析

浦城縣高致病性禽流感疫苗免疫效果監測分析

呂國榮1，詹文輝2

(1.福建省浦城縣動物衛生監督所353400;2.福建省南平市動物疫病預防控制中心353000)

根據禽流感病毒致病性和毒力的不同，可以將禽流感分為高致病性禽流感、低致病性禽流感和無致病性禽流感。高致病性禽流感其發病率和死亡率都很高。做好預防和控制很重要，現將我縣2014年高致病性禽流感免疫監測情況報告如下。

1材料準備

儀器：天平、普通離心機、微型振蕩器、微量移液器、滴頭、96孔V型血凝反應板。試劑：禽流感病毒H5亞型標準抗原及標準陽性血清(哈爾濱獸醫研究所)。

2操作方法

2.1　血凝(HA)試驗

①采用微量血凝試驗，在微量凝集板上，從第1孔至第12孔，用加樣器每孔加入PBS0.025mL，第1孔加抗原(病毒懸液)0.025mL，混勻。從第1孔起，依次作倍比稀釋至第11孔，最后棄掉0.025mL。每孔再加入0.025mLPBS。② 每孔加入1%雞紅細胞懸液0.025mL(將紅細胞懸液充分搖勻后加入)，第12孔設不加病毒的紅細胞對照孔，立即在微量振蕩器上搖勻，置室溫(20~25℃)40分鐘，觀察結果(如果環境溫度太高，可置4℃環境下)。對照孔紅細胞將成明顯的鈕扣狀沉到孔底。③結果判定：將板傾斜，觀察紅細胞有無呈淚滴狀流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀釋倍數代表一個血凝單位(HAU)。

2.2　血凝抑制(HI)試驗

①根據2.1試驗結果配制4HAU的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀釋倍數作為終點，終點稀釋倍數除以4即為含4HAU的抗原的稀釋倍數。例如，如果血凝的終點滴度為1∶256，則4HAU抗原的稀釋倍數應是1∶64。②在微量反應板的1-11孔加入0.025 mLPBS，第12孔加入0.05mLPBS。③吸取0.025 mL待檢血清加入第1孔內，充分混勻后吸0.025mL于第2孔， 依次倍比稀釋至10孔， 從第10孔吸取0.025mL棄掉。④1-11孔均加入4HAU 混勻的病毒抗原液0.025mL，室溫(約20℃)靜置至少30min。⑤每孔加入0.025mL(V/V)的 1%紅細胞懸液混勻， 室溫靜置約40min。對照紅細胞呈明顯鈕扣狀沉于孔底。

3結果判定

以完全抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數作為HI滴度。只有陰性對照孔血清滴度不大于2log2，陽性對照孔血清誤差不超過1個滴度，試驗結果才有效。HI價小于或等于3 log2判定HI試驗陰性；HI價等于4 log2為可穎，需重復試驗；HI價大于或等于5log2為陽性。

4監測結果

全縣監測結果為：種雞場100份血清，100份抗體陽性，免疫抗體合格率達100%；商品雞場253份血清，244份抗體陽性，免疫抗體合格率達96.44%；散養雞190份血清，185份抗體陽性，免疫抗體合格率達97.37%。商品鴨場180份血清，168份抗體陽性，免疫抗體合格率達93.33%；散養鴨95份血清，92份抗體陽性，免疫抗體合格率達96.84%。

5結果分析

監測結果表明，浦城縣高致病性禽流感免疫抗體合格率較高，達到農業部規定的免疫抗體合格率全年保持在70%以上的要求。

重視培訓。我縣加強了村級動物防疫員培訓工作。培訓內容包括動物防疫相關法律法規及規章制度、疫苗基礎知識、免疫接種及免疫反應的預防與處理、消毒基礎知識、樣品的采集、保存與運輸方法、病死動物無害化處理方法等。開展村級動物防疫員集中培訓，主要是為了提高村級動物防疫人員的理論水平、操作技能和服務水平。

加強免疫。我縣各鄉鎮成立免疫專業隊，由鄉鎮領導，村干部、鄉鎮掛村人員、村動物防疫員及其他有關人員等組成，業務干部進村入戶指導。逐村逐戶開展集中免疫，堅決杜絕“三漏免”和“三不免”現象。堅持集中免疫和每月補免日制度。

加大督查。在春秋季動物集中免疫期間，我縣組織督查組開展檢查指導，按照“領導到位、責任到人，冷鏈到底、疫苗到員，檔案到戶，標識到畜”的要求，對各鄉鎮免疫情況開展專項檢查，重點檢查免疫工作進展、免疫密度、人員到位等情況，結合省市下達的績效管理考核內容，及時糾正免疫中存在的不足問題，促進免疫進度，督促落實各項防控措施，確保動物疫病防控工作取得良好成效。