胱抑素C、超敏C 反應蛋白、尿微量蛋白和尿β2-微球蛋白在早期糖尿病腎病診斷中的應用

仲曉玲，張 靜，李 平

(江蘇省南京市鼓樓醫院 輸血科，江蘇 南京，210008)

糖尿病并發癥涉及大動脈血管病變和微血管病變，微血管病變中又以糖尿病腎病(DN)最為重要，是糖尿病致死、致殘的主要因素，如不及診治，終末期患者5年期生存率不足20%［1］。DN 發病相對隱匿，病情呈緩慢進展，早期臨床體征不明顯，常規檢查易造成漏診而延誤治療，影響預后。近年來，臨床應用內源性標志物如血清胱抑素C(Cys-C)、尿微量蛋白(U-mAlb)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)評價腎小球濾過功能日趨廣泛［2－3］，另一方面，超敏C 反應蛋白(hs-CRP)等與糖尿病血管病變發生發展密切相關［4］。本研究通過檢測120例DN 患者血清Cys-C、血清hs-CRP、尿β2-MG、和U-mAlb 水平，與30例健康人對比，探討聯合檢測在DN 早期診斷中的應用價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年12月—2014年6月南京市鼓樓醫院住院治療的2 型糖尿病患者110 為研究對象，均符合中華醫學會《中國2 型糖尿病防治指南(2010 版)》中關于2 型糖尿病的診斷標準［5］，同時排除存在急慢性腎炎、原發性高血壓、泌尿系統感染、糖尿病酮癥酸中毒，以及伴有惡性腫瘤或嚴重心肺功能不全患者。其中男58例，女52例;年齡40～75歲，平均(54.5±6.8)歲。根據患者24 h 尿微量白蛋白排泄率(UAER)將患者分為白蛋白正常組(UAER＜30 mg/24 h)、微量白蛋白組(UAER 30～300 mg/24 h)和大量白蛋白組(UAER＞300 mg/24 h)組。白蛋白正常組32例，其中男17例，女15例，平均(53.5±5.6)歲;微量白蛋白組45例，其中男24例，女21例，平均(54.1±7.2)歲;大量白蛋白組33例，其中男17例，女16例，平均(55.1±6.1)歲。另選取同期健康體檢者30例為對照組，其中男14例，女16例，平均(54.9±6.2)歲。4組性別、年齡等一般資料差異無統計學意義(P＞0.05)。患者均簽署知情同意，并配合相關檢查。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集:研究對象于清晨空腹狀態下抽取肘靜脈血3 mL 置于促凝管，2 h 內分離血清，3000 r/min 離心10 min 置于－70°C 冰箱保存備檢。另囑咐受試者分別留取24 h 尿液和晨尿，尿液混勻后取5 mL 于試管內待測。

1.2.2 檢測方法:血清hs-CRP 檢測采用酶聯免疫吸附試驗，血清Cys-C、尿β2-MG 和U-mAlb 均采用免疫比濁法，儀器均選用日立7600 全自動生化分析儀，操作均按各試劑盒要求嚴格執行。

1.3 觀察指標

觀察不同組別受試者血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 表達水平的差異。并計算不同指標以及聯合檢測下診斷的靈敏度、特異度、準確度。實驗室各項指標正常值范圍:血清Cys-C＜1.25 mg/L，hs-CRP:0～2.1 mg/L，尿β2-MG:0.01～0.30 μg/mL，UmAlb:0.62～16.70 μg/mL，單項指標超過正常值范圍上限為陽性，聯合檢測中任何單項指標超過正常值范圍上限為陽性，所有指標低于上限為陰性。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 各組血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 檢測結果比較

與對照組相比，除白蛋白正常組hs-CRP 和尿β2-MG 差異無統計學意義外(P＞0.05)，3組患者Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 水平均升高，差異有統計學意義(P＜0.05 或P＜0.01)。兩兩比較顯示，不同白蛋白水平的組間上述指標差異有統計學意義，其中大量白蛋白組上述指標水平均 顯著高 于其余2組(P＜0.05 或P＜0.01)。見表1。

表1 各組血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 檢測結果()

表1 各組血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 檢測結果()

與對照組比較，* P＜0.05，＊＊P＜0.01;與白蛋白正常組比較，#P＜0.05，##P＜0.01;與微量白蛋白組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

2.2 血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb單項或聯合檢測對DN 的診斷價值

依據UAER 水平將患者分為DN 陰性(UAER＜30 mg/24 h)32例和DN 陽性(UAER≥30 mg/24 h)78例。單項檢測中，血清Cys-C 靈敏度和準確率最高，分別為79.49%和84.55%;血清Cys-C聯合尿β2-MG 和U-mAlb 檢測靈敏度均上升，分別為87.18%和84.62%。4 項指標聯合檢測的靈敏度最高，為91.03%。見表2。

表2 各指標單項或聯合檢測對DN 的診斷價值

3 討論

DN 是糖尿病嚴重并發癥之一，發病早期缺乏明顯臨床特征，實驗室檢查對于早期DN 診斷和預后判斷具有重要價值。DN 早期以腎小球肥大為主要特征，同時伴有腎小球和腎小管基底膜增厚以及系膜區細胞外基質進行性積聚，臨床以微量蛋白尿主要表現［6］，U-mAlb 是肝臟分泌的一種帶負電荷的蛋白質，絕大多數因同性電荷排斥作用而無法通過濾過膜。因此U-mAlb 升高可作為判斷腎小球篩網選擇和電荷選擇屏障損傷程度的重要標志蛋白［7］。本研究中，相比健康對照組，糖尿病患者U-mAlb 含量均顯著增高。蔡文娟等［8］還報道了U-mAlb/肌酐在監測尿蛋白排泄中的同樣具有較高的應用價值。

β2-MG 由淋巴細胞、血小板、多形核白細胞產生，正常情況，人β2-MG 合成和釋放速度相對恒定，經腎小球濾過的β2-MG 在近曲小管被吸收，并被分解破壞呈氨基酸，血清β2-MG 和尿β2-MG異常升高分別反映了腎小球濾過功能和腎小管損傷［9］。有研究［10］提示，年齡、性別等因素對β2-MG 含量測定影響較小，相比肌酐、尿素氮等常規檢測，β2-MG 對腎臟損傷更為敏感。本研究結果顯示，相比健康對照組，微量和大量白蛋白組患者尿β2-MG 顯著增高，與相關研究結論一致。此外，由于β2-MG 在近曲小管被吸收，其水平升高還有助于對腎臟受損部位的鑒別診斷［11］。

同樣，Cys-C 生成速度也不受性別、年齡、發熱等因素影響［12］，經腎小球自由基濾過而被近曲小管重吸收。Dharnidharka 等［13］通過Meta 分析得出Cys-C 與腎小球濾過率相關性更好，作為一種小分子蛋白，可更好地反應不同程度腎功能損害時腎小球濾過功能變化。本研究中，相比其他指標單項檢測，Cys-C 靈敏度最高，為79.49%。荊愛玉等［14］也指出，血清Cys-C 檢測可彌補UmAlb 檢測引起的漏診，本研究也觀察到血清Cys-C 聯合U-mAlb 檢測結果的敏感度為84.62%，高于U-mAlb/(μg/mL)單項檢測的75.64%。

有研究指出炎癥因子不但引起內皮細胞功能異常，促進胰島素抵抗，還誘導B 細胞結構和功能發生障礙［15］。CRP 作為急性時相蛋白的一種，能通過影響內皮細胞導致內皮功能受損，而后者又以微量蛋白尿為主要表現，因此CRP 與2 型糖尿病患者微量蛋白尿和體內慢性低水平炎癥反應存在關聯。吳鳳麗等［16］報道了2 型糖尿病患者CRP 水平隨著U-mAlb 水平增加而增加。而hs-CRP 作為診斷血管炎性反應更為敏感，本研究中，不同白蛋白組與健康對照組hs-CRP 差異均具有統計學意義。另外，相關性研究還指出DN 患者與β2-MG 呈顯著正相關，但由于hs-CRP 僅能反應體內炎癥狀態，常需和其他指標聯合檢測。

此外，本研究結果顯示，血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 均具有一定的診斷價值，而血清Cys-C 聯合尿β2-MG 或U-mAlb 時均能提高診斷準確率，提示Cys-C 可作為較理想內源性腎功能標記物。盡管4 項指標聯合檢測時，診斷靈敏度和特異度均優于單項或兩項指標聯合檢測，但實際應用中應考慮成本效益。綜上所述，血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 均能有效診斷早期DN，聯合檢測可潛在提高診斷敏感性和準確率，對延緩DN 發生發展具有重要意義，但由于研究樣本偏小，有待進一步擴大樣本以證實聯合檢驗的效能。

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