李璐奕 汪暉 熊婕 王建 袁芳
解酒保肝劑對小鼠酒精中毒的影響
李璐奕 汪暉 熊婕 王建 袁芳
目的觀察解酒保肝劑對小鼠醉酒實驗、血清乙醇濃度和肝組織丙二醛含量的影響。方法50只小鼠隨機分為給藥組和對照組, 每組25只。給藥組小鼠給予解酒保肝劑灌胃, 對照組給予雙蒸餾水灌胃。記錄小鼠翻正反射消失及恢復時間, 取肝勻漿, 檢測肝臟丙二醛(MDA)含量, 用頂空氣相色譜法檢測血酒精濃度。結果與對照組比較, 給藥組翻正反射消失時間明顯延長(P<0.01), 翻正反射時間明顯縮短(P<0.05), 肝MDA含量顯著降低(P<0.05), 血酒精含量顯著降低(P<0.01)。結論解酒保肝劑具有良好的解酒作用。
解酒保肝劑;翻正反射;丙二醛含量
本實驗參照典籍及中醫處方理論, 用枳椇子、葛根、五味子三味中藥制成解酒保肝劑、并觀察其對小鼠醉酒實驗、血清乙醇濃度和肝、胃組織丙二醛(MDA)含量的影響。
枳椇子和葛根屬衛生部(現衛計委)批準的藥食兩用的天然藥物, 具有較好的解酒效果。五味子屬衛生部批準的可用于保健食品的藥物, 具有良好的保肝功能[1-3]。從中醫處方理論上說, 三者結合具有清熱利濕、化瘀解毒、肝胃并治、行斂相兼, 從多環節共同發揮解酒保肝的功效, 達到了綜合的藥理效應。該組方的主要藥理作用體現在:①以枳椇子為主, 通過增強ADH活性, 減少酒精經胃腸吸收和促進酒精經肝臟生理途徑代謝;②以葛根為主, 抑制血中乙醇、乙醛濃度的升高, 改善乙醇引起的代謝損傷;③以五味子為主, 通過增加肝臟抗氧化酶活性, 增強肝臟的解毒護肝作用。
1.1 材料 雄性昆明小鼠SPF級, 體重18~22 g, 許可證號:SCXK(鄂)2005~2008, 由湖北省疾病預防中心提供。解酒保肝劑(枳椇子、葛根、五味子, 由武漢龍泰藥業有限公司提供)、MDA檢驗試劑盒(南京建成生物工程研究所)、化學試劑皆為分析純、島津UV-1601;低溫高速離心機:日立CF-15R;電子雪花制冰機:AF-10型, SCOTSMAN, 意大利;臺式高速離心機:TGL-16G型, 上海醫用分析儀器廠;電動玻璃勻漿機:DY89-Ⅰ型, 寧波新芝儀器研究所;臺式水浴恒溫振蕩器:SHZ-88型, 江蘇太倉市實驗設備廠。
1.2 方法
1.2.1 醉酒實驗 上述分組情況:將50只雄性昆明小鼠隨機分為給藥組和對照組, 每組25只。以普通飼料適應性飼養3~5 d后, 給藥組分別以0.2 ml/10g的提取物灌胃, 對照組以0.2 ml/10 g的雙蒸餾水灌胃,1次/d, 連續7 d, 最后1 d灌胃后30~60 min, 兩組均灌以醉酒劑量的乙醇,10 min后觀察其步態失穩情況, 記錄小鼠翻正反射消失及恢復時間。
1.2.2 肝組織丙二醛(MDA)含量和血酒精濃度的測定 在灌酒后5~10 h后處死動物, 取血清、肝組織, 分別制成肝勻漿,檢測肝臟MDA含量, 用頂空氣相色譜法檢測血酒精濃度。
1.3 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行統計分析。計量資料用均數±標準差(±s)表示, 采用t檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。
2.1 動物翻正反射消失及恢復時間 醉酒實驗中, 與對照組相比, 服用解酒保肝劑的給藥組的小鼠從飲酒到翻正反射消失時間明顯延長(P<0.01), 翻正反射恢復時間明顯縮短(P<0.05), 見表1。
2.2 肝損傷影響(MDA) 與對照組相比, 給藥組的肝MDA含量有顯著性的降低(P<0.05), 說明其對酒精性肝損傷有保護作用。見表2。
表1 兩組小鼠醉酒實驗結果(±s, min)

表1 兩組小鼠醉酒實驗結果(±s, min)
注:與對照組相比,aP<0.01,bP<0.05
組別 例數 翻正反射消失時間 翻正反射恢復時間對照組 25 38.5±15.6 315.2±144.1給藥組 25 98.4±48.9a 201.4±98.5b
表2 MDA含量結果(±s, nmol/mg)

表2 MDA含量結果(±s, nmol/mg)
注:與對照組相比,aP<0.05
組別 例數 肝組織MDA含量對照組 25 3.5±0.6給藥組 25 2.1±0.5a
2.3 血酒精濃度的測定 與對照組相比, 給藥組的血酒精含量有顯著的降低(P<0.01), 說明其能有效降低酒后血中的酒精含量, 有解酒作用。見表3。
表3 血酒精含量結果(±s, mg/ml)

表3 血酒精含量結果(±s, mg/ml)
注:與對照組相比,aP<0.01
組別 例數 血酒精含量對照組 25 3.8±0.7給藥組 25 2.0±0.5a
經藥效學研究, 觀察動物醉酒后的翻正反射消失和恢復時間的變化說明解酒保肝劑具有良好的減緩醉酒和加快醒酒作用;MDA含量的變化說明其對抗肝臟的膜脂質過氧化作用,對酒精性肝損傷有明顯的保護作用;血酒精濃度的變化說明其能有效降低小鼠血酒精濃度, 從而達到解酒的作用。
[1]中國藥典委員會. 中國藥典(一部).北京: 中國醫藥科技出版社,2010.
[2]王薇. 營養保健食品的發展與管理. 食品科技,1995(1):42-43.
[3]黃永平, 周世文. 解酒保肝口服液對小鼠酒精中毒的影響. 中國醫院藥學雜志,2002(11):672-673.
10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.163
2014-10-29]
201299 上海市浦東新區人民醫院(李璐奕 王建袁芳);武漢大學基礎醫學院(汪暉 熊婕)